ナノバブル超音波増強法を用いた肺静脈からの逆行性アプローチによる肺への遺伝子導入

• 研究課題/領域番号: 24592084
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 胸部外科学
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 土田 正則 新潟大学, 医歯学系, 教授 (60293221)
• 研究分担者: 小池 輝元 新潟大学, 医歯学系, 講師 (90635723)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円); 2014年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2012年度: 2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
• キーワード: 遺伝子導入 / プラスミドベクター / 肺静脈 / 逆行性投与 / ナノバブル / 逆行性 / 逆行性導入 / 肺

研究成果の概要

肺局所への遺伝子導入は呼吸器疾患の制御に有望な方法と期待される。本研究ではプラスミドＤＮＡを肺静脈から逆行性に投与することで肺胞の細胞に遺伝子を導入できる事を示した。ルシフェラーゼ遺伝子をマーカーとして検討したところ、1.0ｍｌの投与量、３０秒の投与時間でルシフェラーゼ発現量が最大となることが判明した。また、ＬａｃＺの発現からＩＩ型肺胞細胞に遺伝子が導入されることも確認した。 hydrodynamics-based 法によりプラスミドＤＮＡを肺局所に導入する方法を確立したが、溶解液を撹拌してマイクロバブルを発生させることで遺伝子導入効率は向上しなかった。順行性投与では有意に導入効率が向上した。

研究成果

• [雑誌論文] Effective prevention of liver fibrosis by liver-targeted hydrodynamic gene delivery of matrix metalloproteinase-13 in a rat liver fibrosis model. (2016)
  • 著者名/発表者名: Abe H, Kamimura K, Kobayashi Y, Ohtsuka M, Miura H, Ohashi R, Yokoo T, Kanefuji T, Suda T, Tsuchida M, Aoyagi Y, Zhang G, Liu D, Terai S.
  • 雑誌名: Mol Ther Nucleic Acids 巻: 5 ページ: e276-e276
  • DOI: 10.1038/mtna.2015.49
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] The Effect of Fibrosis on Gene Delivery Efficiency of Hydrodynamics-based Gene Delivery (2015)
  • 著者名/発表者名: Kamimura K Abe H, Kobayashi Y, Ohtsuka M, Miura H, Yokoo T, Suda T, Tsuchida M, Liu D, Terai S
  • 学会等名: 第21回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 大阪国際会議場（大阪府大阪市）
  • 年月日: 2015-07-25
• [学会発表] Effective Prevention of Liver Fibrosis by Liver-targeted Hydrodynamic Gene Delivery of Matrix Metalloproteinase-13 in Rat Liver Fibrosis Model (2015)
  • 著者名/発表者名: Abe H Kamimura K, Kobayashi Y, Ohtsuka M, Miura H, Ohashi R, Yokoo T, Kanefuji T, Suda T, Tsuchida M, Aoyagi Y, Zhang G, Liu D, Terai S
  • 学会等名: 18th Annual Meeting of American Society of Gene & Cell Therapy
  • 発表場所: U.S.A, New Orleans, LA
  • 年月日: 2015-05-13
  • 国際学会
• [学会発表] Effect of Fibrotic Tissue on Liver-targeted Hydrodynamic Gene Delivery (2015)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Y, Kamimura K, Abe H, Ohtsuka M, Miura H, Yokoo T, Suda T, Tsuchida M, Aoyagi Y, Liu D, Terai S
  • 学会等名: 18th Annual Meeting of American Society of Gene & Cell Therapy
  • 発表場所: U.S.A, New Orleans, LA
  • 年月日: 2015-05-13
  • 国際学会