培養細胞とタンデムマスとを用いた小児感染毒素等によるβ酸化障害評価法の開発

• 研究課題/領域番号: 24659498
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 島根大学
• 研究代表者: 山口 清次 島根大学, 医学部, 教授 (60144044)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2014年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2013年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2012年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 脂肪酸酸化 / セレウリド / タンデムマス法 / in vitro probe assay / 急性脳症 / 解熱剤 / heat stress / 脂肪酸β酸化 / β酸化能 / 低体温療法 / 細菌毒素 / 小児薬物 / 発熱ストレス

研究成果の概要

小児急性脳症の機序として、細菌毒素、使用される薬剤、高温環境などによる脂肪酸β酸化障害の関与の可能性を検討した。方法は、培養細胞とタンデムマスを用いるin vitro probe (IVP) assay によるβ酸化能評価法を応用した。
その結果、食中毒菌であるセレウス菌の毒素セレウリド、高温環境（41℃）あるいは解熱剤のアスピリンとジクロフェナクは脂肪酸酸化を障害する可能性が示された。解熱剤の中でもアセトアミノフェンは安全なことが推測された。小児の感染時に一部の細菌毒素、解熱剤、あるいは高熱環境は急性脳症発症のリスクがある。これらの研究成果はより安全な小児診療に役立つ。

研究成果

• [雑誌論文] Clinical and genetic investigation of 17 Japanese patients with hyperekplexia (2015)
  • 著者名/発表者名: Mine J, Taketani T, Yoshida K, Yokochi F, Kobayashi J, Maruyama K, Nanishi E, Ono M, Yokoyama A, Arai H, Tamaura S, Suzuki Y, Otsubo S, Hayashi T, Kimura M, Kishi K, Yamaguchi S
  • 雑誌名: Developmental Medicine & Child Neurology 巻: 57 号: 4 ページ: 372-377
  • DOI: 10.1111/dmcn.12617
  • 査読あり
• [雑誌論文] Carnitine-acylcarnitine translocase deficiency: two neonatal cases with common splicing mutation and in vitro bezafibrate response (2015)
  • 著者名/発表者名: Vatanavicharn N, Yamada K, Aoyama Y, Fukao T, Densupsoontorn N, Jirapinyoe P, Sathienkijkanchai A, Yamaguchi S, Wasant P
  • 雑誌名: Brain and Development 巻: - 号: 7 ページ: 698-703
  • DOI: 10.1016/j.braindev.2014.10.005
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] ECHS1 mutations cause combined respiratory chain deficiency resulting in Leigh syndrome (2015)
  • 著者名/発表者名: Sakai C, Yamaguchi S, Sasaki M, Miyamoto Y, Matsushima Y, Goto YI
  • 雑誌名: Human Mutation 巻: 36 号: 2 ページ: 232-239
  • DOI: 10.1002/humu.22730
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acute fatty liver of pregnancy associated with fetal mitochondrial trifunctional protein deficiency (2015)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Minami S, Mitani A, Tanizaki Y, Booka M, Okutani T, Yamaguchi S, Ino K
  • 雑誌名: J Obstet Gynaecol Res 巻: 41 号: 5 ページ: 799-802
  • DOI: 10.1111/jog.12609
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional Analysis of iPSC-derived Myocytes from a Patient with Carnitine Palmitoyltransferase II Deficiency (2014)
  • 著者名/発表者名: Tetsuhiko Yasuno, Kenji Osafune, Hidetoshi Sakurai, Isao Asaka, Akihito Tanaka, Seiji Yamaguchi, Kenji Yamada, Hirofumi Hitomi, Sayaka Arai, Yuko Kurose, Yasuki Higaki, Mizuki Sudo, Souichi Ando, Hitoshi Nakashima, Takao Saito, Hidetoshi Kaneoka
  • 雑誌名: Biochem. and Biophys. Res. Commun 巻: (in press) 号: 2 ページ: 175-181
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.04.084
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 小児栄養性ビタミン欠乏症の有機酸分析による診断-ビタミンB1欠乏症、ビタミンB12欠乏症、ビオチン欠乏症 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山口清次, 長谷川有紀
  • 雑誌名: 小児科臨床 巻: 67 ページ: 787-794
• [雑誌論文] タンデムマスを導入した新生児マススクリーニングの社会的意義と課題 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 雑誌名: 公衆衛生情報 巻: 44 ページ: 5-8
