マウス＜－＞ラットキメラを用いたノックアウトラット作製法の開発

• 研究課題/領域番号: 24500490
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 磯谷 綾子 大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特任准教授 (20444523)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: 疾患モデル動物 / 遺伝子組換え / 異種キメラ / 遺伝子組み換え / モデル動物

研究成果の概要

ノックアウトラットの作出には、広い飼育スペースが必要でかつ、受精胚の安定的な供給が難しいといった問題点がある。そこで、マウス胚にラットES細胞を打込むと誕生する異種キメラに着目し、ノックアウトラット新規作製法の開発を目指した。全身だけでなく精子頭部もGFPで標識されるES細胞を樹立し、遺伝子ターゲティングを行った。このES細胞をマウス胚にインジェクションし、マウス←ラットESキメラを誕生させた。GFPを指標にES細胞由来の精子を判定して顕微授精によりES細胞由来の仔を誕生させることができた。以上の結果より、異種キメラを用いたノックアウトラットの新規作製法を確立することができた。

研究成果

• [雑誌論文] Induction of Primordial Germ Cell-Like Cells From Mouse Embryonic Stem Cells by ERK Signal Inhibition. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Kaga Y, Ohta H, Odamoto M, Sekita Y, Li K, Yamano N, Fujikawa K, Isotani A, Sasaki N, Toyoda M, Hayashi K, Okabe M, Shinohara T, Saitou M, Nakano T.
  • 雑誌名: Stem Cells 巻: 32 号: 10 ページ: 2668-2678
  • DOI: 10.1002/stem.1781
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Generation of mutant mice by pronuclear injection of circular plasmid expressing Cas9 and single guided RNA. (2013)
  • 著者名/発表者名: Mashiko D, Fujihara Y, Satouh Y, Miyata H, Isotani A, Ikawa M.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 3: 3355 号: 1 ページ: 1-6
  • DOI: 10.1038/srep03355
  • NAID: 120006957396
  • 査読あり
• [雑誌論文] SPACA1-deficient male mice are infertile with abnormally shaped sperm heads reminiscent of globozoospermia (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujihara Y, Satouh Y, Inoue N, Isotani A, Ikawa M, Okabe M
  • 雑誌名: Development 巻: 139 号: 19 ページ: 3583-9
  • DOI: 10.1242/dev.081778
  • NAID: 120006957401
  • 査読あり
• [学会発表] マウス←ラットESキメラを介した遺伝子変異ラットの作出 (2015)
  • 著者名/発表者名: 磯谷 綾子
  • 学会等名: 第62回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 京都テルサ
  • 年月日: 2015-05-28 – 2015-05-30
• [学会発表] A trial to form an organ from ES cells --- a rat thymus in rat-nude mouse chimera. (2012)
  • 著者名/発表者名: 磯谷 綾子
  • 学会等名: 第7回 研究所ネットワーク国際シンポジウム
  • 発表場所: 東北大学加齢医学研究所
• [学会発表] マウスとラットの異種キメラの話 (2012)
  • 著者名/発表者名: 磯谷 綾子
  • 学会等名: 第5回生殖若手の会
  • 発表場所: 東京大学三崎臨海実験所
• [図書] 実験医学 (2014)
  • 著者名/発表者名: 磯谷綾子
  • 総ページ数: 132
  • 出版者: 羊土社
• [図書] プログレッシブ 生命科学 (2014)
  • 著者名/発表者名: 磯谷綾子、伊川正人
  • 総ページ数: 312
  • 出版者: 南山堂
• [図書] 生命科学から創薬へのイノベーション (2014)
  • 著者名/発表者名: 磯谷綾子、伊川正人
  • 総ページ数: 202
  • 出版者: 南山堂
• [備考] 自己紹介ページ
  • URL: http://www.egr.biken.osaka-u.ac.jp/information/ayako_isotani.html
• [備考] 大阪大学微生物病研究所遺伝子機能解析学分野ホームページ
  • URL: http://www.egr.biken.osaka-u.ac.jp/information/index.html
• [備考] 大阪大学微生物病研究所/免疫学フロンティア研究センター附属感染動物実験施設ホームページ
  • URL: http://www.arcid.biken.osaka-u.ac.jp/
• [備考] 大阪大学 微生物病研究所 遺伝子機能解析分野 ホームページ
  • URL: http://www.egr.biken.osaka-u.ac.jp/information/member.html
• [備考] 個人ホームページ
  • URL: http://www.egr.biken.osaka-u.ac.jp/information/ayako_isotani.html
• [備考] 遺伝子機能解析分野のホームページ
  • URL: http://www.egr.biken.osaka-u.ac.jp/information/index.html
• [備考] 感染動物実験施設のホームページ
  • URL: http://www.arcid.biken.osaka-u.ac.jp/school/
• [備考] 自己紹介 -personal data-
  • URL: http://www.egr.biken.osaka-u.ac.jp/information/ayako_isotani.html