ヒトＯＲＣ結合性ＲＮＡの構造と作用機作

• 研究課題/領域番号: 24570200
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 分子生物学
• 研究機関: 日本女子大学
• 研究代表者: 和賀 祥 日本女子大学, 理学部, 教授 (60222402)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,590千円 (直接経費: 4,300千円、間接経費: 1,290千円); 2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2013年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: DNA複製 / グアニン四重鎖 / 複製開始点 / ORC / 分子生物学 / RNA結合

研究成果の概要

ヒト複製開始因子であるORCに関する生化学的な解析を行った。その結果、ヒトORCがグアニン四重鎖を形成する配列（G4モチーフ）をもつRNAあるいはssDNAに優先的に結合する活性を見出した。さらに、その活性をもつORC1にG4モチーフ結合ドメインがあることを見出し、ドメイン中の結合に重要なアミノ酸の同定を行った。また、ORCのG4モチーフ結合には特異性があることを明らかにした。G4モチーフは複製開始点の多くの近傍にあることから、ORCのG4モチーフ結合活性は、複製開始点の確立に関与している可能性が考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Human origin recognition complex binds preferentially to G-quadruplex-preferable RNA and single-stranded DNA. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hoshina S
  • 雑誌名: The Journal of Biologocal Chemistry 巻: 288 号: 42 ページ: 30161-30171
  • DOI: 10.1074/jbc.m113.492504
  • 査読あり
• [学会発表] ヒトORCが認識するグアニン四重鎖モチーフの特異性に関する検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 保科祥子、和賀 祥
  • 学会等名: 第３７回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ヒトORC1のG-rich RNA/一本鎖DNA結合に関わる新規結合ドメインの解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 寺西帆奈美、太田黒恵美、由良 敬、和賀 祥
  • 学会等名: 第３７回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Further characterization of the binding of human ORC to G-quadruplex-formable RNA and singe-stranded DNA (2014)
  • 著者名/発表者名: Shou Waga
  • 学会等名: The 9th 3R Symposium
  • 発表場所: 静岡県御殿場市・御殿場高原ホテル
  • 年月日: 2014-11-17 – 2014-11-21
• [学会発表] Preferential binding of human origin recognition complex to G-quadruplex-formable RNA and single-stranded DNA (2013)
  • 著者名/発表者名: Shoko Hoshina, Honami Teranishi, Noriko Kiyasu, Ayumi Tominaga, Haruka Kadoma, Ayaka Nakatsuka, Kei Yura, Shou Waga
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting on Eukaryotic DNA Replication and Genome Maintenance
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY, USA
• [学会発表] ヒトORCのグアニン四重鎖形成可能なRNAおよび一本鎖DNAへの特異的な結合とその複製開始点形成への関与の可能性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 保科祥子、寺西帆奈美、中塚彩花、由良敬、和賀祥
  • 学会等名: 第２２回DNA複製・組換え・修復ワークショップ
  • 発表場所: 仙台（秋保）
• [学会発表] ヒトORC1の新規RNA結合ドメインの同定とその性状解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 寺西帆奈美、保科祥子、由良敬、和賀祥
  • 学会等名: 第２２回DNA複製・組換え・修復ワークショップ
  • 発表場所: 仙台（秋保）
• [学会発表] ヒトORCのG-rich一本鎖DNAへの結合における塩基配列要求性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 保科祥子、和賀祥
  • 学会等名: 第２２回DNA複製・組換え・修復ワークショップ
  • 発表場所: 仙台（秋保）
• [学会発表] ヒトORCのグアニン四重鎖形成可能なRNAおよび一本鎖DNAへの特異的な結合とその複製開始点形成への関与の可能性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 保科祥子、寺西帆奈美、中塚彩花、由良敬、和賀祥
  • 学会等名: 第３６回分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸（神戸ポートアイランド）
• [学会発表] ヒトORC1の新規RNA結合ドメインの同定とその性状解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 寺西帆奈美、保科祥子、由良敬、和賀祥
  • 学会等名: 第３６回分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸（神戸ポートアイランド）
• [学会発表] ヒトORCのG-rich一本鎖DNAへの結合における塩基配列要求性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 保科祥子、和賀祥
  • 学会等名: 第３６回分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸（神戸ポートアイランド）
• [学会発表] G-rich RNA binding activity of human ORC possibly implicated in replication origin establishment
  • 著者名/発表者名: Shou Waga
  • 学会等名: The 8th 3R Symposium
  • 発表場所: 兵庫県淡路夢舞台
• [学会発表] ヒトORCのG-rich RNA結合活性とその複製開始点形成への関与の可能性
  • 著者名/発表者名: 保科祥子
  • 学会等名: 第３５回日本分子生物学会年会ワークショップ
  • 発表場所: 福岡市福岡国際会議場
  • 招待講演