• [雑誌論文] Expanded newborn mass screening with MS/MS and medium-chain acyl-CoA dehydrogenase (MCAD) deficiency in Japan (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S, Purevusren J, Kobayashi H, Hasegawa Y, Mushimoto Y, Yamada K, Takahashi T, Furui M, Taketani T, Fukuda S, Fukao T, Shigematsu Y
  • 雑誌名: 日本マス・スクリーニング学会誌 巻: 23 ページ: 270-276
  • 査読あり
• [雑誌論文] 新生児マススクリーニングで発見された軽症型プロピオン酸血症: 有機酸とアシルカルニチンの推移 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋知男, 山田健治, 虫本雄一, 小林弘典, 長谷川有紀, ジャミヤン・プレブスレン, 坂本修, 大浦敏博, 山口清次
  • 雑誌名: 日本マス･スクリーニング学会誌 巻: 23 ページ: 49-53
  • NAID: 10031183091
  • 査読あり
• [雑誌論文] 小児科領域におけるタンデムマスとGC/MSの臨床応用：最近の進歩 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 雑誌名: 臨床病理 巻: 61 ページ: 817-824
• [雑誌論文] Intracellular in vitro probe acylcarnitine assay for identifying deficiencies ofcarnitine transporter and carnitine palmitoyltransferase-1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Purevsuren J
  • 雑誌名: Anal Bioanal Chem 巻: 405 号: 4 ページ: 1345-1351
  • DOI: 10.1007/s00216-012-6532-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] 新生児スクリーニングの新時代 ; タンデムマス法の導入 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 雑誌名: 日本周産期・新生児医学会雑誌 巻: 48 ページ: 827-829
  • NAID: 10031154087
• [雑誌論文] Bezafibrate can be a new treatment option for mitochondrial fatty acid oxidation disorders : Evaluation by in vitro probe acylcarnitine assay (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S (1/12), Fukao T (11/12), et al
  • 雑誌名: Mol Genet Metab 巻: 107 号: 1-2 ページ: 87-91
  • DOI: 10.1016/j.ymgme.2012.07.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical and molecular aspects of Japanese children with medium chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency (2012)
  • 著者名/発表者名: Purevsuren J, Fukao T (8/9), Yamaguchi S (9/9), et al
  • 雑誌名: Mol Genet Metab 巻: 107 号: 1-2 ページ: 237-240
  • DOI: 10.1016/j.ymgme.2012.06.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] 新しい新生児マススクリーニング: タンデムマス法について (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 雑誌名: 臨床検査 巻: 56 ページ: 770-776
• [学会発表] Isolated sulfite oxidase deficiency: A rare metabolic disorder with neuroimaging mimicking perinatal asphyxia (2014)
  • 著者名/発表者名: Vatanavicharn N, Taketani T, Nabangchang C, Yamaguchi S
  • 学会等名: 第56回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: 江陽グランドホテル、仙台
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-15
• [学会発表] 解熱剤の脂肪酸β酸化に対する影響：サリチル酸、ジクロフェナクナトリウム、アセトアミノフェンの評価 (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋知男, 坊亮輔, 山田健治, 小林弘典, 長谷川有紀, 山口清次
  • 学会等名: 第56回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: 江陽グランドホテル、仙台
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-15
• [学会発表] Improvement of fatty acid oxidation capacity of cells from fatty acid oxidation defects at low temperature: evaluation by in vitro probe assay (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S, Liu L, Furui M, Yamada K, Taketani T, Shibata N, Kobayashi H, Hasegawa Y, Fukuda S
  • 学会等名: Annual Symposium of the Society for the Study of Inborn Errors of Metabolism
  • 発表場所: Congress Innsbruck, Innsbruck, Austria
  • 年月日: 2014-09-02 – 2014-09-05
• [学会発表] Organic Acidaemias and emergency treatments (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: 1st Asia Pacific Inborn Errors of Metabolism Course
