ヒトｉＰＳ細胞に対する新規単クローン抗体の作成とその機能解析

• 研究課題/領域番号: 24570171
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 立命館大学
• 研究代表者: 川嵜 敏祐 立命館大学, 薬学部, 非常勤講師 (50025706)
• 研究分担者: 川嵜 伸子 立命館大学, 総合科学技術研究機構, 教授 (70077676)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,590千円 (直接経費: 4,300千円、間接経費: 1,290千円); 2014年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2012年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: 多能性幹細胞 / 糖鎖認識抗体 / ケラタン硫酸 / 糖脂質 / ES細胞 / iPS細胞 / ヒトiPS 細胞 / ヒトES 細胞 / 細胞傷害性抗体 / フローサイトメトリー / 共焦点レーザー顕微鏡 / 単クローン抗体 / ポドカリキシン / R-!0G / R-17F / ヒトES細胞 / R－10G / R－17F / 低硫酸化ケラタン硫酸

研究成果の概要

多能性幹細胞研究において汎用されている抗体はヒトiPS/ES細胞ばかりでなく、EC細胞（胎児性がん細胞）をも認識する欠点を持つ。私たちは、本研究によりヒトEC細胞を認識しないヒトiPS/ES細胞マーカー抗体2種の作成に成功した。R－10Gは抗TRA-1-60抗体と同様にケラタン硫酸を認識する抗体であり、これらの糖鎖はムチン様膜糖タンパク質であるポドカリキシン分子上に発現することを明らかにした。R－17Fは、抗SSEA-3抗体と同様に膜脂質を認識する抗体であるが、ヒトiPS/ES細胞特異的な細胞障害活性をもつことを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of Rat Induced Pluripotent Stem Cells Using a Plasmid Vector and Possible Application of a Keratan Sulfate Glycan Recognizing Antibody in Discriminating Teratoma Formation Phenotypes (2015)
  • 著者名/発表者名: J. O. Makanga, M. Kobayashi, H. Ikeda, A. Christianto, H. Toyoda, M. Yamada, T. Kawasaki, and T. Inazu
  • 雑誌名: Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ＆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ 巻: 38 号: 1 ページ: 127-133
  • DOI: 10.1248/bpb.b14-00697
  • NAID: 130004872226
  • ISSN: 0918-6158, 1347-5215
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional assay using lectin gene targeting technologies (over-expression) (2014)
  • 著者名/発表者名: M. Nonaka, and T. Kawasaki
  • 雑誌名: Methods Mol Biol 巻: 1200 ページ: 389-399
  • DOI: 10.1007/978-1-4939-1292-6_34
  • ISBN: 9781493912919, 9781493912926
• [雑誌論文] Mannan-binding protein, a C-type serum lectin, recognizes primary colorectal carcinomas through tumor-associated Lewis glycans. (2014)
  • 著者名/発表者名: M. Nonaka, H. Imaeda, S. Matsumoto, BY Ma, N. Kawasaki, E. Mekata, A. Andoh, Y. Saito, T. Tani, Y. Fujiyama, T. Kawasaki.
  • 雑誌名: J Immunol 巻: 192 号: 3 ページ: 1294-1301
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1203023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Obituary: An appreciation of Gilbert G. Ashwell - A pioneer of glycobiology (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki
  • 雑誌名: Glycoconj J 巻: 31 ページ: 545-546
• [雑誌論文] A Novel Antibody for Human Induced Pluripotent Stem (hiPS) Cells and Embryonic Stem (ES) Cells Recognizes a Type of Keratan Sulfate Lacking Oversulfated Structures. (2013)
  • 著者名/発表者名: K Kawabe, D Tateyama, H Toyoda, N Kawasaki, N Hashii, H Nakao, S Matsumoto, M Nonaka, H Matsumura, Y Hirose, A Morita, M Katayama, M Sakuma, N Kawasaki, M Kusuda Furue, T Kawasaki.
