研究課題/領域番号 |
24655145
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研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
生体関連化学
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研究機関 | 北海道大学 |
研究代表者 |
田中 良和 北海道大学, 先端生命科学研究科(研究院), 准教授 (20374225)
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研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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研究課題ステータス |
完了 (2013年度)
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配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2013年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2012年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
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キーワード | tRNA / 精製 / 修飾 / 結晶化 / 結晶構造解析 / 結晶 |
研究概要 |
本研究では,大腸菌体内で構成させたtRNA-蛋白質複合体を用いて,目的の成熟tRNAを簡便かつ高純度に調製する系を構築することを目指す.まず,大腸菌由来tRNA(Met)アセチルトランスフェラーゼ(E.coli TmcA)の変異体のうち,tRNAとの結合活性の高いK205A変異体を用いて,大腸菌体内からtRNA(Met)を調製する系を確立した.更に,その結晶化を行い,6Å程度の分解能の回折を与える結晶を得た.更に,セレン導入蛋白質とtRNA(Gln),tRNA(Glu),tRNA(Lys)の共発現系を構築し,生体内で形成される蛋白質-tRNA複合体から高純度のtRNAを調製した.
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