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生体酸化ストレスマーカーの多チャンネル測定システムの開発

研究課題

研究課題/領域番号 24550106
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 分析化学
研究機関東京薬科大学

研究代表者

楠 文代  東京薬科大学, 薬学部, 教授 (70057371)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2012年度)
配分額 *注記
5,590千円 (直接経費: 4,300千円、間接経費: 1,290千円)
2014年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2013年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2012年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
キーワード抗酸化物質 / 酸化ストレス / 電気化学分析 / 電気化学検出HPLC / 電気分析化学 / バイオマーカー / 動脈硬化 / 糖尿病
研究概要

本年度は、多種類の検出モードで多成分の分析が可能となるように、検出用の電極材料の検討、酸化還元物質ばかりでなく酸物質の定量法の構築、疎水性の異なる抗酸化物質が測定できる多チャンネル測定システムの構築を行った。
検出用の電極材料の検討においては、検出可能物質を拡張するため高電位側の電気化学検出が見込まれるダイヤモンド電極を取り扱った。ダイヤモンド電極を用いたボルタモグラム上に、グルコース及びアラニンなどの12種のアミノ酸について明瞭な酸化波が現れ、電気化学検出が可能であることが分かった。また、ダイヤモンド電極を用いたノビレチンとタンゲレチンの電気化学検出が可能であった。電気化学検出キャピラリーLCを構築して、シークワーサージュース投与後のラット血中のノビレチンの動態分析が可能であった。
酸の検出には、キノン試薬を用いた還元前置波による電流検出方式を採用した。ドコサヘキサエン酸とエイコサペンタエン酸を分析対象として電気化学検出HPLCによる定量を行った。定量範囲0.75μmol/L~0.1 mmol/L、併行精度2.9%RSD以下で実用性に優れた方法が確立できた。
疎水性の異なる抗酸化物質への適用を可能とするため、昨年度の多チャンネル測定システムの改良を行い、中医薬中の11種の抗酸化物質の分離定量を行った。クロロゲン酸類、フラボノイド類、フェニルエタノイド配糖体など疎水性の異なる抗酸化物質は、動脈硬化に効果のあるオウゴンやレンギョウを含む中医薬双黄連に含まれる生理活性物質である。3チャンネル電気化学検出HPLCシステムは、ポンプ3基、カラムスイッチングバルブ2基、ODSのプレカラム1本、分離カラム3本につきそれぞれ接続した電気化学検出器3基を備える3流路方式である。11種の測定対象の一斉分析における定量限界は0.11~0.90 ng/mLの範囲で高感度であった。

報告書

(2件)
  • 2013 実績報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて 2014 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (7件)

  • [雑誌論文] Determination of Cryptotanshinone, Tanshinone I and Tanshinone IIA in Salvia Miltiorrhiza by Micro HPLC with Amperometric Detection2013

    • 著者名/発表者名
      Xianchun Chen, Akira Kotani, Hideki Hakamata, Shouying Du, Jie Wang, Fumiyo Kusu
    • 雑誌名

      Anal. Lett.

      巻: 46 号: 4 ページ: 605-614

    • DOI

      10.1080/00032719.2012.730593

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Three-channel Column-switching High-performance Liquid Chromatography with Electrochemical Detection for Determining Bioactive Redox Components in Salvia Miltiorrhiza2012

    • 著者名/発表者名
      Xianchun Chen, Akira Kotani, Hideki Hakamata, Shouying Du, Jie Wang, Fumiyo Kusu
    • 雑誌名

      J. Chromatogr. A

      巻: 1256 ページ: 105-113

    • DOI

      10.1016/j.chroma.2012.07.061

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Development of an Electric Charge-Tunable Micro-column for Capillary Liquid Chromatography2012

    • 著者名/発表者名
      Liu, X.
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 28 号: 9 ページ: 853-859

    • DOI

      10.2116/analsci.28.853

    • NAID

      130004442134

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 中医薬中抗酸化物質の一斉分析のための3流路系電気化学検出HPLCの開発2014

    • 著者名/発表者名
      陳 両綿、小谷 明、袴田秀樹、楠 文代
    • 学会等名
      電気化学会第81回大会
    • 発表場所
      関西大学
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] HPLC with electrochemical detection for determining various redox compounds in Shuang-Huang-Lian preparations2013

    • 著者名/発表者名
      L. Chen, A. Kotani, H. Hakamata, F. Kusu
    • 学会等名
      第26回バイオメディカル分析科学シンポジウム(BMAS 2013)
    • 発表場所
      昭和大学薬学部
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 血中ノビレチン定量のためのダイヤモンド電極を用いた電気化学検出キャピラリーLC2013

    • 著者名/発表者名
      永見昂太、菅原康仁、高橋浩司、小谷 明、楠 文代
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム(PPF2013)
    • 発表場所
      清水テルサ
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] キノンの還元前置波を利用した電気化学検出HPLCによる多価不飽和脂肪酸の定量2013

    • 著者名/発表者名
      小谷 明、渡邉瑞貴、楠 文代
    • 学会等名
      第59回ポーラログフィーおよび電気分析化学討論会
    • 発表場所
      石垣市民会館
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] High-sensitive Determination of Redox Components in a Chinese Medicine by Liquid Chromatography with Electrochemical Detection2012

    • 著者名/発表者名
      A. Kotani, X. Chen, H. Hakamata, J. Wang, S. Du, F. Kusu
    • 学会等名
      The 63th Annual Meeting of the International Society of Electrochemistry (ISE 2012)
    • 発表場所
      Clarion Congress Hotel Prague, Prague, Czech Republic
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 3チャンネル電気化学検出HPLCシステムによる丹参由来酸化還元物質の一斉分析2012

    • 著者名/発表者名
      楠 文代、Chen Xianchun、袴田秀樹、Wang Jie、小谷 明
    • 学会等名
      日本分析化学会第61回年会
    • 発表場所
      金沢大学(石川県)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ダイヤモンド電極電気化学検出キャピラリーLC によるアミノ酸の検出

    • 著者名/発表者名
      宇敷香里、高橋浩司、楠 文代
    • 学会等名
      第57回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      帝京大学薬学部
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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