エピジェネティクスリセットによる革新的ヒト肝発癌メカニズム解析

• 研究課題/領域番号: 24659593
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 外科学一般
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 関根 圭輔 横浜市立大学, 医学部, 助教 (00323569)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2012年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 癌 / エピジェネティクス / リプログラミング

研究概要

HCC細胞株に対し山中4因子を導入したところ、約2週間後にiPS細胞様のコロニーが形成された。形成されたコロニーを顕微鏡下で取得し、独立に培養し形態観察、遺伝子発現解析、免疫不全マウスへの移植を行った。未分化マーカーおよび肝細胞マーカーの発現はHCC細胞株に較べ、肝細胞マーカーであるHNF4の発現低下と未分化マーカーであるSox2の発現上昇が見られた。しかしながら、未分化マーカーの発現はiPS細胞と較べ低かった。免疫不全マウス(NOD/scid)の精巣へ移植しテラトーマ形成の有無を検証した。すると樹立したクローンからテラトーマの形成は見られなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Tropism of cancer stem cells to a specific distant organ (2014)
  • 著者名/発表者名: Okuda R, Sekine K, Hisamatsu D, Ueno Y, Takebe T, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: In Vivo 巻: 28(3) ページ: 361-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] The CD133+CD44+ Precancerous Subpopulation of Oval Cells is a Therapeutic Target for Hepatocellular (2014)
  • 著者名/発表者名: Zheng YW, Tsuchida T, Shimao T, Li B, Takebe T, Zhang RR, Sakurai Y, Ueno Y, Sekine K, Ishibashi N, Imajima M, Tanaka T, Taniguchi H
  • 雑誌名: Carcinoma Stem Cells Dev 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescent labeling and visualization of human induced pluripotent stem cells with the use of transcription activator-like effector nucleases. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Transplant Proc. 巻: 46 号: 4 ページ: 1205-1207
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2014.02.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ring1B Promotes Hepatic Stem/Progenitor Cell Expansion via Simultaneous Suppression of Cdkn1a and Cdkn2a. (2014)
  • 著者名/発表者名: Koike H, Ueno Y, Naito T, Shiina T, Nakata S, Ouchi R, Obana Y, Sekine K, Zheng YW, Takebe T, Isono K, Koseki H, Taniguchi H
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 印刷中 号: 1 ページ: 323-333
  • DOI: 10.1002/hep.27046
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Engineering of human hepatic tissue with functional vascular networks (2014)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Koike N, Sekine K, Fujiwara R, Amiya T, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: Organogenesis 巻: 10(2)(Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takanori Takebe*, Ran-Ran Zhang, Hiroyuki Koike, Masaki Kimura, Emi Yoshizawa, Masahiro Enomura, Keisuke Sekine, Hideki Taniguchi*(*: Correspondence)
  • 雑誌名: Nature Protocols 巻: 9(2) 号: 2 ページ: 396-409
  • DOI: 10.1038/nprot.2014.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] The evidence of sophisticatedly heterogeneous population of human umbilical vein endothelial cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Zheng YW, Nie YZ, Tsuchida T, Zhang RR, Aoki K, Sekine K, Ogawa M, Takebe T, Ueno Y, Sakakibara H, Hirahara F, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46 号: 4 ページ: 1251-3
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.11.077
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification of Proliferating Human Hepatic Cells from Human Induced Pluripotent Stem Cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Zhang RR, Takebe T, Sekine K, Koike H, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46(4) 号: 4 ページ: 1201-4
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.12.021
  • 査読あり
• [雑誌論文] The development of humanized liver with Rag1 knockout rats. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchida T, Zheng YW, Zhang RR, Takebe T, Ueno Y, Sekine K, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46 号: 4 ページ: 1191-3
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.12.026
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] High-resolution intravital imaging for monitoring the transplanted islets in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Takebe T, Enomura M, Koike N, Lee S, Nemeno JG, Sekine K, Lee JI, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Transplant Proc. 巻: 46 号: 4 ページ: 1166-1168
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.11.089
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tropism of cancer stem cells to a specific distant organ (2014)
  • 著者名/発表者名: Okuda R, Sekine K, Hisamatsu D, Ueno Y, Takebe T, Zheng YW, Taniguchi H.
  • 雑誌名: In Vivo 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] The CD133+CD44+ Precancerous Subpopulation of Oval Cells is a Therapeutic Target for Hepatocellular Carcinoma (2014)
  • 著者名/発表者名: Zheng YW, Tsuchida T, Shimao T, Li B, Takebe T, Zhang RR, Sakurai Y, Ueno Y, Sekine K, Ishibashi N, Imajima M, Tanaka T, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Stem Cells Dev. 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescent labeling and visualization of human induced pluripotent stem cells with the use of transcription activatore like effector nucleases (2014)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Transplant Proc. 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ring1B promotes hepatic stem/ progenitor cell expansion via simultaneous suppression of Cdkn1a and Cdkn2a. (2014)
  • 著者名/発表者名: Koike H, Ueno Y, Naito T, Shiina T, Nakata S, Ouchi R, Obana Y, Sekine K, Zheng YW,Takebe T, Isono KI, Koseki H, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Engineering of human hepatic tissue with functional vascular networks. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Koike N, Sekine K, Fujiwara R, Amiya T, Zheng YW, Taniguchi H.
