イネのエネルギー代謝物の流量制御を司るオルガネラ輸送体の機能解析

• 研究課題/領域番号: 24580094
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 植物栄養学・土壌学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 野澤 彰 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 講師 (30432800)
• 連携研究者: 戸澤 譲 埼玉大学, 大学院・理工学研究科, 教授 (90363267)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 糖リン酸輸送体 / ミトコンドリアキャリア / コムギ無細胞系 / リポソーム / トランスポーター / 無細胞タンパク質合成系 / オルガネラ

研究成果の概要

リポソーム添加型無細胞合成法を利用したプロテオリポソーム再構成系によるトランスポーターの機能解析系の改良を行った。主に合成方法に焦点を絞りタンパク質の合成効率を上昇させることに成功した。その結果、コムギ胚芽由来のタンパク質に対する合成タンパク質の割合が高まり、簡易精製後のトランスポータータンパク質の輸送活性測定においてS/N比の高い解析系を構築することに成功した。この方法を用いて、植物のオルガネラに局在する様々なトランスポーターの解析を行なった。イネやアイスプラントの葉緑体に局在する糖リン酸輸送体やシロイヌナズナの葉緑体に局在する硫黄代謝物の輸送体などについて機能解析を行なった。

研究成果

• [雑誌論文] Modifications of wheat germ cell-free system for functional proteomics of plant membrane proteins. (2014)
  • 著者名/発表者名: Akira Nozawa and Yuzuru Tozawa
  • 雑誌名: Methods in Molecular Biology 巻: 1072 ページ: 259-272
  • DOI: 10.1007/978-1-62703-631-3_19
  • ISBN: 9781627036306, 9781627036313
• [雑誌論文] 膜輸送体タンパク質の完全インビトロ機能解析系 (2014)
  • 著者名/発表者名: 野澤彰、戸澤譲
  • 雑誌名: バイオサイエンスとインダストリー 巻: 72 ページ: 190-196
  • NAID: 40020102360
• [雑誌論文] Characterization of the Plastidic Phosphate Translocators in the Inducible Crassulacean Acid Metabolism Plant <i>Mesembryanthemum crystallinum</i> (2013)
  • 著者名/発表者名: Kore-eda, S., Nozawa, A., Okada, Y., Takashi, K., Azad, M.A.K., Ohnishi, J., Nishiyama, Y. and Tozawa, Y.
  • 雑誌名: Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 巻: 77 号: 7 ページ: 1511-1516
  • DOI: 10.1271/bbb.130174
  • NAID: 10031190461
  • ISSN: 0916-8451, 1347-6947
  • 査読あり
• [学会発表] プロテオリポソーム再構成系を利用したシロイヌナズナ PAPST１ホモログAt3g51870の輸送基質の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 名樂 仁、井上 寛之、戸澤 譲、野澤 彰
  • 学会等名: 第56回日本植物生理学会年会
  • 発表場所: 東京農業大学世田谷キャンパス１号館・東京都・世田谷区
  • 年月日: 2015-03-18
• [学会発表] Cell-free system for functional analysis of membrane transporters (2014)
  • 著者名/発表者名: Akira Nozawa and Yuzuru Tozawa
  • 学会等名: The 12th Matsuyama International Symposium on Proteo-Sciences
  • 発表場所: 愛媛大学南加祈念ホール・愛媛県・松山市
  • 年月日: 2014-09-17
  • 招待講演
• [学会発表] Functional analysis of membrane transporters by in vitro reconstitution system (2014)
  • 著者名/発表者名: Daichi Morita, Hiroyuki Inoue, Yuki Shimonosono, Hitoshi Myoraku, Taito Takabayashi, Ryoji Fujimoto, Nobuhiro Yamashita, Yusuke Okada, Shinichi Teramoto, Hironori Takeda, Akira Nozawa and Yuzuru Tozawa
  • 学会等名: The 12th Matsuyama International Symposium on Proteo-Sciences
  • 発表場所: 愛媛大学法文学部講義棟・愛媛県・松山市
  • 年月日: 2014-09-17
• [学会発表] 脂質組成と再構成ミトコンドリアキャリア蛋白質の膜輸送活性との関係
  • 著者名/発表者名: 野澤 彰、戸澤 譲
  • 学会等名: 日本農芸化学会中四国支部第３６回講演会
  • 発表場所: 松江
• [学会発表] コムギ無細胞系を基盤とした膜タンパク質解析系の構築
  • 著者名/発表者名: 野澤 彰
  • 学会等名: 岡山大学資源植物科学研究所 拠点共同研究主催 ワークショップ 「植物ホルモンとイオン輸送体の相互理解」
  • 発表場所: 岡山県倉敷市
  • 招待講演
• [学会発表] Cell-free synthesis and characterization of plastidic transporter proteins.
  • 著者名/発表者名: Akira Nozawa, Shin Kore-eda, and Yuzuru Tozawa.
  • 学会等名: The 10th Matsuyama International Symposium on Cell-Free Sciences.
  • 発表場所: 愛媛県松山市
• [学会発表] プラスチド型リン酸輸送体ファミリータンパク質の合成と機能解析
  • 著者名/発表者名: 野澤 彰、是枝 晋、戸澤 譲
  • 学会等名: 第7回無細胞生命科学研究会
  • 発表場所: 愛媛県松山市
• [学会発表] ミトコンドリアキャリアータンパク質の無細胞解析系の構築
  • 著者名/発表者名: 岡田 有右、藤本 竜治、野澤 彰、戸澤 譲
  • 学会等名: 第7回無細胞生命科学研究会
  • 発表場所: 愛媛県松山市
• [学会発表] コムギ無細胞系を利用した膜輸送体蛋白質の機能解析系の構築
  • 著者名/発表者名: 野澤 彰、戸澤 譲
  • 学会等名: 第54回日本植物生理学会年会
  • 発表場所: 岡山県岡山市
  • 招待講演