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細胞内タンパク質の微小な構造変化を可視化する手法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 24657101
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 生物物理学
研究機関京都大学

研究代表者

今村 博臣  京都大学, 白眉センター, 准教授 (20422545)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2013年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2012年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
キーワードバイオイメージング / FRET / タンパク質動態 / バイオセンサー / 抗体 / アセチルCoA / 蛍光タンパク質 / イメージング
研究概要

タンパク質の構造変化を利用したフェルスター共鳴エネルギー移動(FRET)型バイオセンサーは、生きた細胞内の情報を得るための非常に有用なツールとなっている。しかし、構造変化の小さいタンパク質をバイオセンサーに利用することが非常に困難であるという欠点があった。本研究では、微小な構造変化を見分ける抗体を利用することによりこの問題を克服することを試みた。重要な細胞内代謝物であるアセチルCoA結合タンパク質とそれに対する抗体を利用することで、アセチルCoAに対するFRET型バイオセンサーの開発をおこなった。

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (29件)

すべて 2014 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (11件) (うち査読あり 11件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (14件) (うち招待講演 3件) 図書 (1件) 備考 (3件)

  • [雑誌論文] Toll-like receptor 9 protects non-immune cells from stress by modulating mitochondrial ATP synthesis through the inhibition of SERCA2.2014

    • 著者名/発表者名
      Shintani Y, Drexler HC, Kioka H, Terracciano CM, Coppen SR, Imamura H, Akao M, Nakai J, Wheeler AP, Higo S, Nakayama H, Takashima S, Yashiro K, Suzuki K.
    • 雑誌名

      EMBO Reports

      巻: 15 号: 4 ページ: 438-445

    • DOI

      10.1002/embr.201337945

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] ATP increases within the lumen of the endoplasmic reticulum upon intracellular Ca2+-release2014

    • 著者名/発表者名
      Vishnu, N, Jadoon Khan, M, Karsten, F, Groschner, LN, Waldeck-Weiermair, M, Rost, R, Hallström, S, Imamura, H, Graier, WF, Malli, R
    • 雑誌名

      Molecular Biology of the Cell

      巻: 25 号: 3 ページ: 368-379

    • DOI

      10.1091/mbc.e13-07-0433

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Glucose-stimulated single pancreatic islets sustain increased cytosolic ATP levels during initial Ca2+ influx and subsequent Ca2+ oscillations2013

    • 著者名/発表者名
      Tanaka T, Nagashima K, Inagaki N, Kioka H, Takashima S, Fukuoka H, Noji H, Kakizuka A and Imamura H
    • 雑誌名

      J Biol Chem

      巻: 289 号: 4 ページ: 2205-2216

    • DOI

      10.1074/jbc.m113.499111

    • NAID

      120005689188

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Evaluation of intra-mitochondrial ATP levels identifies G0/G1 switch gene 2 as a positive regulator of oxidative phosphorylation2013

    • 著者名/発表者名
      Kioka H, Kato H, Fujikawa M, Tsukamoto O, Suzuki T, Imamura H, Nakano A, Higo S, Yamazaki S, Matsuzaki T, Tkafuji K, Asanuma H, Asakura M, Minamino T, Shintani Y, Yoshida M, Noji H, Kitakaze M, Komuro I, Asano Y and Takashima S
    • 雑誌名

      PNAS

      巻: 111 号: 1 ページ: 273-278

    • DOI

      10.1073/pnas.1318547111

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Genetically encoded fluorescent thermosensors visualize subcellular thermoregulation in living cells2013

    • 著者名/発表者名
      Shigeki Kiyonaka, Taketoshi Kajimoto, Reiko Sakaguchi, Daisuke Shinmi, Mariko Omatsu-Kanbe, Hiroshi Matsuura, Hiromi Imamura, Takenao Yoshizaki, Itaru Hamachi, Takashi Morii, Yasuo Mori
    • 雑誌名

