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NMRによる光制御型転写因子オーレオクロームの光構造変化とDNA結合様式の追跡

研究課題

研究課題/領域番号 24540435
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 生物物理・化学物理
研究機関大阪大学

研究代表者

濱田 格雄  大阪大学, 産学連携本部, 講師 (80379148)

研究分担者 久冨 修  大阪大学, 大学院理学研究科, 准教授 (60231544)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
キーワードNMR / 構造変化 / 光受容タンパク質 / DNA結合 / 転写因子 / 光構造変化 / タンパク質 / タンパク質間相互作用 / 光制御
研究成果の概要

NMRによる光制御転写因子オーレオクロームの光構造変化とDNA結合様式の追跡を目指し、ラベルタンパク質の合成ならびにNMR測定さらにDNAとの結合の解析を進めた。NMR測定においては、タンパク質骨格部分の構造変化は確認されたが、構造決定には至らなかった。DNAとの結合様式に関しても同様で、シグナルのブロードニングによりアサインはできなかったが、光構造変化様式に違いがあることが分かった。一方、タンパク質変異体作製では、光による二量体化を野生型にくらべ20倍程度安定化する変異体作製に成功した。これら変異体は二量体構造を安定に保持することも確認できた。

報告書

(4件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2015 2014 2013 2012

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (6件) (うち招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Molecular mechanism of Photozipper, a light-regulated dimerizing module consisting of the bZIP and LOV domains of Aureochrome-12015

    • 著者名/発表者名
      Y. Nakatani, O. Hisatomi
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: E-pub 号: 21 ページ: 10-10

    • DOI

      10.1021/acs.biochem.5b00320

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Blue light-induced dimerization of monomeric aureochrome-1 enhances its affinity for the target sequence.2014

    • 著者名/発表者名
      O. Hisatomi, Y. Nakatani, K. Takahashi, H. Kataoka
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem.

      巻: 289 号: 25 ページ: 17379-17391

    • DOI

      10.1074/jbc.m114.554618

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Accuracy of Protein Size Estimates Based on Light Scattering Measurements.2014

    • 著者名/発表者名
      Takeuchi, K. , Nakatani, Y. and Hisatomi, O
    • 雑誌名

      Open Journal of Biophysics

      巻: 4 ページ: 83-91

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] bZIP型転写因子の光制御機構とその応用2014

    • 著者名/発表者名
      久冨 修
    • 雑誌名

      生物物理

      巻: 54 号: 6 ページ: 307-310

    • DOI

      10.2142/biophys.54.307

    • NAID

      130004713030

    • ISSN
      0582-4052, 1347-4219
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Blue Light-Induced Conformational Change in a Light-Regulated Transcription Factor, Aureochrome-12013

    • 著者名/発表者名
      Osamu Hisatomi, Ken Takeuchi, Kazunori Zukihara, Yuki Ookubo, Yoichi Nakatani, Fumio Takahashi, Satoru Tokutomi and Hironari Kataoka
    • 雑誌名

      Plant & Cell Physiol

      巻: 54(1) 号: 12 ページ: 93-106

    • DOI

      10.1093/pcp/pcp160

    • NAID

      10031145653

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Ultrafast Hydrogen-Bonding Dynamics in the Electronic Excited State of Photoactive Yellow Protein Revealed by Femtosecond Stimulated Raman Spectroscopy2012

    • 著者名/発表者名
      中村亮介
    • 雑誌名

      Journal of Physical Chemistry B

      巻: 116 号: 51 ページ: 14768-14775

    • DOI

      10.1021/jp308433a

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] A photo-activated basic-leucine zipper module, opZL2014

    • 著者名/発表者名
      O. Hisatomi
    • 学会等名
      16th ICRP (International Conference on Retinal Protein
    • 発表場所
      Nagahama, Japan
    • 年月日
      2014-10-05 – 2014-10-10
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Influence of steric limitations around chromophore in protein cage of photoactive yellow protein2014

    • 著者名/発表者名
      N. Hamada, N. Inazumi, R. Nakamura
    • 学会等名
      16th ICRP (International Conference on Retinal Protein
    • 発表場所
      Nagahama, Japan
    • 年月日
      2014-10-05 – 2014-10-10
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 光受容タンパク質の光誘起構造変化と水素結合ダイナミクス2014

    • 著者名/発表者名
      中村亮介、濱田格雄
    • 学会等名
      第69回日本物理学会
    • 発表場所
      東海大学
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Functional analyses of each domain in Aureochrome-12013

    • 著者名/発表者名
      中谷 陽一, 竹内 健 , 井澤 洋介 , 高橋 文雄, 片岡 博尚, 久冨 修
    • 学会等名
      第51回生物物理学会
    • 発表場所
      京都国際会館
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Measurements of molecular weights of soluble proteins using static light scattering2013

    • 著者名/発表者名
      竹内 健, 中谷 陽一, 久冨 修
    • 学会等名
      第51回生物物理学会
    • 発表場所
      京都国際会館
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 青色光により励起される転写因子AUREO1の構造変化2012

    • 著者名/発表者名
      Osamu Hisatomi, Ken Takeuchi,,Yoichi Nakatani, Fumio Takahashi,Hironari Kataoka
    • 学会等名
      生物物理学会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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