水素／重水素交換反応及び質量分析法による糖タンパク質の高次構造解析技術の開発

• 研究課題/領域番号: 24590069
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 橋井 則貴 国立医薬品食品衛生研究所, 生物薬品部, 室長 (20425672)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 水素重水素交換／質量分析 / 糖タンパク質 / 高次構造 / 抗TNF-α抗体 / 水素/重水素交換質量分析 / 相互作用 / エピトープ / 水素重水素交換質量分析 / 分子標的薬 / 抗TNFα抗体 / 水素／重水素交換質量分析

研究成果の概要

本研究では，糖タンパク質の高次構造解析技術を開発する一環として，糖タンパク質のモデルとして抗TNF-α抗体関連医薬品を用いて，ヒト可溶性TNF-αとの相互作用解析を水素重水素交換／質量分析 (HDX/MS) 行った．4種類の抗TNF-α抗体関連医薬品について解析した結果，いずれの抗体との相互作用においても，重水素交換率が減少する内部領域があることを明らかにし，抗TNF-α抗体関連医薬品は，共通のTNF-α高次構造変化を利用して薬理作用を発現している可能性を見出した．また，それぞれの抗TNF-α抗体関連医薬品のエピトープとなりうる領域を特定した．

研究成果

• [雑誌論文] Analysis of the local dynamics of human insulin and a rapid-acting insulin analog by hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa S, Ahn J, Hashii N, Hirose K, Kawasaki N
  • 雑誌名: Biochim. Biophys. Acta 巻: 1834 ページ: 1210-1214
  • 査読あり
• [学会発表] 水素/重水素交換質量分析を用いたバイオ医薬品の高次構造解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 橋井則貴
  • 学会等名: 第5回生体相互作用解析フォーラム
  • 発表場所: 大阪大学
  • 年月日: 2014-04-22
  • 招待講演
• [学会発表] 水素/重水素交換および質量分析法を利用したtumor necrosis factor alpha(TNFα)アンタゴニストとTNFαの相互作用解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中澤志織，橋井則貴，川崎ナナ
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] 抗体医薬品の分子変化体モニターリングシステム (2014)
  • 著者名/発表者名: 太田悠葵, 橋井則貴, 原園景, 鈴木琢雄, 川崎ナナ
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] Analysis of interaction between TNF-alpha and anti-TNF-alpha agents using hydrogen/deuterium exchange and mass spectrometry (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa S, Hashii N, Kawasaki N
  • 学会等名: 61st ASMS Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics
  • 発表場所: Minneapolis, USA
• [学会発表] Analysis of interaction between TNFα and anti-TNFα agents using hydrogen/deuterium exchange and mass spectrometry (2013)
  • 著者名/発表者名: 中澤志織，橋井則貴，川崎ナナ
  • 学会等名: 第86回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Analysis of interaction between TNF-α and anti-TNF-α agents by hydrogen deuterium exchange/mass spectrometry (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa S, Hashii N, Kawasaki N.
  • 学会等名: 19th International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 水素重水素交換／質量分析によるヒトインスリンアナログの多量体安定性に関与する部位の特定 (2012)
  • 著者名/発表者名: 橋井則貴，中澤志織， Joomi Ahn， 廣瀬賢治，川崎ナナ
  • 学会等名: 第85 回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 水素／重水素交換質量分析によるヒトインスリンアナログの多量体安定性解析
  • 著者名/発表者名: 橋井則貴，中澤志織，Joomi Ahn J，廣瀬賢治，川崎ナナ
  • 学会等名: Biological Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: 東京