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高感度質量分析法による皮膚疾患バイオマーカーの網羅的探索

研究課題

研究課題/領域番号 24591628
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 皮膚科学
研究機関愛媛大学

研究代表者

橋本 公二  愛媛大学, 先端研究・学術推進機構学術企画室, 特命教授 (00110784)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2012年度)
配分額 *注記
5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2012年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
キーワードバイオマーカー / 尋常性乾癬 / アトピー性皮膚炎 / プロテオミクス解析
研究概要

本研究の目的は、尋常性乾癬の新たなバイオマーカーを、高感度質量分析法を用いて網羅的に検索し、乾癬の診断、重症度、薬剤の効果判定に用いることである。また同様のストラテジーで湿疹の代表的疾患であるアトピー性皮膚炎においてもバイオマーカー探索を行い、診断、重症度、薬剤の効果判定に有用であることを示す。 本年度は書面にて同意の得られた患者さんから血液を3ml採取し、血清分離後凍結保存を行った。同時に尿、汗も回収し(3ml)凍結保存した 。対照として健常人のサンプルの収集を開始した。目標症例各疾患50例、正常人50例のうちアトピー性皮膚炎5例、尋常性乾癬2例、正常人12例のサンプルを回収することができた。安定同位体で標識した各疾患特異的ヒトタンパク質ライフブラリーの構築 コムギ胚芽インビトロタンパク質合成技術を用いて、同位体標識タンパク質ライブラリーの作成を行った。膜貫通型タンパク質の合成 には、リポソームを利用する無細胞タンパク質合成技術を用い、同位体標識タンパク質の作成には、安定同位体で標識したL-アミノ酸 リジン(L-Lys-13C615N2)とアルギニン(L-Arg-13C615N4)を使用した。全ての合成タンパク質はTIPsタグにより濃度を500 fmol/μl に補正した後、低吸着マイクロチューブへ分注し、内部標準用試料として-80度で保存・管理を行った。SIRPL基本ライブラリー用合成候補としてインターロイキンおよびその受容体、インターフェロンおよびその受容体、ケモカインおよびその受容体、その他のサイトカインおよびその受容体、造血因子およびその受容体、細胞傷害因子およびその受容体、細胞増殖因子およびその受容体、ADAMメタロプロテアーゼ、MT-MMPおよびMPメタロプロテアーゼとその阻害因子TIMP、オーファン受容体も含む各種GPCR、細胞外マトリックス、がん遺伝子、がん抑制遺伝子など約800種類を目標とし合成を開始している。

報告書

(2件)
  • 2013 実績報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件)

  • [雑誌論文] Eccrine sweat contains IL-1α, IL-1β and IL-31 and activates epidermal keratinocytes as a danger signal.2013

    • 著者名/発表者名
      Dai X, Okazaki H, Hanakawa Y, Murakami M, Tohyama M, Shirakata Y, Sayama K.
    • 雑誌名

      PLoS One.

      巻: 8 号: 7 ページ: 1-8

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0067666

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] High Frequency of HLA B62 in Fulminant Type 1 Diabetes with the Drug-Induced Hypersensitivity Syndrome2012

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Onuma, et. al.,
    • 雑誌名

      J Clin Endocrinol Metab

      巻: 97 号: 12 ページ: E2277-E2281

    • DOI

      10.1210/jc.2012-2054

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Immunological mechanisms of epidermal damage in toxic epidermal necrolysis.2012

    • 著者名/発表者名
      Tohyama M, Hashimoto K
    • 雑誌名

      Curr Opin Allergy Clin Immunol.

      巻: 12 号: 4 ページ: 376-82

    • DOI

      10.1097/aci.0b013e328355b865

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cell surface-annexins regulate ADAM-mediated ectodomain shedding of pro-amphiregulin2012

    • 著者名/発表者名
      Hironao Nakayama
    • 雑誌名

      Molecular Biology of the Cell

      巻: (印刷中) 号: 10 ページ: 1964-1975

    • DOI

      10.1091/mbc.e11-08-0683

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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