  • 雑誌名: Organogenesis. 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takanori Takebe*, Keisuke Sekine, Masahiro Enomura, Hiroyuki Koike, Ran-Ran Zhang, Yasuharu Ueno, Yun-Wen Zheng, Naoto Koike, Shinsuke Aoyama, Yasuhisa Adachi, Hideki Taniguch*(*: Correspondence)
  • 雑誌名: Nature 巻: 499 号: 7459 ページ: 481-484
  • DOI: 10.1038/nature12271
  • NAID: 40020351046
  • 査読あり
• [雑誌論文] The generation of pancreatic β-cell spheroids in a simulated microgravity culture system. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka H
  • 雑誌名: Biomaterials 巻: 34 号: 23 ページ: 5785-5791
  • DOI: 10.1016/j.biomaterials.2013.04.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitamin D receptor in osteoblasts is a negative regulator of bone mass control (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Y, Yoshizawa T, Fukuda T, Shirode-Fukuda Y, Yu T, Sekine K, Sato T, Kawano H, Aihara K, Naka michi Y, Watanabe T, Shindo M, Inoue K, Inoue E, Tsuji N, Hoshino M, Karsenty G, Metzger D, Chambon P, Kato S, Imai Y.
  • 雑誌名: Endocrinology. 巻: 154 号: 3 ページ: 1008-20
  • DOI: 10.1210/en.2012-1542
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of Automated Culture System for Murine Induced Pluripotent Stem Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Koike H
  • 雑誌名: BMC Biotechnology 巻: 12 号: 1 ページ: 81-81
  • DOI: 10.1186/1472-6750-12-81
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of Stabilin-2 elevates circulating hyaluronic acid levels and prevents tumor metastasis (2012)
  • 著者名/発表者名: Hirose, Y., Saijou, E., Sugan,o Y., Takeshita, F., Nishimura, S., Nonaka, H., Chen, Y.R., Sekine, K., Kido, T., Nakamura, T., Kato, S., Kanke, T., Nakamura, K., Nagai, R., Ochiya, T., Miyajima, A.
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.USA 巻: 109 号: 11 ページ: 4263-4268
  • DOI: 10.1073/pnas.1117560109
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regenerative medicine approach as an alternative treatment to islet transplantation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) 号: 4 ページ: 1104-1106
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.03.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly efficient generation of definitive endoderm lineage from human induced pluripotent stem cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) 号: 4 ページ: 1127-1129
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.03.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Self-organization of human hepatic organoid by recapitulating organogenesis in vitro (2012)
  • 著者名/発表者名: Takebe T
  • 雑誌名: Transplant Pro 巻: 44(4) 号: 4 ページ: 1018-1020
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.02.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of functional human vascular network in vitro (2012)
  • 著者名/発表者名: Takebe T
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) 号: 4 ページ: 1130-1133
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.03.039
  • 査読あり
• [雑誌論文] Basics and applications of stem cells in the pancreas (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Taniguchi H
  • 雑誌名: J Hepatobiliary Pancreat Sci 巻: 19 号: 6 ページ: 594-599
  • DOI: 10.1007/s00534-012-0545-3
  • NAID: 10031126973
• [学会発表] 膵癌幹細胞の系譜解析に向けたin vitroアッセイ系の構築 (2014)
  • 著者名/発表者名: 久松大介、奥田諒、関根圭輔、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第13回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 膵癌幹細胞の系譜解析に向けたin vitroアッセイ系の構築 (2014)
  • 著者名/発表者名: 久松大介、奥田 諒、関根圭輔、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第13回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都府)
• [学会発表] Pdx1陽性細胞は高い腫瘍形成能とスフィア形成能を有する癌幹細胞である (2013)
  • 著者名/発表者名: 奥田諒、関根圭輔、孫略、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] 膵幹/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] ヒト膵癌幹細胞における治療抵抗性機構の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 星野小百合、関根圭輔、孫略、中田晋、寺崎哲也、森永総一郎、宮城洋平、遠藤格、横瀬智之、倉田昌直、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] Fluorescence visualizaiton of human induced pluripotent stem cells using transcription activator-like(TAL) effector nucleases (2013)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Zhang R, Taniguchi H
  • 学会等名: The 13th Congress of the Asian Society of Transplantation
  • 発表場所: Kyoto, Japan
• [学会発表] Targeted proteomic absolute quantification on transporters of human pancreatic cancer cells with gemcitabine-resistance (2013)
  • 著者名/発表者名: Ueno Y, Hoshino S, Tsuchida N, Nakata S, Uchida Y, Sekine K, Zheng YW, Kurata M, Morinaga S, Miyagi Y, Yokose T, Endo I, Terasaki T, Hirano H, Taniguchi H
  • 学会等名: HUPO 12th annual world congress
  • 発表場所: Yokohama, Japan
• [学会発表] Pdx1陽性細胞は高い腫瘍形成能とスフィア形成能を有する癌幹細胞である (2013)
  • 著者名/発表者名: 奥田諒、関根圭輔、孫略、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
• [学会発表] 膵幹/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
• [学会発表] ヒト膵癌幹細胞における治療抵抗性機構の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 星野小百合、関根圭輔、孫略、中田晋、寺崎哲也、森永総一郎、宮城洋平、遠藤格、横瀬智之、倉田昌直、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
• [学会発表] Targeted proteomic absolute quantification on transporters of human pancreatic cancer cells with gemcitabine-resistance. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ueno Y, Hoshino S, Tsuchida N, Nakata S, Uchida Y, Sekine K, Zheng YW, Kurata M, Morinaga S, Miyagi Y, Yokose T, Endo I, Terasaki T, Hirano H, Taniguchi H
  • 学会等名: HUPO 12th annual world congress.