      Nature Methods

      巻: 10 号: 12 ページ: 1232-1238

    • DOI

      10.1038/nmeth.2690

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] In vivo fluorescent ATP imaging of Drosophila melanogaster and Caenorhabditis elegans by using a genetically encoded fluorescent ATP biosensor optimized for low temperatures.2013

    • 著者名/発表者名
      Tsuyama, Taiichi; Kishikawa, Jun-ichi; Han, Yong-Woon; Harada, Yoshie; Tsubouchi, Asako; Noji, Hiroyuki; Kakizuka, Akira; Yokoyama, Ken; Uemura, Tadashi; Imamura, Hiromi.
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: 85(16) 号: 16 ページ: 7889-7896

    • DOI

      10.1021/ac4015325

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Role of PFKFB3-driven glycolysis in vessel sprouting2013

    • 著者名/発表者名
      De Bock, K, Georgiaudou, M, Schoors, S, Kuchnio, A, Rita Cantelmo, A, Wong, RW, Quaegebeur, A, Ghesquiére, B, Cauwehberghs, S, Eelen, G, Phng, LK, Betz, I, Tembuyser, B, Brepoels, K, Welti, J, Geudens, I, Segura, I, Cruys, B, Bifari, F, Decimo, I, Blanco, R, Wyns, S, Vangindertael, J, Rocha, S, Collins, R, Munck, S, Daelemans, D, Imamura, H, Devlieger, R, Rider, M, Van Veldhoven, PP, Schuit, F, Bartrons, R, Hofkens, J, Fraisi, P, Telang, S, DeBerardinis, RJ, Schoonjans, L, Vinckier, S, Chesney, J, Gerhardt, H, Dewerchin, M, Carmeliet, P
    • 雑誌名

      Cell

      巻: 154(3) 号: 3 ページ: 651-63

    • DOI

      10.1016/j.cell.2013.06.037

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 細胞内ATPの分布とダイナミクス,その制御2013

    • 著者名/発表者名
      今村博臣、安東友美、藤川誠
    • 雑誌名

      生物物理

      巻: 53 号: 1 ページ: 020-023

    • DOI

      10.2142/biophys.53.020

    • NAID

      10031139021

    • ISSN
      0582-4052, 1347-4219
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Spatiotemporal correlations between cytosolic and mitochondrial Ca^<2+>signals using a novel red-shifted mitochondrial targeted cameleon2012

    • 著者名/発表者名
      Waldeck-Weiermair M, Alam MR, Khan MJ, Deak AT, Vishnu N, Karsten F, Imamura H, Graier WF, Malli R
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 7 号: 9 ページ: e45917-e45917

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0045917

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Hatsugai N, Koldenkova VP, Imamura H, Noji H, Nagai T2012

    • 著者名/発表者名
      Hatsugai N, Koldenkova VP, Imamura H, Noji H, Nagai T
    • 雑誌名

      Plant. Cell Physiol

      巻: 53 号: 10 ページ: 1768-1775

    • DOI

      10.1093/pcp/pcs119

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Assessing the actual contribution of IF1, an inhibitor of mitochondrial FoF1, to ATP homeostasis, cell growth, mitochondrial morphology and cell viability2012

    • 著者名/発表者名
      Fujikawa M, Imamura H, Nakamura J, Yoshida M
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem.

