マウス表皮細胞から形質転換した角膜上皮様細胞を用いた角膜上皮再建の試み

• 研究課題/領域番号: 24592672
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 小林 剛 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 寄附講座助教 (70380285)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 培養上皮シート / 表皮細胞 / 角膜上皮 / 形質転換

研究成果の概要

自己の表皮細胞から形質転換させた角膜上皮細胞を用いることが可能となれば、角膜上皮再生医療の臨床効果は飛躍的に改善されると推測される。本研究では、マウス表皮細胞、表皮sp細胞を用い、マウス強角膜片を用いた器官培養ならびに輪部線維芽細胞との共培養による細胞シート作製を検討し、これらの培養系にて角膜上皮様細胞への形質転換が誘導される可能性を示した。さらに、実質細胞の働きに着目しトランスクリプトーム解析を行い、形質転換に関与する可能性のある複数の因子を見出した。これら実質由来因子の検討をさらに進めその働きを解明することで、器官培養およびフィーダー細胞を必要としない培養法の開発が可能になると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Stromaleepithelial interaction study: The effect of corneal epithelial cells on growth factor expression in stromal cells using organotypic culture model (2015)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Shiraishi A, Hara Y, Kadota Y, Yang L, Inoue T, Shirakata Y, Ohashi Y
  • 雑誌名: Experimental Eye Research 巻: in press ページ: 109-17
  • DOI: 10.1016/j.exer.2015.02.009
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Miraflow, Soft Contact Lens Cleaner, activity against Acanthamoeba spp. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Higuchi-Watanabe N, Shiraishi A ,Uno T, Ohashi Y
  • 雑誌名: Eye & Contact Lens. 巻: in press 号: 4 ページ: 240-244
  • DOI: 10.1097/icl.0000000000000112
  • 査読あり
• [雑誌論文] Horizontal intracorneal swirling water migration indicative of corneal endothelial function (2014)
  • 著者名/発表者名: Inoue T, Kobayashi T, Nakao S , Hara Y, Suzuki T, Hayashi Y, Zheng X, Shiraishi A, Ohashi Y
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 55 号: 12 ページ: 8006-14
  • DOI: 10.1167/iovs.14-14762
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Necrotizing Keratitis Caused by Acyclovir-Resistant Herpes Simplex Virus (2014)
  • 著者名/発表者名: Toriyama K. Inoue T. Suzuki T. Kobayashi T. Ohashi Y
  • 雑誌名: Case Rep Ophthalmol 巻: 5 号: 3 ページ: 325-328
  • DOI: 10.1159/000368297
• [雑誌論文] Genotypic analysis of Pseudomonas aeruginosa isolated from ocular infection (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S, Suzuki T, Kobayashi T, Oka N, Ishikawa E, Shinomiya H, Ohashi Y
  • 雑誌名: J Infect Chemother 巻: 20 号: 7 ページ: 407-11
  • DOI: 10.1016/j.jiac.2014.02.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Various pAQU plasmids possibly contribute to disseminate tetracycline resistance gene tet(M) among marine bacterial community. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nonaka, L., Maruyama, F., Onishi, Y., Kobayashi, T., Ogura, Y., Hayashi, T., Suzuki, S. and Masuda, M.
  • 雑誌名: Frontiers in Microbiology 巻: 5 ページ: 1-12
  • DOI: 10.3389/fmicb.2014.00152
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Differences between niche cells and limbal stromal cells in maintenance of corneal limbal stem cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Li Y, Inoue T, Takamatsu F, Kobayashi T, Shiraishi A, Maeda N, Ohashi Y, Nishida K.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 55 号: 3 ページ: 1453-62
  • DOI: 10.1167/iovs.13-13698
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 各種フルオロキノロン系抗菌点眼液がヒト培養角膜上皮細胞に与える影響についての検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 小林 剛, 樋口（渡部） 成美, 白石 敦, 大橋 裕一
  • 雑誌名: 医学と薬学 巻: 70 ページ: 61-66
• [雑誌論文] Involvement of P38MAPK in human corneal endothelial cell migration induced by (2013)
  • 著者名/発表者名: Joko T, Shiraishi A, Akune Y, Tokumaru S, Kobayashi T, Miyata K, Ohashi Y.
  • 雑誌名: Exp Eye Res. 巻: 108 ページ: 23-32
  • DOI: 10.1016/j.exer.2012.11.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of stem cell factor and c-kit in corneal wound healing in mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto K, Kobayashi T, Hayashi Y, Zhang Y, Hara Y, Higashine M, Shiraishi A, Ohashi Y.
  • 雑誌名: Mol Vis. 巻: 18 ページ: 1505-15
  • 査読あり
• [雑誌論文] Important role of epiregulin in inflammatory responses during corneal epithelial wound healing (2012)
  • 著者名/発表者名: Zhang Y.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: (In press) 号: 4 ページ: 2414-2423
  • DOI: 10.1167/iovs.11-8869
  • 査読あり
• [学会発表] ジフェニルメタン系下剤（ビサコジル）の新しいドライアイ点眼薬としての可能性 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小林剛
  • 学会等名: 第119回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 2015-04-16 – 2015-04-19
• [学会発表] 結膜の水輸送に及ぼすジフェニルメタン系下剤（ビサコジル）の影響 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小林剛、林康人、鎌尾知行、高平尚子、中尾早織、井上智之、白石敦、大橋裕
  • 学会等名: 第39回日本角膜学会総会
  • 発表場所: 高知市
  • 年月日: 2015-02-11 – 2015-02-13
• [学会発表] ドライアイモデルマウスの結膜囊内涙液貯留量に及ぼすビサコジル点眼の影響 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小林剛
  • 学会等名: 第38回日本角膜学会総会
  • 発表場所: 沖縄県宜野湾市
• [学会発表] 皮膚上皮細胞から角膜上皮様細胞への形質転換における実質の関与 (2013)
  • 著者名/発表者名: 小林剛
  • 学会等名: 第37回日本角膜学会総会
  • 発表場所: 和歌山県白浜町
• [産業財産権] 眼科用組成物 (2013)
  • 発明者名: 大橋 裕一, 白石 敦, 小林 剛
  • 権利者名: 国立大学法人愛媛大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2013-077862
  • 出願年月日: 2013-04-03