オートファジー系を分子標的とする新規神経疾患治療薬スクリーニング系の開発

• 研究課題/領域番号: 24650189
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 神経解剖学・神経病理学
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 秦野 伸二 東海大学, 医学部, 教授 (60281375)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2014年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2013年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 脳神経疾患 / 脳・神経 / トランスレーショナルリサーチ / 動物 / 神経科学 / 脳･神経

研究成果の概要

筋萎縮性側索硬化症(ALS)は、運動ニューロンの選択的変性を特徴とする神経変性疾患である。本研究では、細胞・個体レベルでのオートファジー動態の可視化を可能にする新たなツールを開発するため、 mKeima-RedとLC3Bの融合タンパク質を発現する新たなTGマウスの作出を試みた。その結果、神経系及び心筋・骨格筋においてmKeimaRed_LC3Bを高発現する2系統のTGマウスを樹立するとともに、培養細胞実験によりmKeimaRed_LC3B動態観察によりオートファゴソームの成熟過程をモニターすることに成功した。今後、これらのツールを用いて、治療候補化合物のスクリーニングを継続する必要がある。

研究成果

• [雑誌論文] Six SQSTM1 mutations in a Chinese amyotrophic lateral sclerosis cohort. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yang, Y., Tang, L., Zhang, N., Pan, L., Hadano, S., and Fan, D. -S.
  • 雑誌名: Amyotroph. Lateral Scler. Frontotempo. Degen. 巻: in press 号: 5-6 ページ: 378-384
  • DOI: 10.3109/21678421.2015.1009466
  • 査読あり
• [雑誌論文] SQSTM1 mutations in Han Chinese populations with sporadic amyotrophic lateral sclerosis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Chen, Y. P., Zheng, Z. Z., Chen, X. P., Huang, R., Yang, Y., Yuan, L. X., Pan, L., Hadano, S., and Shang, H. -F.
  • 雑誌名: Neurobiol. Aging 巻: 35 号: 3 ページ: 726.e7-726.e9
  • DOI: 10.1016/j.neurobiolaging.2013.09.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Different Human Copper-Zinc Superoxide Dismutase Mutants, SOD1G93A and SOD1H46R, Exert Distinct Harmful Effects on Gross Phenotype in Mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Lei Pan
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7巻 号: 3 ページ: e33409-e33409
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0033409
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel small-molecule, N-(4-(2-pyridyl)(1,3-thiazol-2-yl))-2-(2,4,6-trimethylphenoxy)acetamide, selectively protects against oxidative stress-induced cell death by activating the Nrf2-ARE pathway: Therapeutic implications for ALS. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanno, T.
  • 雑誌名: Free Radical Biol. Med. 巻: 53 号: 11 ページ: 2028-2042
  • DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2012.09.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dysregulation of the autophagy-endolysosomal system in amyotrophic lateral sclerosis and related motor neuron diseases (2012)
  • 著者名/発表者名: Otomo A, Pan L, and Hadano S
  • 雑誌名: Neurol. Res. Int 巻: 2012 ページ: 498428-498428
  • DOI: 10.1155/2012/498428
  • 査読あり
• [学会発表] p62/SQSTM1 deficiency accelerates motor neuron degeneration in SOD1H46R transgenic mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Pan, L., Otomo, A., Koike, M., Uchiyama, Y., Aoki, M., Abe, K., Ishii, T., Yanagawa, T., Shang, H. -F., Yoshii, F., and Hadano, S.
  • 学会等名: 25th International Symposium on ALS/MND
  • 発表場所: Brussels, Belgium
  • 年月日: 2014-12-05 – 2014-12-07
• [学会発表] オートファジー動態の可視化を目的とした新規トランスジェニックマウスの作出 (2014)
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二、王婷、田中政之、林英樹、荻原早苗、岡田千沙、伊藤誠敏、福西菜穂子、飯田裕美、中村彩花、大友麻子、大塚正人
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] 筋萎縮性側索硬化症原因遺伝子産物ALS2に結合する新規調節因子Rab30の機能解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小野寺和歌奈、大友麻子、福田光則、秦野伸二
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] ALS2及び新規ALS2結合低分子量Gタンパク質Rab17の細胞内局在解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小野鈴花、大友麻子、福田光則、秦野伸二
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Loss of p62/SQSTM1, an autophagy substrate, aggravates motor dysfunction in a SOD1H46R-expressing mouse ALS model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hadano, S., Pan, L., Otomo, A., Abe, K., Koike, M., Uchiyama, Y., Aoki, M., Ishii, T., Yanagawa, T., Shang, H. -F., and Yoshii, F.
  • 学会等名: 第37回日本神経科学大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-11 – 2014-09-13
• [学会発表] オートファジー関連因子p62/SQSTM1の機能喪失はALSマウスモデルの疾患症状を悪化させる (2014)
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二、潘雷、大友麻子、阿部幸一郎、小池正人、内山安男、青木正志、吉井文均、石井哲郎、柳川徹
  • 学会等名: 第61回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2014-05-15 – 2014-05-17