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
• [学会発表] 膵癌幹細胞のin vitroアッセイ系の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 奥田諒、孫略、関根圭輔、松井智栄美、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 膵癌モデルマウスを用いた膵癌幹細胞の細胞系譜解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 孫略、奥田諒、関根圭輔、盛武敬、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] 膵肝/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] Identification of pancreatic stem/progenitor cells expressing PDX1 reside in the CD133 positive pancreatic duct (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Ishikawa M, Takebe T, Suzaki A, Kawashimo K, Matsui C, Taniguchi H
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 10^<th> annual meeting
  • 発表場所: Yokohama,Japan
• [学会発表] 膵癌モデルマウスを用いた膵癌幹細胞の細胞系譜解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: ロイトン札幌 (北海道)
• [学会発表] 膵肝/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 孫略、奥田諒、関根圭輔、盛武 敬、 坪井 康次、 谷口 英樹
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: ロイトン札幌 (北海道)
• [学会発表] 膵癌幹細胞のin vitroアッセイ系の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 奥田諒、孫略、関根圭輔、松井智栄美、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] Creation of vascularized human organ from induced pluripotent stem cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Sekine K, Enomura M, Suzuki Y, Koike H, Zhang R, Koike N, Ueno Y, Zheng Y, Taniguchi H
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 10th annual meeting.
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] Self-renewal versus differentiation as well as the liver repopulation capability of human hepatic stem cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Zheng Y, Li B, Zhang R, Kimura M, Tsuchida T, Takebe T, Ueno Y, Sekine K, Taniguchi H
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 10th annual meeting.
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] Identification of pancreatic stem/progenitor cells expressing PDX1 reside in the CD133 positive pancreatic duct. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Ishikawa M, Takebe T, Suzaki A, Kawashimo K, Matsui C, Taniguchi H
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 10th annual meeting.
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] 膵幹細胞を起点とした膵発癌プロセスの細胞系譜的解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、松井智栄美、孫略、長久紗耶佳、田中慎、武部貴則、谷口英樹
  • 学会等名: 第11回日本再生医療学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] 多能性幹細胞を用いた機能的なヒト臓器の創出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 武部貴則、関根圭輔、江野村允宏、小池博之、張冉冉、三橋優澄、上野康晴、鄭允文、谷口英樹
  • 学会等名: 第11回日本再生医療学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] 多能性幹細胞を用いた機能的なヒト臓器の創出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 武部貴則、関根圭輔、江野村允宏、小池博之、張冉冉、木村昌樹、魚返拓則、吉澤絵美、川又史佳、上野康晴、鄭允文、小池直人、谷口英樹
  • 学会等名: 第39回日本臓器保存生物医学会学術集会
  • 発表場所: コラッセふくしま(福島県)
• [学会発表] ヒト微小血管網を有する膵島様組織の創出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高橋禎暢、江野村允宏、武部貴則、関根圭輔、小池直人、田中寛康、谷口英樹
  • 学会等名: 第39回日本臓器保存生物医学会学術集会
  • 発表場所: コラッセふくしま(福島県)
• [学会発表] 膵幹細胞を起点とした膵発癌プロセスにおける膵癌幹細胞の細胞系譜的解析
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第22 回日本サイトメトリー学会
  • 発表場所: 千里ライフサイエンスセンター(大阪府)
  • 招待講演
• [学会発表] ヒトiPSを用いたファーマコセロミクス基盤技術の開発
  • 著者名/発表者名: 谷口英樹、武部貴則、関根圭輔、青山晋輔、安達弥永
  • 学会等名: 第127回日本薬理学会関東部会シンポジウム
  • 発表場所: 東京国際フォーラム(東京都)
  • 招待講演