  • 発表場所: TKP Garden City Shinagawa, Tokyo, Japan
• [学会発表] GC-MS for diagnosis of Organic Acidurias (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: International Conference on Inborn Errors of Metabolism 2013
  • 発表場所: PGIMER & Dr. RML Hospital, New Delhi, India
  • 招待講演
• [学会発表] Fatty acid oxidation defects (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: International Conference on Inborn Errors of Metabolism 2013
  • 発表場所: PGIMER & Dr. RML Hospital, New Delhi, India
  • 招待講演
• [学会発表] Medium-chain acyl-CoA dehydrogenase (MCAD) deficiency and newborn screening in Japan (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S, Purevsuren J, Hasegawa Y, Kobayashi H, Mushimoto Y, Yamada K, Takahashi T, Furui M, Fukao T, Shigematsu Y, Fukuda S
  • 学会等名: 2013 Joint Meeting of the Newborn Screening and Genetic Testing Symposium (NBS&GTS) and the International Society for Neonatal Screening (ISNS)
  • 発表場所: Atlanta Marriott Marquis, Atlanta, USA
• [学会発表] Diagnosis and treatment of mitochondrial fatty acid oxidation defects (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: The Second Forum of International Translational Medicine of Clinical Genetics in Beijing - Development and Application of Genetic Technology
  • 発表場所: International Conference Center, Beijing, China
  • 招待講演
• [学会発表] Responsiveness of bezafibrate for neonatal onset form of glutaric acidemia type II: comparison with milder form using in vitro probe assay (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamada K, Kobayashi H, Takahashi T, Hasegawa Y, Purevsuren J, Fukuda S, Ito M, Yamaguchi S
  • 学会等名: 12th International Congress of Inborn Errors of Metabolism
  • 発表場所: Palau de Congressos de Catalunya, Barcelona
• [学会発表] Two Japanese cases of adult onset myopathic form of gulutaric acidemia type II (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S, Yamada K, Kobayashi H, Takahashi T, Hasegawa Y, Purevsuren J, Ohkubo T, Watanabe M, Tsunemi T, Ishii A, Takuma H, Tamaoka A, Shigematsu Y, Fukuda S
  • 学会等名: 12th International Congress of Inborn Errors of Metabolism
  • 発表場所: Palau de Congressos de Catalunya, Barcelona
• [学会発表] A new treatment option for mitochondrial fatty acid oxidation defects: Bezafibrate, a PPAR agonist (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: 12th Asian Oceanian Congress on Child Neurology
  • 発表場所: InterContinental RIYADH, Riyadh, Saudi Arabia
• [学会発表] Beriberi (Vitamin B1 deficiency) of young children lurking in modern life: A new approach for biochemical detection (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: 2013 Joint Meeting of 13th Asian Pan-Pacific Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition and 40th Japanese Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition
  • 発表場所: National Center of Sciences Building, Tokyo, Japan
• [学会発表] Screening, diagnosis, and treatment of organic and fatty acid disorders (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: The 3rd Asian Congress for Inherited Metabolic Diseases (ACIMD), The 55th Annual Meeting of the Japanese Society for Inherited Metabolic Diseases (JSIMD)
  • 発表場所: Tokyo Bay Maihama Hotel Club Resort, Chiba
