肝発癌分子機構におけるがん幹細胞関連ｍｉＲＮＡ発現の関与

• 研究課題/領域番号: 24592003
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 宇都宮 徹 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 准教授 (30304801)
• 研究分担者: 島田 光生 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (10216070) ; 井本 逸勢 (橘 逸勢 / 井本 逸勢(橘逸勢)) 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (30258610) ; 森根 裕二 徳島大学, 大学病院, 助教 (60398021) ; 居村 暁 徳島大学, 大学病院, 助教 (90380021)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 中途終了 (2012年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: miRNA / 肝細胞癌 / がん幹細胞 / 幹細胞マーカー / 多中心性発癌 / miRNAマイクロアレイ / epigenetic修飾 / DNAメチル化

研究概要

〔研究の目的〕非癌部肝組織におけるがん幹細胞関連miRNA発現と肝発癌との関連を明らかにすることで新たな発癌分子機構解明に寄与すると共に、肝発癌や残肝再発の早期診断や肝移植適応決定などへの臨床応用を目指す。
〔研究実績の概要〕
1. 肝発癌とmiRNA発現：近年、増加傾向を示す非B非C(NBNC)肝癌の非癌部肝組織のmiRNA発現を正常肝組織と比較した。特に、HBcAb陰性例の非癌部で有意に発現が減弱するものには、がん幹細胞マーカー(ABCG2)の発現を抑制するmiR-328、CD44やCD133の発現を抑制するlet-7 familyが含まれていることを明らかにした。
2. 肝発癌とepigenetic修飾：上記1.にて同定されたがん幹細胞関連miRNAとターゲット遺伝子発現との関連をRT-PCR法にて検証したところ明らかな関連を認めなかったことより、肝発癌に関与する遺伝子発現変化にはmiRNA以外の制御機構が関与している可能性が考えられた。そこでDNAメチル化に着目した研究を開始した。NBNC肝癌例の非癌部肝組織を対象とし正常肝組織との違いをDNA Methylation Microarray (450K BeadChip)を用いて解析した。DNA メチル化異常はHBcAb陽性群 vs. 正常群およびHBcAb陰性群 vs. 正常群で比較検討した。平均β値の差0.2以上かつP<0.05を満たすCpGサイトを抽出したところ、HBcAb陰性群との比較では87サイト、HBcAb陽性群との比較では603 サイト、両比較で共通するCpGサイトは30サイトであった。NBNC肝癌例の非癌部で高メチル化を示す遺伝子の中に、がん抑制作用を示すLrig1が含まれていた。Lrig1は腸管上皮幹細胞に高発現しておりがん幹細胞および発癌機構への関与も報告されている。そこでLrig1遺伝子発現を解析したところDNAメチル化状態との有意な逆相関を認めた。すなわちNBNC肝癌例の非癌部肝組織に特異的なDNAメチル異常が、がん幹細胞関連遺伝子の発現を修飾することで肝発癌に関与する可能性が示された。

