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動物細胞内での遺伝子増幅速度を支配する分子機構と、その活用

研究課題

研究課題/領域番号 24658290
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 応用分子細胞生物学
研究機関広島大学

研究代表者

清水 典明  広島大学, 生物圏科学研究科, 教授 (10216096)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2013年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワード遺伝子増幅 / 組換え蛋白質生産 / 染色体外遺伝因子 / 細胞がん化 / 細胞工学 / 哺乳動物複製開始 / 複製開始配列 / 核マトリックス結合領域 / IR/MAR / 蛋白質生産 / ゲノム不安定性 / 複製開始
研究概要

哺乳動物複製開始に関与するIR/MAR配列が、Mtxにより誘導される遺伝子増幅を、どのように加速するかを検討した。その結果、IR/MAR配列を持つと、初期に染色体外で多量体化して一定期間維持されるために、プラスミドの比較的大きな反復配列となり、それが染色体上の多数の場所に挿入されることが明確となった。その結果、染色体の脆弱部位に近接する確率が高くなり、BFBサイクルにより伸長して長大なHSRを形成する確率が高くなることが示唆された。本研究により、発がん過程での遺伝子増幅現象を明確に出来たとともに、卓越した蛋白質医薬品の製造方法に関して、その機構を明確に出来た。

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (20件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (16件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] Dissection of the Beta-Globin Replication-Initiation Region Reveals Specific Requirements for Replicator Elements during Gene Amplification2013

    • 著者名/発表者名
      Naoya Okada, Nor iaki Shimizu
    • 雑誌名

      PLos ONE

      巻: Volume 8, Issue 10

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Dissection of the Beta-Globin Replication-Initiation Region Reveals Specific Requirements for Replicator Elements during Gene Amplification.2013

    • 著者名/発表者名
      Naoya Okada, Noriaki Shimizu
    • 雑誌名

      PLos ONE

      巻: Volume 8, Issue 10 号: 10 ページ: e77350-e77350

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0077350

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient Recombinant Production in Mammalian Cells Using a Novel IR/MAR Gene Amplification Method2012

    • 著者名/発表者名
      Yoshio Araki, Tetsuro Hamafuji, Chiemi Noguchi and Nor iaki Shimizu
    • 雑誌名

      PLos ONE

      巻: olume 7, Issue 7 号: 7 ページ: e41787-e41787

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0041787

    • URL

      http://www.plosone.org/article/metrics/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0041787

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Fusion of the Dhfr/Mtx and IR/MAR gene amplification methods produces a rapid and efficient method for stable recombinant protein production2012

    • 著者名/発表者名
      Chiemi Noguchi, Yoshio Araki, Daisuke Miki, Nor iaki Shimizu
    • 雑誌名

      PLos ONE

      巻: Volume 7, Issue 12 号: 12 ページ: e52990-e52990

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0052990

    • URL

      http://www.plosone.org/article/metrics/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0052990

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 動物細胞内で組み換え遺伝子を高度に増幅させるIR/MAR(アイ・アール/マー)法と、蛋白質生産2013

    • 著者名/発表者名
      清水典明
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      Bio-industry Seminarパシフィコ横浜
    • 年月日
      2013-09-11
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 複製ストレスにより誘導される遺伝子数増減の分子機構と、IR/MAR配列の影響2013

    • 著者名/発表者名
      田中俊介,満田祥平,清水典明
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] IR/MAR遺伝子増幅法と、蛋白質生産への応用2013

    • 著者名/発表者名
      清水典明
    • 学会等名
      日本動物細胞工学会2013年大会シンポジウム4「日本発、世界を目指すバイオ医薬生産」
    • 発表場所
      福井
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] IR/MAR遺伝子増幅法と、蛋白質生産への応用2013

    • 著者名/発表者名
      清水典明
    • 学会等名
      日本動物細胞工学会 2013年大会 シンポジウム4「日本発、世界を目指すバイオ医薬生産」
    • 発表場所
      福井市
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 哺乳動物細胞内で、遺伝子増幅により形成された反復配列からの発現を高めるヒトゲノム配列の、単離と解析2013

    • 著者名/発表者名
      元明優人,清水典明
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 複製ストレスにより誘導される遺伝子数増減の分子機構と、IR/MAR 配列の影響2013

    • 著者名/発表者名
      田中俊介,満田祥平,清水典明
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 染色体と染色体外遺伝因子の間で、クロマチンのエピジェネティック修飾状態はどのように異なるか?2013

    • 著者名/発表者名
      満田祥平,清水典明
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] ヒト染色体断片化による、自律複製する安定な染色体外遺伝因子の新生2013

    • 著者名/発表者名
      坂丸 直人,浪花 修平,カポール リタ,宇谷 公一,清水 典明
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] IR/MAR-Dhfr融合遺伝子増幅法・・・安定な高発現細胞を早く生じる新規方法による、遺伝子増幅の機構2012

    • 著者名/発表者名
      田中俊介、野口千笑、荒木義雄、清水典明
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会
    • 発表場所
      マリンメッセ福岡
    • 年月日
      2012-12-14
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Recombinant protein production in CHO cells using the IR/MAR-amplification based technology2012

    • 著者名/発表者名
      Noriaki Shimizu, Yoshio Araki, Chiemi Noguchi and Tetsuro Hamafuji
    • 学会等名
      The 25^<th> Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology (JAACT 2012)
    • 発表場所
      Nagoya Congress Center, Nagoya, Japan
    • 年月日
      2012-11-30
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 動物細胞内で組み換え遺伝子を高度に増幅させるIR/MAR(アイ・アール/マー)法と、蛋白質生産

    • 著者名/発表者名
      清水典明
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会 Bio-industry Seminar
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Recombinant protein production in CHO cells using the IR/MAR-amplification based technology

    • 著者名/発表者名
      Noriaki Shimizu, Yoshio Araki, Chiemi Noguchi and Tetsuro Hamafuji
    • 学会等名
      The 25th Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology (JAACT 2012)
    • 発表場所
      Nagoya Congress Center, Nagoya, Japan
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ヒト複製開始配列に含まれる、遺伝子増幅を指示する配列の分子解剖

    • 著者名/発表者名
      岡田直也、清水典明
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会
    • 発表場所
      マリンメッセ福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 哺乳動物細胞内で、遺伝子増幅により形成された反復配列からの発現を高めるヒトゲノム配列の、単離と解析

    • 著者名/発表者名
      元明優人、清水典明
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会
    • 発表場所
      マリンメッセ福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] IR/MAR-Dhfr融合遺伝子増幅法・・・安定な高発現細胞を早く生じる新規方法による、遺伝子増幅の機構

    • 著者名/発表者名
      田中俊介、野口千笑、荒木義雄、清水典明
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会
    • 発表場所
      マリンメッセ福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 染色体外遺伝因子の細胞内安定性を支配する遺伝的背景と、染色体断片化による新規染色体外遺伝因子の形成

    • 著者名/発表者名
      浪花修平、カポール・リタ、宇谷公一、清水典明
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会
    • 発表場所
      マリンメッセ福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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