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生きた細胞内でのオートファジー発光定量法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 24710259
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 ケミカルバイオロジー
研究機関東京大学

研究代表者

服部 満  東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 研究員 (20589858)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2012年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
キーワードルシフェラーゼ / オートファジー / 発光
研究概要

細胞中のオートファジーを, 生きた細胞で検出するための発光検出系を開発した.発光タンパク質ルシフェラーゼを2断片に分割し, ルシフェラーゼ再構成を利用して, オートファジーの際に形成される小胞「オートファゴソーム」の構成成分にルシフェラーゼ断片を融合させる形でプローブを作製した.プローブをヒト培養細胞に導入したのち, 血清およびアミノ酸を除いた培地に置き換えてオートファジーを誘導した. 結果, 種々のプローブペアは発光を生じた. さらには異なるルシフェラーゼペアを導入する事で, より発光強度の強いオートファジー検出プローブの作製に成功した.

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (30件)

すべて 2014 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (22件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Bioluminescent Probes to Analyze Ligand-lnduced Phosphatidylinositol3,4,5-Trisphosphate Production with Split Luciferase Complementation2013

    • 著者名/発表者名
      L Yang, Y Nasu, M Hattori, H Yoshimura, A Kanno and T Ozawa
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: 85 号: 23 ページ: 11352-11359

    • DOI

      10.1021/ac402278f

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] ROS stress resets circadian clocks to coordinate pro-survival signals.2013

    • 著者名/発表者名
      T. Tamaru, M. Hattori, Y. Ninomiya, G. Kawamura, G. Varbs, K. Honda, D. P. Mishra, B. Wang, I. Benjamin, P. Sassone-Corsi, T. Ozawa and K. Takamatsu
    • 雑誌名

      PLaS ONE

      巻: 8 号: 12 ページ: e82006-e82006

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0082006

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sustained Accurate Recording of Intracellular Acidification in Living Tissues with a Photo- controllable Bioluminescent Protein Proc2013

    • 著者名/発表者名
      Hattori, M., Haga, S., Takakura, H., Ozaki, M. and Ozawa, T
    • 雑誌名

      Nat. Acad. Sci. USA

      巻: 110 ページ: 9332-9337

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Analysis of temporal patterns of GPCR-β-arrestin interactions using split luciferase-fragment complementation.2013

    • 著者名/発表者名
      M. Hattori, M. Tanaka, H. Takakura, K, Aoki, K. Miura, T. Anzai and T. Ozawa
    • 雑誌名

      Mol. Biosystems

      巻: 9 号: 5 ページ: 957-964

    • DOI

      10.1039/c2mb25443c

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sustained accurate recording of intracellular acidification in living tissues with a photo-controllable bioluminescent protein2013

    • 著者名/発表者名
      M. Hattori. S. Haga, H. Takakura, M. Ozaki and T. Ozawa
    • 雑誌名

      Proc. Natl. Acad. Sci. USA

      巻: 110 号: 23 ページ: 9332-9337

    • DOI

      10.1073/pnas.1304056110

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Visualization and Quantitative Analysis of G Protein-Coupled Receptor-β-Arrestin Interaction in Single Cells and Specific Organs of Living Mice Using Split Luciferase Complementation2012

    • 著者名/発表者名
      H. Takakura, M. Hattori, M. Takeuchi and T. Ozawa
    • 雑誌名

      ACS Chem. Biol

      巻: 7 号: 5 ページ: 901-910

    • DOI

      10.1021/cb200360z

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Bioluminescence analysis of relationship between the class of GPCR and temporal pattern of GPCR–b- arrestin interaction2014

    • 著者名/発表者名
      服部満, 田中みほ, 高倉栄男, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本化学会第94春季年会
    • 発表場所
      名古屋大学東山キャンパス(愛知県)
    • 年月日
      2014-03-28
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 高松研時計リセットシグナルによるROSストレス応答系の制御2013

    • 著者名/発表者名
      田丸輝也, 服部満, 二宮康晴, 河村玄気, 小澤岳昌
    • 学会等名
      第20回日本時間生物学会学術大会
    • 発表場所
      近畿大学東大阪キャンパス(大阪府)
    • 年月日
      2013-11-09
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 生きた細胞内における内在性テロメアRNAの一分子動態解析2013

    • 著者名/発表者名
      山田俊理, 吉村英哲, 服部満, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本生物物理学会第51回年会
    • 発表場所
      国立京都国際会館(京都府)
    • 年月日
      2013-10-28
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 光応答性ルシフェラーゼによる生きた組織下でのpH時間変化モニタリング法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      服部満, 芳賀早苗, 高倉栄男, 尾崎倫孝, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本分析化学会第62年会
    • 発表場所
      畿大学東大阪キャンパス(大阪府)
    • 年月日
      2013-09-12
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 受容体タンパク質DCCの光制御法の開発とその神経軸索誘導への応用2013

    • 著者名/発表者名
      遠藤瑞己, 服部満, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本化学会第93回春季年会
    • 発表場所
      立命館大学びわこ・くさつキャンパス(滋賀県)
    • 年月日
      2013-03-25
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 緑色蛍光タンパク質を利用した生細胞内テロメアRNA可視化法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      山田俊理, 吉村英哲, 服部満, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本化学会第93回春季年会
    • 発表場所
      立命館大学びわこ・くさつキャンパス(滋賀県)
    • 年月日
      2013-03-23
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 概日リン酸化オシレータによる翻訳後修飾系の統合制御2012