• [学会発表] Hypothermia improves oxidation ability in cultured fibroblasts with fatty acid β-oxidation disorders: Evaluation by vitro probe assay (2013)
  • 著者名/発表者名: Liu L, Yamada K, Takahashi T, Kobayashi H, Hasegawa Y, Yamaguchi S
  • 学会等名: The 3rd Asian Congress for Inherited Metabolic Diseases (ACIMD), The 55th Annual Meeting of the Japanese Society for Inherited Metabolic Diseases (JSIMD)
  • 発表場所: Tokyo Bay Maihama Hotel Club Resort, Chiba
• [学会発表] The firse case of HSD10 disease (2-Methyl-3-Hydroxybutyryl-coA dehydrogenase deficiency) from Asia (2013)
  • 著者名/発表者名: Fukao T, Akida K, Goto M, Kuwayama N, Morita M, Hori T, Aoyama Y, Venkatesan R, Wierenga R, Hasegawa Y, Shigematsu Y, Ohtake A, Moriyama Y, Usuda N, Hsegawa Y
  • 学会等名: The 3rd Asian Congress for Inherited Metabolic Diseases (ACIMD), The 55th Annual Meeting of the Japanese Society for Inherited Metabolic Diseases (JSIMD)
  • 発表場所: Tokyo Bay Maihama Hotel Club Resort, Chiba
• [学会発表] 突然死したカルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ (CPT2) 欠損症の9カ月男児例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 桑原優, 岡本典子, 城賀本敏弘, 元木崇裕, 寺岡いづみ, 中野威史, 林正俊, 小林弘典, 山口清次
  • 学会等名: 第40回日本マス・スクリーニング学会
  • 発表場所: 大阪市中央公会堂、大阪
• [学会発表] SIDS, ALTE様症状で発症し先天代謝異常症と判明した10例の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋知男, 山田健治, 小林弘典, 長谷川有紀, 山口清次
  • 学会等名: 第40回日本マス・スクリーニング学会
  • 発表場所: 大阪市中央公会堂、大阪
• [学会発表] マイクロサテライトマーカーによる個人識別を組み入れた先天代謝異常症の出生前診断 (2013)
  • 著者名/発表者名: 古居みどり, 竹谷健, 永瀬真弓, 長谷川有紀, 小林弘典, 山田健治, 山口清次
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会 第58回大会
  • 発表場所: 江陽グランドホテル、仙台
• [学会発表] サリチル酸のβ酸化に及ぼす影響: in vitro probe assay による評価 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋知男, 山田健治, 小林弘典, 長谷川有紀, 山口清次
  • 学会等名: 第38回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 神戸市産業振興センター、神戸
• [学会発表] 小児のカルニチン代謝と抗菌薬 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 学会等名: 第40回日本小児臨床薬理学会学術集会
  • 発表場所: 慶應義塾大学日吉キャンパス、横浜
  • 招待講演
• [学会発表] 新生児タンデムマス・スクリーニングでイソ吉草酸血症の診断マーカーが偽陽性を示した2例： シベレスタット投与例と母体への抗菌薬投与例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山田健治, 小林弘典, 長谷川有紀, 中村信, 立石浩, 山口清次
  • 学会等名: 第58回日本未熟児新生児学会
  • 発表場所: ANAｸﾗｳﾝﾌﾟﾗｻﾞﾎﾃﾙ金沢、他、金沢
• [学会発表] Current topics in diagnosis and treatment of mitochondrial fatty acid oxidation disorders (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: The 2nd Asian Congress for Inherited Metabolic Diseases & The 12th Asian-European Workshop on Inborn Errors of Metabolism & The 12th Korean Congress of Inherited Metabolic Disease, symposium
  • 発表場所: ロッテホテル、Seoul, Korea
• [学会発表] Clinical and molecular aspects of Japanese children with medium chain acyl-CoA dehydroge (MCAD) deficiency (2012)
  • 著者名/発表者名: Prevsuren J
  • 学会等名: The 2nd Asian Congress for Inherited Metabolic Diseases & The 12th Asian-European Workshop on Inborn Errors of Metabolism & The 12th Korean Congress of Inherited Metabolic Disease
  • 発表場所: ロッテホテル、Seoul, Korea
• [学会発表] Beneficial effect of bezafibrate on boy with the late-onset gluraric aciduria type 2 (2012)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi H
  • 学会等名: The 2nd Asian Congress for Inherited Metabolic Diseases & The 12th Asian-European Workshop on Inborn Errors of Metabolism & The 12th Korean Congress of Inherited Metabolic Disease
  • 発表場所: ロッテホテル、Seoul, Korea
