Ｉｎ ｖｉｖｏの膵星細胞を標的とした慢性膵炎の治療戦略の開発

• 研究課題/領域番号: 24591016
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 大村谷 昌樹 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (60398229)
• 連携研究者: 荒木 喜美 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 教授 (90211705)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 慢性膵炎 / 膵星細胞 / SPINK1/Spink3 / オートファジー / ネクロプトーシス / リポソーム / クロドロネート / Pancreatic stellate cell / Liposome / Chronic pancreatitis

研究成果の概要

慢性膵炎は膵内の持続性炎症により、膵外・内分泌機能が低下していく原因不明の疾患である。我々は遺伝性膵炎の原因遺伝子としてSPINK1を特定し、そのマウスホモログSpink3遺伝子のノックアウトマウスを樹立した。今回、2系統のSPINK1ノックインマウスを樹立し、慢性膵炎モデルマウスを樹立した。膵腺房細胞の脱落、広範な線維化、炎症細胞の浸潤を認め、ヒト慢性膵炎と一致していた。膵臓では、オートファジーに由来する巨大な異常空胞とLC3-IIの亢進を確認し、残存した腺房細胞にp62蛋白の異常蓄積が確認された。また、このマウスにビタミンAを表出したリポソームを投与し、活性型膵星細胞への効果も検討した。