    • 著者名/発表者名
      田丸輝也, 服部満, 小澤岳昌, 高松研
    • 学会等名
      第19回日本時間生物学会学術大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場、マリンメッセ福岡(福岡県)
    • 年月日
      2012-12-14
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] ヒートショック応答系による概日リズムのリセット2012

    • 著者名/発表者名
      田丸輝也, 服部満, 小澤岳昌, 高松研
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      北海道大学学術交流会館(北海道)
    • 年月日
      2012-09-15
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Development of light- induced protein- protein homodimerization systemto control axon guidance with blue light RSC Tokyo International Conference2012

    • 著者名/発表者名
      遠藤瑞己, 服部満, 小澤岳昌
    • 学会等名
      JASIS Conference
    • 発表場所
      幕張メッセ(千葉県)
    • 年月日
      2012-09-06
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Newimaging systemfor monitoring an acidic environment in living tissue by photo- reactive luciferase RSC Tokyo International Conference2012

    • 著者名/発表者名
      服部満, 芳賀早苗, 高倉栄男, 尾崎倫孝, 小澤岳昌
    • 学会等名
      JASIS Conference
    • 発表場所
      幕張メッセ(千葉県)
    • 年月日
      2012-09-06
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] 光応答性ルシフェラーゼによる生きた組織下でのpH時間変化モニタリング法の開発

    • 著者名/発表者名
      服部満, 芳賀早苗, 高倉栄男, 尾崎倫孝, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本分析化学会第62年会
    • 発表場所
      近畿大学東大阪キャンパス(大阪府)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 神経軸索誘導タンパク質の光による活性制御法の開発

    • 著者名/発表者名
      遠藤瑞己, 服部満, 小澤岳昌
    • 学会等名
      第3回CSJ化学フェスタ2013
    • 発表場所
      タワーホール船堀(東京都)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 時計リセットシグナルによるROSストレス応答系の制御

    • 著者名/発表者名
      田丸輝也, 服部満, 二宮康晴, 河村玄気, 小澤岳昌, 高松研
    • 学会等名
      第20回日本時間生物学会学術大会
    • 発表場所
      近畿大学東大阪キャンパス (大阪府)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 生きた細胞内における内在性テロメアRNAの一分子動態解析

    • 著者名/発表者名
      山田俊理・吉村英哲・服部満・小澤岳昌
    • 学会等名
      日本生物物理学会第51回年会
    • 発表場所
      国立京都国際会館(京都府)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Bioluminescence analysis of relationship between the class of GPCR and temporal pattern of GPCR–b-arrestin interaction

    • 著者名/発表者名
      服部満, 田中みほ, 高倉栄男, 小澤岳昌
    • 学会等名
      日本化学会第94春季年会
    • 発表場所
      名古屋大学 東山キャンパス (愛知県)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] New imaging system for monitoring an acidic environment in living tissue by photo-reactive luciferase

    • 著者名/発表者名
      服部満・芳賀早苗・高倉栄男・尾崎倫孝・小澤岳昌
    • 学会等名
      RSC Tokyo International Conference, JASIS Conference
    • 発表場所
      幕張メッセ (千葉県)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] Development of light-induced protein-protein homodimerization system to control axon guidance with blue light

    • 著者名/発表者名
      遠藤瑞己・服部満・小澤岳昌
    • 学会等名
      RSC Tokyo International Conference, JASIS Conference
    • 発表場所
      幕張メッセ (千葉県)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ヒートショック応答系による概日リズムのリセット

    • 著者名/発表者名
      田丸輝也・服部満・小澤岳昌・高松研
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      北海道大学学術交流会館 (北海道)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 生細胞内SUMO化タンパク質の網羅的解析法

    • 著者名/発表者名
      小宮麻希・比留間大祐・服部満・小澤岳昌
    • 学会等名
      第2回CSJ化学フェスタ2012
    • 発表場所
      東京工業大学 大岡山キャンパス(東京都)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 概日リン酸化オシレータによる翻訳後修飾系の統合制御

    • 著者名/発表者名
      田丸輝也・服部満・小澤岳昌・高松研
    • 学会等名
      第19回日本時間生物学会学術大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場、マリンメッセ福岡 (福岡県)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 緑色蛍光タンパク質を利用した生細胞内テロメアRNA可視化法の開発

    • 著者名/発表者名
      山田俊理・吉村英哲・服部満・小澤岳昌
    • 学会等名
      日本化学会第93回春季年会
    • 発表場所
      立命館大学 びわこ・くさつキャンパス(滋賀県)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 受容体タンパク質DCC の光制御法の開発とその神経軸索誘導への応用

    • 著者名/発表者名
      遠藤瑞己・服部満・小澤岳昌
    • 学会等名
      日本化学会第93回春季年会
    • 発表場所
      立命館大学 びわこ・くさつキャンパス(滋賀県)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [図書] Clinic Neuroscience 32 (2)2014

    • 著者名/発表者名
      服部満, 田中みほ, 小澤岳昌
    • 出版者
      中外医学社
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [図書] Clinical Neuroscience 32(2), p128-129, GPCRに作用する化合物のスクリーニング2014

    • 著者名/発表者名
      服部満, 田中みほ, 小澤岳昌
    • 総ページ数
      2
    • 出版者
      中外医学社
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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