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: 23巻 号: 3 ページ: 322-336
  • DOI: 10.1093/glycob/cws159
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of interaction of mannan-binding protein with meprins at the initial step of complement activation in ischemia/reperfusion injury to mouse kidney (2012)
  • 著者名/発表者名: M. Hirano, B. Y. Ma, N. Kawasaki, S. Oka, and T. Kawasaki
  • 雑誌名: Glycobiology 巻: 22(1) 号: 1 ページ: 84-95
  • DOI: 10.1093/glycob/cwr107
  • 査読あり
• [学会発表] 新規ヒトiPS/ES細胞マーカー抗体のエピトープの同定と結合特異性の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 中尾広美、松本尚悟、豊田英尚、川端健二、瀧 孝雄、川嵜伸子、川嵜敏祐
  • 学会等名: 第62回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 立命館大学（滋賀県）
  • 年月日: 2015-05-16
• [学会発表] Novel Carbohydrate-Recognizing Antibodies for Human iPS/ES Cells (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki, H.Nakao, S.Matsumoto, H. Toyoda, K. Kawabata, T. Taki, and N. Kawasaki
  • 学会等名: Joint meeting of the Society for Glycobiology and the Japanese Society of Carbohydrate Research
  • 発表場所: Hawaii, USA
  • 年月日: 2014-11-18
• [学会発表] 国際糖鎖構造リポジトリーの開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 木下聖子、山田一作、藤田晶大、土屋伸一郎、新町大輔、青木ポール信行、松原正陽、藤田典昭、鈴木芳典、イェレナ ソロビヨワ、鹿内俊秀、奥田修二郎、川嵜敏祐、成松 久、
  • 学会等名: 第33回日本糖質学会年会
  • 発表場所: 名古屋大学 (愛知県）
  • 年月日: 2014-08-12
• [学会発表] ヒトiPS細胞を特異的に検出する抗糖鎖抗体の開発と性状 (2014)
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐、中尾広美、川端健二、川嵜伸子、豊田英尚
  • 学会等名: 第33回日本糖質学会年会
  • 発表場所: 名古屋大学 (愛知県）
  • 年月日: 2014-08-10
  • 招待講演
• [学会発表] -糖質化学から糖鎖生物学へ- 山科郁男先生のご業績を偲んで (2014)
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐
  • 学会等名: 第61回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 京都産業大学 (京都府）
  • 年月日: 2014-05-17
  • 招待講演
• [学会発表] 糖鎖特異的ヒトiPS/ESマーカー抗体とその応用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐
  • 学会等名: 日本糖質学会
  • 発表場所: 名古屋大学 (愛知県）
• [学会発表] Ｃ-型レクチンと免疫
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐
  • 学会等名: Glyco-Immunology 2014
  • 発表場所: 東京医科歯科大学 (東京都）
  • 招待講演
• [学会発表] Novel Marker Antibodies for Human iPS/ES Cells and their Application
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki
  • 学会等名: XXII Inter. Symp. on Glycoconjugates
  • 発表場所: Dalian（China)
• [学会発表] 新規ヒトiPS/ESマーカーとしての糖認識抗体とその応用
  • 著者名/発表者名: 松本尚悟,中尾広美,野中元裕, 川端健二, 古江－楠田美保, 滝嶌佑人,豊田英尚,川嵜伸子,川嵜敏祐
  • 学会等名: 日本生化学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県）
• [学会発表] 単クローン抗体R-10Gを用いた脳ケラタン硫酸プロテオグリカンの研究
  • 著者名/発表者名: 中尾広美、山内拓也、滝嶌佑人、松本尚悟、川崎ナナ、川嵜伸子、豊田英尚、川嵜敏祐
  • 学会等名: 日本糖質学会
  • 発表場所: 大阪国際センター（大阪府）
• [学会発表] Novel Marker Antibodies for Human iPS/ES Cells and their Application
  • 著者名/発表者名: Kawasaki, T. Nakao, H.Matsumoto, S. Toyoda, H. Kusuda Furue, M. and Kawasaki, N.
