研究課題/領域番号 |
24580120
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
応用微生物学
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研究機関 | 石川県立大学 |
研究代表者 |
熊谷 英彦 石川県立大学, 生物資源環境学部, 教授 (70027192)
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研究分担者 |
山本 憲二 石川県立大学, 生物資源環境学部, 教授 (70109049)
片山 高嶺 石川県立大学, 寄附講座教授 (70346104)
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研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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研究課題ステータス |
完了 (2014年度)
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配分額 *注記 |
5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2012年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
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キーワード | バイオリファイナリー / リニューワブル資源 / セルラーゼ / β-グルコシダーゼ / 耐熱性セルラーゼ / 酵素耐熱性向上変異 / 耐熱性酵素発現耐熱性酵母 / β-グルコシダーゼX線構造解析 / β‐グルコシダーゼ / β‐グルコシダーゼX線構造解析 / 未利用資源 / セルロース / 耐熱性 / b-グルコシダーゼ / バイオエタノール / Kluyveromyces / 糖化同時発酵 |
研究成果の概要 |
組換え耐熱性酵母を使用し、同時糖化発酵回収システムを構築した。この酵母株に耐熱性カビのβ-グルコシダーゼ遺伝子を導入し、菌体外発現組換え株による同時糖化発酵を行い、高率で発酵エタノールを回収した。当該酵素にランダム変異を導入し、耐熱性の向上した変異酵素を取得、アミノ酸置換と耐熱性の関係を解明、その最適化、集積を行い、Tmが野生型より約10℃上昇した変異酵素を得た。本最適化酵素を耐熱性酵母において発現させ、添加セルラーゼ存在下、膨潤セルロースの糖化同時発酵を行い、野生型の場合の1.3倍のエタノール生産を得た。最適化変異酵素のX線結晶構造解析を行い、2.7Åの解像度で構造解析に成功した。
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