      巻: 287 号: 22 ページ: 18781-18787

    • DOI

      10.1074/jbc.m112.345793

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 膵臓ランゲルハンス島におけるATPとCa^<2+>の同時イメージング2014

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      第3回発生におけるエネルギー代謝を考える会
    • 発表場所
      熊本大学発生医学研究所
    • 年月日
      2014-02-13
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 膵臓ランゲルハンス島におけるATPとCa^<2+>の同時イメージング2013

    • 著者名/発表者名
      田中喬、今村博臣
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会第39回討論会
    • 発表場所
      静岡県コンベンションアーツセンターグランシップ
    • 年月日
      2013-12-19
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] ATPイメージングによる生細胞内ミトコンドリア機能の評価2013

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      日本生化学会第86回年会シンポジウム「ミトコンドリアワールド : エネルギー生産から生体内環境保全まで」
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2013-09-11
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 蛍光ATPバイオセンサーATeamを用いた膵島エネルギー代謝の解析2013

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      第13回Islet Biology研究会
    • 発表場所
      日本都市センターホテル
    • 年月日
      2013-07-20
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 蛍光ATPバイオセンサーを用いたATP代謝の解析2013

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      第50回日本臨床分子医学会学術集会第50回記念特別企画シンポジウム「分子イメージングの最前線」
    • 発表場所
      東京国際フォーラム
    • 年月日
      2013-04-12
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Imaging of intracellular ATP dynamics in single apoptotic cells2013

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto S, Kakizuka A, Imamura H
    • 学会等名
      11^<th> International Student Seminar
    • 発表場所
      Kyoto University, Japan
    • 年月日
      2013-03-10
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] アポトーシスにおける細胞内ATPの挙動の解析2012

    • 著者名/発表者名
      坂本修一朗、野地博行、垣塚彰、今村博臣
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会第38回討論会
    • 発表場所
      岡山大学(岡山)
    • 年月日
      2012-12-24
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Fluorescent ATP biosensor optimized for imaging of cells from non-vertebrate model organisms2012

    • 著者名/発表者名
      Imamura H, Tsuyama T, Uemura T, Kakizuka A
    • 学会等名
      International Symposia"New Frontiers of Metabolism Research in Biomedical Sciences"
    • 発表場所
      University of Tokyo, Japan
    • 年月日
      2012-09-28
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Genetically-encoded ATP biosensor for low temperatures2012

    • 著者名/発表者名
      Imamura H, Tsuyama T, Kishikawa J, Noji H, Kakizuka A, Yokoyama K, Uemura T
    • 学会等名
      17^<th> European Bioenergetic Conference
    • 発表場所
      University of Freiburg, Germany
    • 年月日
      2012-09-19
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 蛍光ATPバイオセンサーを用いたATP代謝の解析

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      第50回日本臨床分子医学会学術集会
    • 発表場所
      東京国際フォーラム
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 蛍光ATPバイオセンサーATeamを用いた膵島エネルギー代謝の解析

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      第13回Islet Biology 研究会
    • 発表場所
      日本都市センターホテル
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ATPイメージングによる生細胞内ミトコンドリア機能の評価

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      日本生化学会第86回年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 膵臓ランゲルハンス島におけるATPとCa2+の同時イメージング

    • 著者名/発表者名
      田中喬、今村博臣
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会 第39回討論会
    • 発表場所
      静岡県コンベンションアーツセンター
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 膵臓ランゲルハンス島におけるATPとCa2+の同時イメージング

    • 著者名/発表者名
      今村博臣
    • 学会等名
      第3回 発生におけるエネルギー代謝を考える会
    • 発表場所
      熊本大学
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [図書] "ATP imaging in Xenopus laevis oocyte."In a book entitled "Sexual Reproduction in Animals and Plants"(Hitoshi Sawada, Naokazu Inoue, and Megumi Iwano)

    • 著者名/発表者名
      Ijiri, T.W., Kishikawa, J., Imamura, H., Iwao, Y., Yokoyama, K. and Sato K.
    • 出版者
      Springer Japan
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.lif.kyoto-u.ac.jp/labs/imamura/index.html

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [備考] インスリン分泌における重要因子が変動する様子を可視化

    • URL

      http://www.kyoto-u.ac.jp/ja/news_data/h/h1/news6/2013_1/140130_2.htm

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [備考] Imamura group HP

    • URL

      http://www.lif.kyoto-u.ac.jp/labs/imamura/Site/Top.html

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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