アメーバ共生細菌プロトクラミジアアンキリンエフェクターの機能解析

• 研究課題/領域番号: 24659194
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 細菌学(含真菌学)
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 山口 博之 北海道大学, 大学院保健科学研究院, 教授 (40221650)
• 研究分担者: 中村 眞二 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40207882) ; 松尾 淳司 北海道大学, 大学院保健科学研究院, 助教 (50359486)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 微生物間共生 / 原始クラミジア / エフェクター / クラミジア / アンキリンリピート / IV型分泌装置 / アメーバ / 共生細菌

研究概要

以下の2点についてこれ迄に明らかにした。
1. 札幌の河川水より分離・株化したアメーバに共生する偏性細胞内寄生性細菌Protochlamydia R18株のドラフトゲノムを決定し、比較ゲノム解析より蛋白蛋白相互作用に深く関わるアンキリン(Ank)モチーフやロイシンリッチリピート(LRR)を持つ分子をコードする計38つの遺伝子を同定した。
2. 同定したAnkやLRRを持つ分子をコードする共生細菌の遺伝子がアメーバ内で実際に発現していることをRT-PCRにて確認した。現在、Protochlamydia R18ドラフトゲノム情報を基にカスタマイズしたDNAマイクロアレイを用いてアメーバ内での共生細菌の遺伝子発現変化の網羅的な解析を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Protochlamydia Induces Apoptosis of Human HEp-2 Cells through Mitochondrial Dysfunction Mediated by Chlamydial Protease-Like Activity Factor. (2013)
  • 著者名/発表者名: Junji Matsuo, Shinji Nakamura, Atsushi Ito, Tomohiro Yamazaki, Kasumi Ishida. Yasuhiro Hayashi, Mitsutaka Yoshida, Kaori Takahashi, Tsuyoshi Sekizuka, Fumihiko Takeuchi, Makoto Kuroda, Hiroki Nagai, Kyoko Hayashida, Chihiro Sugimoto. Hiroyuki Yamaguchi
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 号: 2 ページ: e56005-e56005
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0056005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chlamydophila pneumoniae in Human Immortal Jurkat cells and Primary Lymphocytes Uncontrolled by Interferon-γ (2013)
  • 著者名/発表者名: Kasumi Ishida. Takeru Kubo, Ayumi Saeki, Chikayo Yamane, Junji Matsuo, Yimin, Shinji Nakamura, Yasuhiro Hayashi, Miyuki Kunichika, Mitsutaka Yoshida, Kaori Takahashi, Itaru Hirai, Yoshimasa Yamamoto, Kenichiro Shibata, Hiroyuki Yamaguchi
  • 雑誌名: Microbes and Infection 巻: 15 号: 3 ページ: 192-200
  • DOI: 10.1016/j.micinf.2012.11.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of steroid receptor antagonist RU486 (mifepristone) on Chlamydophila pneumoniae in IFN g-induced persistent infection model with epithelial HEp-2 cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishida K
  • 雑誌名: Journal of Infection and Chemothrapy 巻: 18 号: 1 ページ: 22-29
  • DOI: 10.1007/s10156-011-0274-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ciliates expel environmental Legionella-laden pellets to stockpile food. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fuhito Hojo, Daisuke Sato, Junji Matsuo, Masaki Miyake, Shinji Nakamura, Miyuki Kunichika, Yasuhiro Hayashi, Mitsutaka Yoshida, Kaori Takahashi, Hiromu Takemura, Shigeru Kamiya and Hiroyuki Yamaguchi
  • 雑誌名: Appl. Environ. Microbiol. 巻: 78 号: 15 ページ: 5247-5257
  • DOI: 10.1128/aem.00421-12
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chlamydia trachomatis serovar L2 infection model using human lymphoid Jurkat cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Kubo T, Ishida K, Matsuo J, Nakamura S, Hayashi Y, Sakai H, Yoshida M, Takahashi K, Hirai I, Yamamoto Y, Yamaguchi H
  • 雑誌名: Microb Pathog 巻: 53 ページ: 1-11
  • NAID: 120005946711
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequency of Chlamydia trachomtis in Ureaplasma-positive healthy women attending their first prenatal visit in a community hospital in Sapporo, Japan (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki T
  • 雑誌名: BMC Infectious Diseases 巻: (in press) 号: 1 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1186/1471-2334-12-82
  • 査読あり
• [学会発表] Ureaplasma parvumの存在はIFN-γ によるChlamydia trachomatis発育抑制効果を減弱させる (2013)
  • 著者名/発表者名: 山崎智拡 (山口博之)
  • 学会等名: 第86回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ (千葉市)
• [学会発表] アメーバ共生細菌原始クラミジアは低温下にてヒト上皮細胞株HEp-2細胞内で増殖する (2013)
  • 著者名/発表者名: 山根千夏世 (山口博之)
  • 学会等名: 第86回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ (千葉市)
• [学会発表] アメーバ共生難培養性細菌原始クラミジアの比較ゲノム解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口博之 (山口博之)
  • 学会等名: 第86回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ (千葉市)
• [学会発表] 原始クラミジアProtochlamydiaはchlamydial protease-like activity factor (CPAF) を介してヒト上皮系細 胞株HEp-2 にアポトーシスを誘導する (2013)
  • 著者名/発表者名: 松尾淳司 (山口博之)
  • 学会等名: 第86回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ (千葉市)
• [学会発表] クラミジア感染ヒトリンパ球細胞株Jurkat細胞内における遺伝子変化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 石田香澄 (山口博之)
  • 学会等名: 第86回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ (千葉市)
• [学会発表] 原始クラミジア, それは病原性クラミジアの細胞内生存戦略を紐解くヒントである (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口博之
  • 学会等名: 第30回日本クラミジア研究会
  • 発表場所: 国立感染症研究所(東京都)
  • 招待講演
• [学会発表] Amoebal endosymbiont primitive chlamydiae: a hint to uncover the intracellular survival strategy of human pathogenic chlamydiae (2012)
  • 著者名/発表者名: Hiroyuki Yamaguchi
  • 学会等名: The 11th Korea-Japan International Symposium on Microbiology
  • 発表場所: ロッテリゾートホテル (Korea)
  • 招待講演
• [学会発表] Parachlamydia acanthamoebae attachment to amoebae is required for several amoebal secreted molecules and serine-protease activity (2012)
  • 著者名/発表者名: Hayashi Yasuhiro (Yamaguchi Hiroyuki)
  • 学会等名: ASM 112th General Metting
  • 発表場所: Moscone Center (USA)
• [学会発表] Pathogenic Chlamydial Growth in Human Immortal Jurkat Lymphoid Cells Uncontrolled by Interferon-γ (2012)
  • 著者名/発表者名: Kasumi Ishida (Hiroyuki Yamaguchi)
  • 学会等名: ASM 112th General Metting
  • 発表場所: Moscone Center (USA)
• [学会発表] Prevalence of Chlamydia trachomatis and Ureaplasma species in healthy women (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomohiro Yamazaki (Hiroyuki Yamaguchi)
  • 学会等名: ASM 112th General Metting
  • 発表場所: Moscone Center (USA)
• [学会発表] Environmental chlamydia, Protochlamydia induces caspase-dependent apoptosis to human immortal HEp-2 cells by triggering a mitochondrial pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: Junji Matsuo (Hiroyuki Yamaguchi)
  • 学会等名: ASM 112th General Metting
  • 発表場所: Moscone Center (USA)