研究成果

• [雑誌論文] Specific miRNA expression profiles of non-tumor liver tissue predict a risk for recurrence of hepatocellular carcinoma (2014)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, Ishikawa D, Asanoma M, Yamada S, Iwahashi S, Kanamoto M, Arakawa Y, Ikemoto T, Morine Y, Imura S, Ishibashi H, Takasu C, Shimada M.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 印刷中
  • DOI: 10.1111/hepr.12164
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nationwide study of 4,741 patients with non-B non-C hepatocellular carcinoma with special reference to the therapeutic impact. (2014)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, Shimada M, Kudo M, Ichida T, Matsui O, Izumi N, Matsuyama Y, Sakamoto M, Nakashima O, Ku Y, Kokudo N, Makuuchi M; Liver Cancer Study Group of Japan.
  • 雑誌名: Ann Surg 巻: 259 ページ: 336-345
  • DOI: 10.1097/sla.0b013e31829291e9
  • 査読あり
• [雑誌論文] A comparison of the surgical outcomes among patients with HBV-positive, HCV-positive, and non-B non-C hepatocellular carcinoma: A nationwide study of 11, 950 patients (2014)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, Shimada M, Kudo M, IchidaT, Matsui O, Izumi N, Matsuyama Y, Sakamoto M, Nakashima O, Ku Y, Takayama T, Kokudo N.
  • 雑誌名: Ann Surg 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Specific molecular signatures of non-tumor liver tissue may predict a risk of hepatocarcinogenesis (2014)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, Shimada M, Morine Y, Tajima A, Imoto I.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expressions of Hypoxia-Inducible Factor-1 and Epithelial Cell Adhesion Molecule are Linked with Aggressive Local Recurrence of Hepatocellular Carcinoma After Radiofrequency Ablation Therapy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamada S, Utsunomiya T, Morine Y, Imura S, Ikemoto T, Arakawa Y, Kanamoto M, Iwahashi S, Saito Y, Takasu C, Ishikawa D, Shimada M.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of CD44 expression in non-tumor tissue on intrahepatic recurrence of hepatocellular carcinoma (2013)
  • 著者名/発表者名: Tovuu LO, Imura S, Utsunomiya T, Morine Y, Ikemoto T, Arakawa Y, Mori H, Hanaoka J, Kanamoto M, Sugimoto K, Iwahashi S, Saito Y, Yamada S, Asanoma M, Miyake H, Shimada M.
  • 雑誌名: Int J Clin Oncol. 巻: 18 ページ: 651-656
  • DOI: 10.1007/s10147-012-0432-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] FGF3/FGF4 amplification and multiple lung metastases in responders to sorafenib in hepatocellular carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Arao T, Ueshima K, Matsumoto K, Nagai T, Kimura H, Hagiwara S, Sakurai T, Haji S, Kanazawa A, Hidaka H, Iso Y, Kubota K, Shimada M, Utsunomiya T, Hirooka M, Hiasa Y, Toyoki Y, Hakamada K, Yasui K, Kumada T, Toyoda H, Sato S, Hisai H, Kuzuya T, Tsuchiya K, Izumi N, Arii S, Nishio K, Kudo M
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 57 ページ: 1407-1415
  • DOI: 10.1002/hep.25956
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nationwide study of 4,741 patients with non-B non-C hepatocellular carcinoma with special reference to the therapeutic impact. (2013)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, et al.
  • 雑誌名: Ann Surg 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] High expression of cancer stem cell markers in cholangiolocellular carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Iwahashi S, Utsunomiya T, et al.
  • 雑誌名: Surg Today 巻: in press
  • NAID: 10031176088
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of CD44 expression in non-tumor tissue on intrahepatic recurrence of hepatocellular carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tovuu LO, Utsunomiya T, et al.
  • 雑誌名: Int J Clin Oncol 巻: in press
  • 査読あり
• [学会発表] Identification of aberrant DNA methylation profiles in non-tumor liver tissues of patients with non-B non-C hepatocellular carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, Shimada M, Imura S, Morine Y, Ikemoto T, Arakawa Y, Kanamoto M, Iwahashi S, Saito Y, Ishikawa D, Mikami C, Chengzhan Z, Tajima A, Imoto I.
  • 学会等名: American Society of Clinical Oncology Gastrointestinal Cancers Symposium
  • 発表場所: Moscone West Building（USA)
• [学会発表] Genome-wide analysis of aberrant DNA methylation profiling in non-tumor liver tissues of patients with non-B non-C hepatocellular carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, Shimada M, Imura S, Morine Y, Ikemoto T, Arakawa Y, Kanamoto M, Iwahashi S, Saito Y, Ishikawa D,
  • 学会等名: 1st International Conference of Federation of Asian Clinical Oncology
  • 発表場所: Xiamen (China）
• [学会発表] ゲノムワイドなDNAメチル化解析に基づく非B非C肝癌例の非癌部肝組織におけるDNAメチル化異常の特徴 (2013)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹, 島田光生, 居村暁, 森根裕二, 池本哲也, 金本真美, 荒川悠佑, 岩橋衆一, 齋藤裕, 山田眞一郎, 石川大地, 田嶋敦,
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県）
• [学会発表] 肝細胞癌の癌部・非癌部におけるFbxw7発現の同時評価は再発リスク予測の新規バイオマーカーとなる (2013)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹, 島田光生, 髙須千絵, 山田眞一郎, 岩橋衆一, 金本真美, 荒川悠佑, 池本哲也, 森根裕二, 居村暁
  • 学会等名: 第68回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: サンホテルフェニックス（宮崎県）
• [学会発表] 肝細胞癌の癌部と非癌部の両方におけるFbxw7高発現は術後再発の独立危険因子である (2013)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹, 島田光生, 石川大地, 山田眞一郎, 齋藤裕, 岩橋衆一, 金本真美, 荒川悠佑, 池本哲也, 森根裕二, 居村暁
  • 学会等名: 第24回日本消化器癌発生学会
  • 発表場所: 石川県立音楽堂（石川県）
• [学会発表] 非B非C肝癌4741例における治療成績の比較検討：日本肝癌研究会全国原発性肝癌追跡調査報告の解析より (2013)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹, 島田光生, 工藤正俊, 市田隆文, 松井修, 泉並木, 松山裕, 坂本亨宇, 中島収, 具英成, 國土典宏, 幕内雅敏
  • 学会等名: 第49回日本肝癌研究会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京都）
• [学会発表] 肝切除術における肝門部処理の使い分け<一括処理 vs. 個別処理> (2013)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹, 島田光生
  • 学会等名: 第113回日本外科学会定期学術総会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県）
• [学会発表] Specific miRNA expression profiles of non-tumor liver tissues predict the risk for multicentric occurrence of hepatocellular carcinoma. (2012)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, et al.
  • 学会等名: American Association for Cancer Research
  • 発表場所: McCormick Place (アメリカ)
• [学会発表] Molecular characteristics of non-tumor liver tissues may help to determine therapeutic strategy in patients with hepatocellular carcinoma. (2012)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya T, et al.
  • 学会等名: American College Of Surgeons Annual Clinical Congress
  • 発表場所: McCormick Place (アメリカ)
• [学会発表] Treatment strategy based on the characteristics of non-tumor liver tissues in patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Arakawa Y, Utsunomiya T, et al.
  • 学会等名: 22nd World Congress of the International Association of Surgeons, Gastroenterologists and Oncologists
  • 発表場所: Shangri-La Hotel (タイ)
• [学会発表] 肝発癌分子機構におけるがん幹細胞関連DNA・miRNA発現の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹 他
  • 学会等名: 第48回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテル日航金沢（石川）
• [学会発表] 肝発癌母地に着目した肝細胞癌の治療戦略 -多中心性再発リスクに基づく治療法選択の可能性- (2012)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮徹 他
  • 学会等名: 第112回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 幕張メッセ・ホテルニューオータニ幕張（千葉）