• [学会発表] Intracellular acylcarniitine profiling using in vitro probe assay at various C0 concentrations selectively identifies CPT-1 deficiency and primary carnitine deficiency (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S
  • 学会等名: Society for the Study of Inborn Errors of Metabolism Annual Symposium 2012
  • 発表場所: ICC, Birminghan, UK
• [学会発表] Effect of proinflammatory cytokines on mitochondrial fatty acid oxidation in development of acute encephalopathy (2012)
  • 著者名/発表者名: Purevsuren J
  • 学会等名: Society for the Study of Inborn Errors of Metabolism Annual Symposium 2012
  • 発表場所: ICC, Birminghan, UK
• [学会発表] Application of in-vitro probe acylcarnitine assay using tandem mass spectrometry for the evaluation of mitochondrial fatty acid oxidation (2012)
  • 著者名/発表者名: Prevsuren J
  • 学会等名: 19th International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: 京都国際会議場、京都
• [学会発表] グルタル酸血症2型に対するベザフィブラートの有効性：in vitro probe assayの応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山田健治
  • 学会等名: 第115回日本小児科学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場、福岡
• [学会発表] セレウス菌食中毒による急性脳症はミトコンドリアβ酸化障害を介して起こる (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 学会等名: 第54回日本小児神経学会
  • 発表場所: ロイトン札幌、札幌
• [学会発表] 質量分析を応用した有機酸・脂肪酸代謝異常の診断と病態解析に関する研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 学会等名: 第37回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 愛知県産業労働センター、名古屋
  • 招待講演
• [学会発表] 新生児発症型グルタル酸血症2型に対するベザフィブラートの有効性の検討： In vitro probe acylcarnitine assasy の結果との関連性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山田健治
  • 学会等名: 第37回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 愛知県産業労働センター、名古屋
• [学会発表] 成人期に発症した「骨格筋型」グルタル酸尿症2型の2例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山田健治
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] ベザフィブラート内服と中心静脈高濃度糖輸液が有効であった幼児期発症ミトコンドリア三頭酵素欠損症の1例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 花川純子
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] ベザフィブラートにより骨格筋症状が改善した極長鎖アシルCoA脱水素酵素欠損症の1例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 八木麻理子
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] Metabolic autopsy を用いた突然死症例の検討 ～脂肪酸代謝異常症の観点から～ (2012)
  • 著者名/発表者名: 山本琢磨
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] Ornithine transcarbamylase (OTC) 欠損症に潜在する凝固異常 (2012)
  • 著者名/発表者名: 井原健二
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] 新生児期発症でGA2と診断され、生後5ヶ月よりBEZ投与を開始した二絨毛膜二羊膜双胎例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大塚博樹
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] アスピリンとβ酸化機能の関連性の検討:in vitro probe assay による評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高橋知男
  • 学会等名: 第54回日本先天代謝異常学会
  • 発表場所: じゅうろくプラザ、岐阜
• [学会発表] ピボキシル基を含む抗菌薬によりカルニチン欠乏症をきたした24例の臨床像 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小林弘典
  • 学会等名: 第64回中国四国小児科学会
  • 発表場所: 阿波観光ホテル、徳島
• [図書] 別冊日本臨床 新領域別症候群シリーズ No.29 神経症候群（第2版）Ⅲ -その他の神経疾患を含めて- / Ⅶ 先天代謝異常 /ミトコンドリア脂肪酸β酸化異常症 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 出版者: 日本臨床社
• [図書] 別冊日本臨床 新領域別症候群シリーズ No.29 神経症候群（第2版）Ⅲ -その他の神経疾患を含めて- / Ⅶ 先天代謝異常 / 有機酸代謝異常 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山口清次
  • 出版者: 日本臨床社
• [図書] タンデムマス・スクリーニングガイドブック (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口清次（編）
  • 総ページ数: 151
  • 出版者: 診断と治療社