超低コストかつ高感度な診断用抗体アレイチップ製造技術の開発

• 研究課題/領域番号: 24760649
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 京都工芸繊維大学
• 研究代表者: 熊田 陽一 京都工芸繊維大学, 工芸科学研究科, 准教授 (70452373)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2013年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2012年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: PMMA-tag / 単鎖抗体 / 配向固定 / マイクロアレイ / 固定化 / イムノアッセイ

研究概要

本研究では、scFvのはいスループット生産技術、固相リフォールディング技術とDNAアレイチップ製造に定評のある名のスポッティング技術を融合し、低コストかつ高感度な診断用抗体アレイチップの開発を行た。その結果、PMMA-tagのscFvに対する広い汎用性が明らかになり、PMMA基板上にscFvを高密度・高配向・高活性に固定化した抗体チップの製造技術を確立することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Immobilization and functional reconstitution of antibody Fab fragment by solid-phase refolding (2014)
  • 著者名/発表者名: Y. Kumada, K. Hamasaki, A. Nakagawa, E. Sasaki, T. Shirai, M. Okumura, M. Inoue, M. Kishimoto
  • 雑誌名: Journal of Immunological Methods
• [雑誌論文] Identification and characterization of peptide fragments for the direct and site-specific immobilization of functional proteins onto the surface of silicon nitride (2014)
  • 著者名/発表者名: Y. Kumada, T. Ootsuka, M. Asada, S. Yoshizuka, M. Chiyama, M. Sakane, F. MD Hasan, K. Sawada, K. Okumura, M. Kishimoto
  • 雑誌名: Journal of Biotechnology 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immobilization and functional reconstitution of antibody Fab fragment by solid-phase refolding (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoichi Kumada, Kyoko Hamasaki, Aya Nakagawa, Eiju Sasaki, Tatsinori Shirai, Masahiro Okumura, Manami Inoue, Michimasa Kishimoto
  • 雑誌名: Journal of Immunological Methods 巻: 400 - 401 ページ: 70-77
  • DOI: 10.1016/j.jim.2013.10.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification and characterization of peptide fragments for the direct and site-specific immobilization of functional proteins onto the surface of silicon nitride
  • 著者名/発表者名: Y. Kumada, T. Ootsuka, M. Asada, S. Yoshizuka, M. Chiyama, M. