腫瘍細胞内ｔＲＮＡ前駆体切断酵素を効果的に利用した全く新しい白血病治療法の開発

• 研究課題/領域番号: 24591385
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 高橋 益廣 新潟大学, 医歯学系, 教授 (90179531)
• 研究分担者: 鳥羽 健 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (60313540)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2015年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2013年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: TRUE gene silencing / tRNase ZL / Bcl-2 / small guide RNA / 白血病 / アポトーシス誘導 / 細胞増殖抑制 / マウス移植実験 / sgRNA / 腫瘍抗原タンパク / アポソーシス誘導 / 核酸医薬 / tRNaseZL / 腫瘍抗原タンパ / がん抗原蛋白 / アポトーシス

研究成果の概要

血液腫瘍性疾患の治療にsgRNAを用いたTRUE gene silence法を用いることを目的とし、sgRNAをマウスゼノグラフトモデルに投与したin vivoの実験を行い、sgRNAの臨床的有用性についての検討を行った。Bcl-2 mRNAをtargetとしてsgRNAを作成し、Bcl-2を高発現している白血病細胞株をマウスに移植し、移植と同時にsgRNAも投与した。sgRNAを投与したモデルにおいて腫瘍生着率の低下と生存期間の延長が認められた。本研究でデザインしたヘプタマーsgRNAを用いた腫瘍抗原のmRNAを阻害する方法が白血病等の腫瘍に対する治療法として応用可能であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Five years molecular remission with an increase of WT1-specific CTLs after cessation of WT1 peptide vaccination in a patient with CML. (2016)
  • 著者名/発表者名: Narita M, Masuko M, Takahashi M
  • 雑誌名: Int J Med Sci 巻: 13 号: 4 ページ: 0-0
  • DOI: 10.7150/ijms.13601
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Immune responses in patients with esophageal cancer treated with SART1 peptide-pulsed dendritic cell vaccine. (2015)
  • 著者名/発表者名: Narita M, Kanda T, Abe T, Uchiyama T, Iwafuchi M, Zheng Z, Liu A, Kaifu T, Kosugi S, Minagawa M, Itoh K, Takahashi M.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 46 号: 4 ページ: 1699-1709
  • DOI: 10.3892/ijo.2015.2846
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Screening of a heptamer-type sgRNA library for potential therapeutic agents against hematological malignancies. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Elbarbary RA, Watanabe N, Goto A, Kamiya D, Watabe Y, Uchiyama T, Narita M, Takahashi M, Takahashi Y, Ishihara N, Miyazawa T, Yoshida T, Kawano M, Tamura M, Nashimoto M.
  • 雑誌名: Leuk Res 巻: 38 号: 2 ページ: 808-815
  • DOI: 10.3892/mmr.2015.3685
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Ustekinumab improves psoriasis without suppressing tumor antigen-specific cytotoxic T lymphocytes. (2014)
  • 著者名/発表者名: Narita M, Nishizawa Y, Iwaya S, Oiwa E, Iwabuchi M, Uchiyama T, Matsuyama A, Masuko M, Takahashi M
  • 雑誌名: Int Arch Allergy Immunol. 巻: 165 号: 1 ページ: 52-60
  • DOI: 10.1159/000366503
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Activation of the leukemia plasmacytoid dendritic cell line PMDC05 by Toho-1, a novel IDO inhibitor. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamahira A, Narita M, Iwabuchi M, Uchiyama T, Iwaya S, Ohiwa R, Nishizawa Y, Suzuki T, Yokoyama Y, Hashimoto S, Takizawa J, Sone H, Takahashi M.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 34 ページ: 4021-4028
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Induction of apoptosis of leukemic cells by TRUE gene silencing using small guide RNAs targeting the WT1 mRNA. (2013)
  • 著者名/発表者名: Watanabe N, Narita M, Yamahira A, Taniguchi T, Furukawa T, Yoshida T, Miyazawa T, Nashimoto M, Takahashi M.
  • 雑誌名: Leuk Res 巻: 37 号: 5 ページ: 580-585
  • DOI: 10.1016/j.leukres.2013.01.015
  • 査読あり
• [雑誌論文] A naked RNA heptamer targeting the human Bc1-2 mRNA induces apoptosis of HL60 leukemia cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Masavuki Takahashi, Reyad A. Elbarbry, Aiko Nakashima, Mayumi Abe, Norihiro Watanabe, Miwako Narita, Masuhiro Takahashi, Masato Tamura, Tetsuo Yoshida, Masayuki Nashimoto.
  • 雑誌名: Cancer Letters 巻: 328 号: 2 ページ: 362-368
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2012.10.016
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct effect of dasatinib on proliferation and cytotoxicity of natural killer cells in in vitro study (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama T, Sato N, Narita M, Yamahira A, Iwabuchi M, Furukawa T, Sone H, Takahashi M
  • 雑誌名: Hematol Oncol 巻: 31 号: 3 ページ: 156-63
  • DOI: 10.1002/hon.2034
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantification of BCR-ABL mRNA in Plasma/Serum of Patients with Chronic Myelogenous Leukemia (2013)
  • 著者名/発表者名: Narita M, Saito A, Iwabuchi M, Satoh N, Uchiyama T, Yamahira A, Furukawa T, Sone H, Takahashi M
  • 雑誌名: Int J Med Sci 巻: 9 号: 10 ページ: 901-8
  • DOI: 10.7150/ijms.4655
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of antigen presenting ability in the leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC05) by lentiviral vector-mediated transduction of CD80 gene. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamahira A, Narita M, Ishii K, Jayathilake RM, Iwabuchi M, Satoh N, Uchiyama T, Taniguchi T, Hashimoto S, Kasahara N, Faure E, Bogan B, Takizawa J, Sone H, Takahashi M.
  • 雑誌名: Leuk Res 巻: 36 号: 12 ページ: 1541-1546
  • DOI: 10.1016/j.leukres.2012.09.002
  • 査読あり
• [学会発表] Antigen presenting exosomes secreted by leukemic plasmacytoid dendritic cell line. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Masuhiro, Uchiyama Takayoshi, Iwaya Shunpei, Nishizawa Yoshinori, Oiwa Eri, Narita Miwako
  • 学会等名: The 18th ECCO & 40th ESMO European Cancer Congress(ECC2015)
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2015-09-25
  • 国際学会
• [学会発表] 白血病性形質細胞様樹状細胞株PMDC11由来エクソゾームを用いた抗原特異的細胞傷害性T細胞の誘導 (2015)
  • 著者名/発表者名: 成田美和子、内山孝由、橋本誠雄、瀧澤 淳、高橋益廣
  • 学会等名: 第25回樹状細胞研究会
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター（岡山県、岡山市）
  • 年月日: 2015-07-10
• [学会発表] Leukemic plasmacytoid dendritic cell line transduced with caTLR4 gene as a potent antigen presenting cells for immunotherapy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Masuhiro, Uchiyama Takayoshi, Iwaya Shunpei, Oiwa Eri, Nishizawa Yoshinori, Hashimoto Shigeo, Bonehill Aude, Kasahara Noriyuki, Narita Miwako
  • 学会等名: International Sciety of Cellular Therapy 21th Annual Meeting
  • 発表場所: Las Vegas, USA
  • 年月日: 2015-05-27
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of exosomes secreted by plasmacytoid dendritic cell line (PMDC11) and generation of antigen specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) by the stimulation with the exosomes. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama T, Narita M, Iwaya S, Nishizawa Y, Oiwa E, Takahashi M
  • 学会等名: 日本免疫学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] caTLR4 gene-transduced leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC11) as a potent antigen presenting cells for immunotherapy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Iwabuchi M, Uchiyama T, Iwaya S, Oiwa E, Nishizawa Y, Hashimoto S, Aude B, Kasahara N, Narita M
  • 学会等名: 樹状細胞シンポジウム
  • 発表場所: ツール、フランス
  • 年月日: 2014-09-14 – 2014-09-18
• [学会発表] Potentiation of antigen-specific CTL generation by caTLR4 gene transduction into leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC11). (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Iwabuchi M, Satoh N, Uchiyama T, Iwaya S, Oiwa E, Nishizawa Y, Hashimoto S, Bogan B, Faure-Kumar E, Kasahara N, Narita M
  • 学会等名: アメリカ免疫学会
  • 発表場所: ピッツバーグ
  • 年月日: 2014-05-02 – 2014-05-06
• [学会発表] Analysis of the usage of human T cell receptor b chain variable regions of antigen specific cytotoxic T lymphocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama T, Narita M, Oiwa E, Iwabuchi M, Satoh N, Iwaya S, Nishizawa Y, Takahashi M
  • 学会等名: 第42回日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張
• [学会発表] Transduction of caTLR4 gene enhances antigen-specific CTL inducing ability of leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC11) (2013)
  • 著者名/発表者名: Iwabuchi M, Narita M, Oiwa E, Satoh N, Uchiyama T, Hashimoto S, Bonehill A, Faure-Kumar E, Kasahara N, Takahashi M
  • 学会等名: 第42回日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張
• [学会発表] Ustekinumab improves psoriasis without suppressing tumor antigen-specific cytotoxic T lymphocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa Y, Narita M, Iwaya S, Oiwa E, Iwabuchi M, Satoh N, Uchiyama T, Matsuyama A, Fujiwara H, Takahashi M
  • 学会等名: 第42回日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張
• [学会発表] Identification of IFN-γ production and cytotoxicity in WT1 tetramer+ T cells generated by mixed lymphocyte peptide culture in WT1 peptide immunized persons (2013)
  • 著者名/発表者名: Oiwa E, Narita M, Iwaya S, Nishizawa Y, Uchiyama T, Iwabuchi M, Satoh N, Takahashi M
  • 学会等名: 第42回日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張
• [学会発表] Successful treatment of molecularly exacerbated CML with WT1 peptides --- association with long-term generation of WT1 tetramer+ T cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Iwaya S, Narita M, Masuko M, Nishizawa Y, Ida T, Oiwa E, Shibazaki Y, Iwabuchi M, Satoh N, Uchiyama T, Sone H, Takahashi M
  • 学会等名: 第42回日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張
• [学会発表] Enhancement of antigen presenting ability in the leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC05) by lentiviral vector-mediated transduction of CD80 gene (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamahira A, Narita M, Ishii K, Iwabuchi M, Satoh N, Uchiyama T, Taniguchi T, Hashimoto S, Kasahara N, Faure-Kumar E, Takahashi M
  • 学会等名: オーストラリア・ニュージーランド血液学会
  • 発表場所: シドニー（オーストラリア）
• [学会発表] Effectiveness of WT1 peptide vaccination in combination with imatinib therapy for an imatinib-resistant CML patient. (2012)
  • 著者名/発表者名: Narita M, Masuko M, Yamahira A,Uchiyama T, Iwabuchi M, Satoh N, Ida T, Kitajima A, Kitajima T, Furukawa T, Takahashi M
  • 学会等名: 第74回日本血液学会総会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Establishment of potent antigen presenting cell line by lentiviral vector-mediated transduction of caTLR4 gene into leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC11) (2012)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Iwabuchi M, Yamahira A, Satoh N, Uchiyama T, Hashimoto S, Bonehill A, Faure-Kumar E, Bogan B, Kasahara N, Takizawa J, Sone H, Narita M
  • 学会等名: 第12回国際DCシンポジウム
  • 発表場所: 大邱（韓国）
• [学会発表] Long-lasting Suppression of bcr-abl with Amplification of CTLs in a WT1 Peptide-treated CML Patient (2012)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Narita M, Yamahira A, Masuko M, Furukawa T
  • 学会等名: 世界生物医学検査会議（WCBLS)
  • 発表場所: ベルリン（ドイツ）
• [学会発表] Effectiveness of WT1 peptide vaccination in combination with imatinib therapy for an imatinib-resistant CML patient. (2012)
  • 著者名/発表者名: Narita M, Masuko M, Yamahira A, Ida T, Kitajima A, Kitajima T, Takai K, Koike T, Takahashi M
  • 学会等名: 第17回欧州血液学会
  • 発表場所: アムステルダム（オランダ）
• [備考] 高橋益廣ホームページ
  • URL: http://www.clg.niigata-u.ac.jp/~matak/index.htm
• [産業財産権] 国際特許公開 (2012)
  • 発明者名: 梨本正之、高橋益廣、成田美和子
  • 権利者名: 梨本正之、高橋益廣、成田美和子
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2012-08-29
  • 外国