研究成果

• [雑誌論文] Production of knockout mice by DNA microinjection of various CRISPR/Cas9 vectors into freeze-thawed fertilized oocytes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, Y., Sakuma, T., Sakamoto, T., Ohmuraya, M., Nakagata, N. and Yamamoto, T.
  • 雑誌名: BMC Biotechnol. 巻: -
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] SPINK1 Status in Colorectal Cancer, Impact on Proliferation, and Role in Colitis-associated Cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ida, S., Ozaki, N., Hirashima, K., Zaitsu, Y., Taki, K., Sakamoto, Y., Miyamoto, Y., Oki, E., Morita, M., Watanabe, M., Maehara, Y., Yamamura, K., Baba, H. and Ohmuraya, M.
  • 雑誌名: Mol Cancer Res. 巻: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Staging laparoscopy leads to rapid induction of chemotherapy for unresectable pancreatobiliary cancers. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, D., Chikamoto, A., Sakata, K., Nakagawa, S., Hayashi, H., Ohmuraya, M., Hirota, M., Yoshida, N., Beppu, T. and Baba, H.
  • 雑誌名: Asian journal of endoscopic surgery. 巻: 8 号: 1 ページ: 59-62
  • DOI: 10.1111/ases.12138
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical features and management of pancreatic solid pseudopapillary tumor. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto, M., Hashimoto, D., Chikamoto, A., Abe, S., Ohmuraya, M. and Baba, H.
  • 雑誌名: Am Surg. 巻: 80 ページ: 1212-1215
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation and analysis of serine protease inhibitor Kazal type 3-Cre driver mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakata, K., Ohmuraya, M., Araki, K., Suzuki, C., Ida, S., Hashimoto, D., Wang, J., Uchiyama, Y., Baba, H. and Yamamura, K.
  • 雑誌名: Exp Anim. 巻: 63 ページ: 45-53
  • NAID: 130003391605
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autophagy regulation in the pancreatic acinar cells is independent of epidermal growth factor receptor signaling. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ozaki, N., Fukuchi, Y., Tomiyoshi, S., Uehara1, H., Ida, S., Wang, J., Kimi Araki, K., Sibilia, M., Baba, H., and Yamamura, K. and Ohmuraya, M.
  • 雑誌名: Biochem. Biophysic. Res. Comm. 巻: 446 号: 1 ページ: 224-230
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.02.111
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Application of Oocyte Cryopreservation Technology in TALEN-Mediated Mouse Genome Editing. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, Y., Sakuma, T., Nakagata, N., Yamasaki, S., Takeda, N., Ohmuraya, M. and Yamamoto, T.
  • 雑誌名: Exp Anim. 巻: 63 ページ: 349-355
  • NAID: 130004677827
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of Postoperative Weight Loss on Survival After Resection for Pancreatic Cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Abe, S., Nakagawa, S., Beppu, T., Takamori, H., Hirota, M. and Baba, H.
  • 雑誌名: JPEN J Parenter Enteral Nutr. 巻: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of Postoperative Weight Loss on Survival After Resection for Pancreatic Cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto D, Chikamoto A, Ohmuraya M, Abe S, Nakagawa S, Beppu T, Takamori H, Hirota M, Baba H
  • 雑誌名: JPEN J Parenter Enteral Nutr. 巻: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation and analysis of serine protease inhibitor kazal type 3-cre driver mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakata K, Ohmuraya M, Araki K, Suzuki C, Ida S, Hashimoto D, Wang J, Uchiyama Y, Baba H, Yamamura K
  • 雑誌名: Exp Anim. 巻: 63 ページ: 45-53
  • NAID: 130003391605
  • 査読あり
• [雑誌論文] Screening methods to identify TALEN-mediated knockout mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa Y, Yamamoto T, Suzuki K, Araki K, Takeda N, Ohmuraya M, Sakuma T
  • 雑誌名: Exp Anim. 巻: 63 ページ: 79-84
  • NAID: 130003391606
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pancreatic cancer in the remnant pancreas following primary pancreatic resection. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto D, Chikamoto A, Ohmuraya M, Sakata K, Miyake K, Kuroki H, Watanabe M, Beppu T, Hirota M, Baba H.
  • 雑誌名: Surg Today 巻: - 号: 7 ページ: 1313-1320
  • DOI: 10.1007/s00595-013-0708-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pancreaticodigestive anastomosis and the postoperative management strategies to prevent postoperative pancreatic fistula formation after pancreaticoduodenectomy. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto D, Chikamoto A, Ohmuraya M, Hirota M, Baba H
  • 雑誌名: Surg Today 巻: - 号: 7 ページ: 1207-1213
  • DOI: 10.1007/s00595-013-0662-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serine protease inhibitor Kazal type 1 and epidermal growth factor receptor are expressed in pancreatic tubular adenocarcinoma, intraductal papillary mucinous neoplasm, and pancreatic intraepithelial neoplasia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ozaki N, Ohmuraya M, Ida S, Hashimoto D, Ikuta Y, Chikamoto A, Hirota M, Baba H.
  • 雑誌名: J Hepatobiliary Pancreat Sci.
  • NAID: 10031194618
  • 査読あり
• [雑誌論文] c-FLIP maintains tissue homeostasis by preventing apoptosis and programmed necrosis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Piao X
  • 雑誌名: Sci Signal 巻: ra93 号: 255
  • DOI: 10.1126/scisignal.2003558
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of intrapancreatic SPINK1/Spink3 expression in the development of pancreatitis (2012)
  • 著者名/発表者名: Ohmuraya, M., Sugano, A., Hirota, M., Takaoka, Y. and Yamamura, K
  • 雑誌名: Frontiers in Physiol 巻: 3
  • DOI: 10.3389/fphys.2012.00126
  • 査読あり
• [学会発表] オートファジー不全と慢性膵炎発症メカニズムの解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹,坂田和也,高城克暢,松元美由紀,荒木喜美,山村研一
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、横浜市、神奈川県
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] SPINK insufficiency causes impaired autophagy resulting in chronic pancreatitis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ohmuraya, M., Sakata, K., Mareninova, O., Notohara, K., Gukovsky, I., Gukovskaya, A.
  • 学会等名: 2014 APA/JPS 45th Anniversary Meeting
  • 発表場所: Hapuna Beach Prince Hotel、ハワイ島、ハワイ、米国
  • 年月日: 2014-11-05 – 2014-11-08
• [学会発表] SPINK不全に伴うオートファジーの異常と慢性膵炎の発症 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹
  • 学会等名: 第22回若手膵臓研究会
  • 発表場所: 生田神社会館、神戸市、兵庫県
  • 年月日: 2014-10-22
• [学会発表] オートファジー不全と慢性膵炎発症メカニズムの解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹
  • 学会等名: 第23回日本Cell Death学会学術集会
  • 発表場所: 東京医科歯科大学、東京都
  • 年月日: 2014-07-18 – 2014-07-19
• [学会発表] 急性膵炎におけるオートファジー選択的基質p62の役割 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹,能登原憲司,廣田昌彦
  • 学会等名: 第45回日本膵臓学会
  • 発表場所: 北九州国際会議場、北九州市、福岡
  • 年月日: 2014-07-11 – 2014-07-12
• [学会発表] Autophagic cell death by SPINK insufficiency induces chronic inflammation in the pancreas (2013)
  • 著者名/発表者名: Masaki Ohmuraya, Zhenghua Li, Ken-ichi Yamamura
  • 学会等名: 45th Annual Meeting of the European Pancreatic Club
  • 発表場所: Kongresshaus, Zurich, Switzerland
• [学会発表] p62/SQSTM1 Is Involved in the Mechanism of Acute Pancreatitis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Masaki Ohmuraya, Kenji Notohara, Ken-ichi Yamamura
  • 学会等名: 44th Annual Meeting of the American Pancreatic Association
  • 発表場所: Eden Roc Hotel, Miami, FL, USA
• [学会発表] カテプシンDによる腺房細胞内トリプシン活性化機構の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹、橋本大輔、坂田和也、能登原憲司、馬場秀夫
  • 学会等名: 第44回 日本膵臓学会大会
  • 発表場所: 仙台国際センター、仙台、宮城
• [学会発表] Chronic inflammation in the pancreas induces pre-cancerous development in mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Masaki Ohmuraya, Kazuya Sakata, Kenji Notohara, Kimi Araki, Hideo Baba, Ken-ichi Yamamura.
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、横浜、神奈川
• [学会発表] オートファジー不全がもたらす慢性膵炎発症メカニズムの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: Masaki Ohmuraya, Kazuya Sakata, Kenji Notohara, Kimi Araki, Hideo Baba, Ken-ichi Yamamura.
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド、神戸、兵庫
• [学会発表] Insufficient levels of serine protease inhibitor Kazal (SPINK) produced by partial expression of SPINK1 in Spink3 deficient pancreas result in chronic pancreatitis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaki Ohmuraya, Kenji Notohara, Kimi Araki, Masahiko Hirota, Ken-ichi Yamamura
  • 学会等名: アメリカ消化器病週間2013
  • 発表場所: San Diego Convention Center、米国
• [学会発表] Chronic pancreatitis triggers factors promoting pancreatic cancer development (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaki Ohmuraya, Kenji Notohara, Kimi Araki, Hideo Baba, Ken-ichi Yamamura
  • 学会等名: 第71回日本癌学会
  • 発表場所: ロイトン札幌、札幌市
• [学会発表] ヒトSPINK1遺伝子ノックインマウスの樹立と解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹、能登原憲司、廣田昌彦
  • 学会等名: 第43回日本膵臓学会大会
  • 発表場所: ホテルメトロポリタン山形、山形市