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蛋白質を用いた修飾tRNAの調製法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 24655145
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 生体関連化学
研究機関北海道大学

研究代表者

田中 良和  北海道大学, 先端生命科学研究科(研究院), 准教授 (20374225)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2013年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2012年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
キーワードtRNA / 精製 / 修飾 / 結晶化 / 結晶構造解析 / 結晶
研究概要

本研究では,大腸菌体内で構成させたtRNA-蛋白質複合体を用いて,目的の成熟tRNAを簡便かつ高純度に調製する系を構築することを目指す.まず,大腸菌由来tRNA(Met)アセチルトランスフェラーゼ(E.coli TmcA)の変異体のうち,tRNAとの結合活性の高いK205A変異体を用いて,大腸菌体内からtRNA(Met)を調製する系を確立した.更に,その結晶化を行い,6Å程度の分解能の回折を与える結晶を得た.更に,セレン導入蛋白質とtRNA(Gln),tRNA(Glu),tRNA(Lys)の共発現系を構築し,生体内で形成される蛋白質-tRNA複合体から高純度のtRNAを調製した.

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2014 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (10件) (うち査読あり 10件) 学会発表 (2件) 備考 (3件)

  • [雑誌論文] Direct interaction between EFL1 and SBDS is mediated by an intrinsically disordered insertion domain2014

    • 著者名/発表者名
      Nozomi Asano, Haruka Atsuumi, Akiyoshi Nakamura, Yoshikazu Tanaka, Isao Tanaka. Min Yao
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 443 号: 4 ページ: 1251-1256

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2013.12.143

    • NAID

      120005429607

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] SCO4008, a Putative TetR Transcriptional Repressor from Streptomyces coelicolor A3 (2), Regulates Transcription of sco4007 by Multidrug Recognition2013

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Hayashi, Yoshikazu Tanaka, Naoki Sakai, Ui Okada, Min Yao, Nobuhisa Watanabe, Tomohiro Tamura and Isao Tanaka
    • 雑誌名

      Journal of Molecular Biology

      巻: 435 号: 18 ページ: 3289-3300

    • DOI

      10.1016/j.jmb.2013.06.013

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural and genomic DNA analysis of a putative transcription factor SCO5550 from Streptomyces coelicolor A3 (2) : Regulating the expression of gene sco5551 as a transcriptional activator with a novel diner shape2013

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Hayashi, Yoshikazu Tanaka, Naoki Sakai, Nobuhisa Watanabe, Tomohiro Tamura, Isao Tanaka, Min Yao
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 435 号: 1 ページ: 28-33

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2013.04.017

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structure of dihydrouridine svnthase C (DusC) from Escherichia coli2013

    • 著者名/発表者名
      Minghao Chen, Jian Yu, Yoshikazu Tanaka, Miyuki Tanaka, Isao Tanaka and Min Yao
    • 雑誌名

      Acta Crystallographica

      巻: F69 号: 8 ページ: 834-838

    • DOI

      10.1107/s1744309113019489

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal Structure of Enzyme CapF of Staphylococcus aureus Reveals a Unique A rchitecture Composed of Two Functional Domains2012

    • 著者名/発表者名
      Miyafusa T, Caaveiro JM, Tanaka Y, Tsumoto K
    • 雑誌名

      Biochemical journal

      巻: (印刷中) 号: 3 ページ: 671-680

    • DOI

      10.1042/bj20112049

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Application of Photoactive Yellow Protein as a Photoresponsive Module for Controlling Hemolytic Activity of Staphylococcal α-Hemolysin2012

    • 著者名/発表者名
      M. Ui, et al.
    • 雑誌名

      Chemical Communications

      巻: 48 号: 39 ページ: 4737-4739

    • DOI

      10.1039/c2cc18118e

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] P19 embryonal carcinoma cells exhibit high sensitivity to botulinum type C and D/C mosaic neurotoxins2012

    • 著者名/発表者名
      Kentaro Tsukamoto, Hideyuki Arimitsu, Sadayuki Ochi, Keiji Nakamura, Yoshikazu Tanaka, Nipawan Nuemket, Koki Taniguchi, Shunji Kozaki and Takao Tsuji
    • 雑誌名

      Microbiol. Immunol

      巻: 56(10) 号: 10 ページ: 664-672

    • DOI

      10.1111/j.1348-0421.2012.00490.x

    • NAID

      40019437037

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The binding mechanism of eIF2β with its partner proteins, eIF5 and eIF2Bε, Biochem2012

    • 著者名/発表者名
      Gai Z, Kitagawa Y, Tanaka Y, Shimizu N, Komoda K, Tanaka I, Yao M
    • 雑誌名

      Biophys. Res. Commun

      巻: 423 号: 3 ページ: 515-519

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2012.05.155

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of a putative methyltransferase SAV1081 from Staphylococcus aureus2012

    • 著者名/発表者名
      Shunsuke Kita, Yoshikazu Tanaka, Nagisa Hirano, Satoshi Kimura, Takeo Suzuki, Tsutomu Suzuki, Min Yao, and Isao Tanaka
    • 雑誌名

      Protein & Pept. Lett.

      巻: 20 ページ: 530-537

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of a putative methyltransferase SAV1081 from Staphylococcus aureus.2012

    • 著者名/発表者名
      Kita, S.
    • 雑誌名

      Protein & Pept. Lett.

      巻: 20 ページ: 530-537

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Crystal structure analysis of a DING protein, International life-science symposium for young scientists2014

    • 著者名/発表者名
      Zuoqi Gai, Akiyoshi Nakamura, Yoshikazu Tanaka, Nagisa Hirano, Isao Tanaka, and Min Yao
    • 学会等名
      Faculty of Science
    • 発表場所
      Hokkaido University (Sapporo, Japan)
    • 年月日
      2014-03-03
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Crystal structure analysis of a DING protein2014

    • 著者名/発表者名
      Zuoqi Gai, Akiyoshi Nakamura, Yoshikazu Tanaka, Nagisa Hirano, Isao Tanaka, and Min Yao
    • 学会等名
      International life-science symposium for young scientists
    • 発表場所
      北海道大学理学部(札幌市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://altair.sci.hokudai.ac.jp/g6/index.html

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [備考] 北海道大学 X線構造生物学研究室 ホームページ

    • URL

      http://altair.sci.hokudai.ac.jp/g6/

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [備考] X線構造生物学研究室

    • URL

      http://altair.sci.hokudai.ac.jp/g6/

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

URL: 

公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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