  • 学会等名: 22nd International Symposiium on Glycoconjugates
  • 発表場所: Dalian, China
• [学会発表] A novel marker antibody of human induced Pluripotent Stems (iPS) cells, which recognizes a new type of keratan sulfate
  • 著者名/発表者名: Toshisuke Kawasaki, Keiko Kawabe, Miho Kusuda Furue, Hiromi Nakao, Shogo Matsumoto, Motohiro Nonaka, Hidenao Toyoda, Yoshinori Hirose, Nana Kawasaki, and Nobuko Kawasaki
  • 学会等名: International Carbohydrate Symposium 2012
  • 発表場所: Madrid, Spain
• [学会発表] 新規モノクローナル抗体R-10Gを用いた脳内ケラタン硫酸プロテオグリカンの解析
  • 著者名/発表者名: 滝嶌佑人、山内拓也、松本尚悟、中尾広美、川嵜伸子、川嵜敏祐、豊田亜希子、豊田英尚
  • 学会等名: 日本薬学会 近畿支部総会・大会
  • 発表場所: 武庫川女子大学, 兵庫県
• [学会発表] ヒトiPS細胞上のケラタン硫酸鎖を認識する新規単クローン抗体の性質
  • 著者名/発表者名: 松本尚悟,中尾広美, 河邊圭子, 館山大揮, 廣瀬佳則, 森田彩葉, 野中元裕, 川崎ナナ, 橋井則貴, 川嵜伸子, 古江－楠田美保, 豊田英尚, 川嵜敏祐
  • 学会等名: 第31回日本糖質学会年会
  • 発表場所: 鹿児島市民文化ホール, 鹿児島県
• [図書] Mannan-Binding Protein (MBP)-Ligand Glycans: A Novel Tissue Marker for Colorectal Carcinomas. in Glycoscience: Biology and Medicine, (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki, M. Nonaka, and N. Kawasaki
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: Springer Japan
• [図書] GlycoEpitope: A Database for Carbohydrate Antigen and Antibody in Glycoscience: Biology and Medicine (2014)
  • 著者名/発表者名: S. Okuda, H. Nakao, and T. Kawasaki
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: Springer Japan
• [図書] Novel Antibody for Keratan Sulfate Expressed on Human iPS/ES Cells in Glycoscience: Biology and Medicine (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki, N. Kawasaki, H. Nakao, and H.Toyoda
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: Springer Japan
• [図書] Glycoscience: Biology and Medicine, A novel antibody for keratan sulfate expressed on human iPS/ES cells, (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki, N. Kawasaki, H. Nakao, H.Toyoda.
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: Springer
• [図書] Glycoscience: Biology and Medicine, GlycoEpitope: a database for carbohydrate antigen and antibody, (2014)
  • 著者名/発表者名: S. Okuda, H. Nakao, T. Kawasaki.
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: Springer
• [図書] Glycoscience: Biology and Medicine, Mannan-binding protein (MBP)-ligand glycans: a novel tissue marker for colorectal carcinomas. (2014)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki, M. Nonaka, N. Kawasaki.
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: Springer
• [図書] 実験医学.31,No.10 (増刊), 新規iPS/ESマーカー抗体とその応用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐、川嵜伸子、中尾宏美、松本尚悟、古江-楠田美保、豊田英尚
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 羊土社
• [図書] THE LUNG perspectives, 21(4) ,iPS/ES細胞とEC細胞を識別する,iPS/ES細胞マーカー抗体 (2013)
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: メディカルレビュー社
• [図書] 実験医学増刊号「糖鎖の機能・作動原理と疾患」"新規iPS/ESマーカー抗体とその応用" (2013)
  • 著者名/発表者名: 川嵜敏祐，川嵜伸子，中尾広美，松本尚悟，古江ー楠由美保，豊田英尚
  • 出版者: 羊土社
• [備考] GlycoEpitope
  • URL: http://www.glycoepitope.jp
• [備考] 立命館大学糖鎖工学研究センター
  • URL: http://www.glyco.is.ritsumei.ac.jp/RCG/
• [備考] GlycoEpitope
  • URL: http://www.glyco.is.ritsumei.ac.jp/epitope/
• [備考] 立命館大学糖鎖工学研究センター
  • URL: http://www.glyco.is.ritsumei.ac.jp/RCG/
• [産業財産権] 標的細胞障害活性を有するiPS/ES細胞特異的抗体及びその用途 (2013)
  • 発明者名: 川嵜敏祐、川嵜伸子、 古江美保、川端健二
  • 権利者名: 学校法人立命館、独立行政法人医薬基盤研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2013-12-20
• [産業財産権] 標的細胞障害活性を有するiPS/ES細胞特異的抗体及びその用途 (2012)
  • 発明者名: 川嵜敏祐 他
  • 権利者名: 学校法人 立命館 他
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2012-280259
  • 出願年月日: 2012-12-21