• [学会発表] Loss of p62/SQSTM1 exacerbates motor dysfunction in a mutant SOD1-expressing mouse ALS model. (2013)
  • 著者名/発表者名: Pan, L., Otomo, A., Abe, K., Ogawa, H., Chiba, T., Koike, M., Uchiyama, Y., Aoki, M., Yoshii, F., Ishii, T., Yanagawa, T., and Hadano, S.
  • 学会等名: 24th International Symposium on ALS/MND
  • 発表場所: Milan, Italy
• [学会発表] SQSTM1 mutations in sporadic Chinese patients with amyotrophic lateral sclerosis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Chen, Y., Chen, X., Huang, R., Zheng, Z., Wei, Q., Guo, X., Pan, L., Hadano, S., and Shang, H.
  • 学会等名: 24th International Symposium on ALS/MND
  • 発表場所: Milan, Italy
• [学会発表] ALSモデルマウスにおけるIP6K2の病態への関連性について（第２報） (2013)
  • 著者名/発表者名: 森谷祐介、永田栄一郎、潘雷、佐藤忠之、小川温子、秦野伸二、瀧澤俊也
  • 学会等名: 第54回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 筋萎縮性側索硬化症におけるイノシトール６リン酸キナーゼ２の役割 (2013)
  • 著者名/発表者名: 永田栄一郎、森谷祐介、藤井奈津子、小原さおり、佐藤忠之、高尾昌樹、潘雷、小川温子、秦野伸二、三原盤、瀧澤俊也
  • 学会等名: Neuro2013：第36回日本神経科学会大会/第56回日本神経化学会大会/第23回日本神経回路学会大会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 低分子量Gタンパク質Rab5の活性化因子、ALS2とRabGEF1は、EEA1-LC3陽性小胞の成熟と分解効率を調節する (2013)
  • 著者名/発表者名: 大友麻子、潘雷、小川温子、平塚結衣、秦野伸二
  • 学会等名: Neuro2013：第36回日本神経科学会大会/第56回日本神経化学会大会/第23回日本神経回路学会大会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] SQSTM1遺伝子変異が筋萎縮性側索硬化症（ALS）の発症に及ぼす影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二
  • 学会等名: 第7回オートファジー研究会
  • 発表場所: 掛川
• [学会発表] マウスモデルを用いたALS疾患症状の調節要因に関する研究. (2013)
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二
  • 学会等名: 東海大学総合医学研究所第４回シンポジウム
  • 発表場所: 霞ヶ関/東京
• [学会発表] Dysregulation of the autophagy-endolysosomal system in motor neuron diseases. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hadano, S.
  • 学会等名: BIT’s 3rd Annual World Congress on NeuroTalk-2012
  • 発表場所: Beijing, China
• [学会発表] Dysregulation of the autophagy-endolysosomal system in ALS and FTD. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hadano, S.
  • 学会等名: The 15th National Conference of Neurology
  • 発表場所: Guangzhou, China
  • 招待講演
• [学会発表] Different human copper-zinc superoxide dismutase mutants, SOD1G93A and SOD1H46R, exert distinct harmful effects on gross phenotype in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Pan, L.
  • 学会等名: The 15th National Conference of Neurology
  • 発表場所: Guangzhou, China
• [学会発表] Role of inositol hexakisphosphate kinase 2 in a mouse model for amyotrophic lateral sclerosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Moriya, Y.
  • 学会等名: Neuroscience 2012
  • 発表場所: New Orleans, Louisiana, USA
• [学会発表] Different human copper-zinc superoxide dismutase mutants, SOD1G93A and SOD1H46R, exert distinct harmful effects on gross phenotype in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Pan, L.
  • 学会等名: 23rd International Symposium on ALS/MND
  • 発表場所: Chicago, Illinois, U.S.A.
• [学会発表] Bromocriptine retards disease progression in an ALS mouse model via suppression of glial inflammation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, K.
  • 学会等名: 23rd International Symposium on ALS/MND
  • 発表場所: Chicago, Illinois, U.S.A.
• [学会発表] ALSモデルマウスにおけるイノシトール6リン酸キナーゼ2（IP6K2）の病態への関連性について. (2012)
  • 著者名/発表者名: 森谷祐介
  • 学会等名: 第53回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 家族性ALS原因遺伝子産物ALS2の機能喪失がオートファジー系に及ぼす影響. (2012)
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二
  • 学会等名: 第11回生体機能研究会
  • 発表場所: 箱根/神奈川
• [学会発表] 低分子量Gタンパク質Rab5の活性化因子、ALS2とRabGEF1は、EEA1-LC3要請小胞の形成と成熟を 調節する. (2012)
  • 著者名/発表者名: 大友麻子
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] Molecular pathogenesis of ALS/MNDs: Dysfunction of autophagy-endolysosomal system.
  • 著者名/発表者名: Hadano, S.
  • 学会等名: Fujian Conference of Neurology on Neurodegenerative Diseases
  • 発表場所: Fuzhou, China
  • 招待講演
• [学会発表] 細胞内エンドソーム動態と神経変性
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二
  • 学会等名: 厚生労働科学研究費補助金難治性疾患等克服研究事業神経変性疾患に関する調査研究班、「病態に根ざしたALSの新規治療法開発」分科班、平成25年度ワークショップ
  • 発表場所: 東京
  • 招待講演
• [学会発表] QSTM1遺伝子変異が筋萎縮性側索硬化症（ALS）の発症に及ぼす影響
  • 著者名/発表者名: 秦野伸二
  • 学会等名: 東海大学総合医学研究所第17回公開研究報告会
  • 発表場所: 伊勢原
• [図書] ALS2/Alsin、アクチュアル脳・神経疾患の臨床「すべてがわかるALS・運動ニューロン疾患」IV. ALSの病態関連遺伝子と遺伝子変異、辻省次、祖父江元編 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大友麻子、白川健太郎、宮嶋裕明、秦野伸二
  • 出版者: 中山書店