超高効率ジーンターゲティングを可能にするヒト遺伝子の網羅的探索と応用

• 研究課題/領域番号: 24659035
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 足立 典隆 横浜市立大学, 生命ナノシステム科学研究科(八景キャンパス), 教授 (30264675)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: ジーンターゲティング / FACS解析 / ジーンターゲティンク

研究概要

ゲノム上の遺伝子を自由自在に改変できるようになれば、生物学全般のみならず、医療や創薬、農畜産等の分野において大きな発展が期待できる。本研究では、ジーンターゲティング（標的遺伝子破壊）技術を医療創薬の分野に応用していくことを目的とした基礎研究として、ヒト細胞のジーンターゲティング効率に大きく影響する因子の探索を行った。その結果、いくつかの遺伝子の発現抑制によりジーンターゲティング効率が上昇することが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] in vivo evidence that phenylalanine 171 acts as a molecular brake for translesion DNA synthesis across benzo[a]pyrene DNA adducts by human DNA polymerase (2014)
  • 著者名/発表者名: A. Sassa, T. Suzuki, Y. Kanemaru, N. Niimi, H. Fujimoto, A. Katafuchi, P. Gruz, M. Yasui, R.C. Gupta, F. Johnson, T. Ohta, M. Honma, N. Adachi and T. Nohmi
  • 雑誌名: DNA Repair 巻: 15 ページ: 21-28
  • DOI: 10.1016/j.dnarep.2013.12.008
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Repair of accidental DNA double-strand breaks in the human genome and its relevance to vector DNA integration (2013)
  • 著者名/発表者名: Adachi N,Saito S,Kurosawa A
  • 雑誌名: Gene Technology 巻: 3 号: 01
  • DOI: 10.4172/2329-6682.1000e107
• [雑誌論文] C-terminal region of DNA ligase IV drives XRCC4/DNA ligase IV complex to chromatin (2013)
  • 著者名/発表者名: Liu S, Liu X, Kamdar RP, Wanotayan R, Sharma MK, Adachi N, Matsumoto Y
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 439 号: 2 ページ: 173-178
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.08.068
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endogenous factors causative of spontaneous DNA damage that leads to random integration in human cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: N. Adachi et al.
  • 雑誌名: Gene Technology 巻: 2 号: 01 ページ: 105-105
  • DOI: 10.4172/2329-6682.1000105
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation and use of genetically modified human cell lines : a promising approach for in vitro toxicology studies (2013)
  • 著者名/発表者名: Adachi N
  • 雑誌名: J Clinic Toxicol 巻: 3(5) 号: 05 ページ: 45-45
  • DOI: 10.4172/2161-0495.s1.009
• [雑誌論文] DNA Ligase IV and Artemis Act Cooperatively to Suppress Homologous Recombination in Human Cells: Implications for DNA Double-Strand Break Repair. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurosawa A, Saito S, So S, Hashimoto M, Iwabuchi K, Watabe H, Adachi N.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 号: 8 ページ: e72253-e72253
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0072253
  • 査読あり
• [雑誌論文] Restoration of mismatch repair functions in human cell line Nalm-6, which has high efficiency for gene targeting (2013)
  • 著者名/発表者名: T. Suzuki, A. Ukai, M. Honma, N. Adachi and T. Nohmi
  • 雑誌名: PLoS.One 巻: 8 号: 4 ページ: e61189-e61189
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0061189
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interference in DNA replieation can cause mitotic chromosomal breakage unassociated with double-strand breaks (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujita Mari, Sasanuma H, Kimiyo N. Yamamoto Harada H, Kurosawa A, Adachi N, Omura M, Hiraoka M, Takeda S, Hirota K.
  • 雑誌名: PLos One 巻: 8 号: 4 ページ: 60043-60043
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0060043
  • 査読あり
• [雑誌論文] Both CpG methylation and AID are required for the fragility of the human Bcl-2 major breakpoint region : Implications for the timing of the breaks in the t(l4;l8) (2013)
  • 著者名/発表者名: Cui X,Lu Z,Kurosawa A,Klemm L,Bagshaw A,Tsai A,Gemmell N,Muschen M,Adachi N,Hsieh CL,Lieber MR
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 巻: 33(5) 号: 5 ページ: 947-57
  • DOI: 10.1128/mcb.01436-12
• [雑誌論文] Restoration of mismatch repair functions in human cell line Nalm-6, which has high efficiency for gene targeting. (2013)
  • 著者名/発表者名: Adachi N. et al.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Model for MLL translocations in therapy-related leukemia involving topoisomerase IIbeta mediated DNA strand breaks and gene proximity (2012)
  • 著者名/発表者名: Cowell IG,Sondka Z,Smith K,Lee KC,Manville CM,Sidorczuk-Lesthuruge M,Rance HA,Padget K,]ackson GH,Adachi N,Austin CA
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A 巻: 109(23) 号: 23 ページ: 8989-94
  • DOI: 10.1073/pnas.1204406109
• [雑誌論文] Artemis C-terminal region facilitates efficient V(D)J recombination through its interaction with both DNA Ligase IV and DNA-PKcs. (2012)
  • 著者名/発表者名: N. Adachi, et al.
  • 雑誌名: J.Exp. Med. 巻: 209 号: 5 ページ: 955-963
  • DOI: 10.1084/jem.20111437
  • 査読あり
• [雑誌論文] The helicase domain and C-terminus of human RecQL4 facilitate replication elongation on DNA templates damaged by ionizing radiation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kohzaki M
  • 雑誌名: Carcinogenesis 巻: 33 号: 6 ページ: 1203-1210
  • DOI: 10.1093/carcin/bgs149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Model for MLL translocations in therapy-related leukemia involving topoisomerase IIbeta mediated DNA strand breaks and gene proximity. (2012)
  • 著者名/発表者名: Adachi N. et al.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A. 巻: 109 ページ: 8989-8994
  • 査読あり
• [備考]
  • URL: http://dnar.sci.yokohama-cu.ac.jp/
• [産業財産権] 遺伝子ターゲティングベクター及びその利用方法 (2012)
  • 発明者名: 足立典隆
  • 権利者名: 足立典隆
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2012-12-12
  • 外国
• [産業財産権] 遺伝子ターゲティングベクター、その作製方法及び利用方法 (2012)
  • 発明者名: 足立典隆
  • 権利者名: 足立典隆
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2012-05-24
  • 外国