ＧＰＩアンカー欠損スプライス変異型プリオン蛋白質の生理機能の解明に関する研究

• 研究課題/領域番号: 24590172
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 環境系薬学
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 菊池 裕 国立医薬品食品衛生研究所, 衛生微生物部第一室, 室長 (10234197)
• 研究協力者: 玉川 萌笑
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円); 2014年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2013年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2012年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: プリオン / 選択的スプライシング / GPIアンカー

研究成果の概要

ヒト、ウシ及びヒツジ細胞株のmRNAを解析し、プリオン蛋白質(PrP)のGPIアンカーシグナル配列が欠落したスプライス変異型プリオン蛋白質(PrPSV)を同定した。PrP遺伝子欠損マウス細胞株HpL3-4にレトロウイルスベクターを用いてPrP又はPrPSV遺伝子を導入し、安定産生株を得た。ヒツジスクレイピーを添加して培養したヒツジPrP又はPrPSV産生細胞株でProteinase K (PK)抵抗性PrPを確認したが、ベクターだけの導入では抵抗性を示さず、PK抵抗性PrPの増加が示唆された。樹立したPrP又はPrPSVの安定産生株は、感染やプリオン病発症機構の解明への寄与が期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Collaborative Study on the PCR Detection Method of Mycoplasma Testing for Cell Substrates; The Revision for General Information of JP (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchisa, E., Furuta, B., Kikuchi, Y., Kubosaki, A., Yusa, S., Miyahara, M., Sasaki, Y., Kohara, A., Ohtani, A., Matsuyama, A., Okura, H., Yamaguchi, T.
  • 雑誌名: Pharmaceutical and Medical Device Regulatory Science 巻: 45 ページ: 442-451
  • NAID: 40020101742
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cellular Prion Protein: From Physiology to Pathology (2012)
  • 著者名/発表者名: Sei-ichi Yusa, Jose B. Oliveira-Martins, Yoshiko Sugita-Konishi, Yutaka Kikuchi
  • 雑誌名: Viruses 巻: 4 号: 11 ページ: 3109-3131
  • DOI: 10.3390/v4113109
  • 査読あり
• [学会発表] 低酸素条件下で発現するGPIアンカー欠損型プリオン蛋白質に関与する転写因子BHLHE40の研究 (2014)
  • 著者名/発表者名: 菊池裕、遊佐精一、窪崎敦隆、寺嶋淳、豊田淑江、山口照英
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] リン酸化セリンを含むプリオン蛋白質を認識する抗体に関する研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 菊池裕、遊佐精一、中島治、手島玲子、小西良子、山口照英
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡市
• [学会発表] PrP遺伝子欠損細胞株HpL3-4に導入したヒツジプリオン蛋白質の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 玉川萌笑、遊佐精一、中島治、手島玲子、辻勉、小西良子、菊池裕
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡市
• [学会発表] 低酸素条件下で誘導されるスプライス変異GPIアンカー欠損型プリオン蛋白質の発現
  • 著者名/発表者名: 菊池裕、豊田淑江、遊佐精一、窪崎敦隆、山口照英
  • 学会等名: 第1回低酸素研究会
  • 発表場所: 東京都新宿区 早稲田大学 先端生命医学センター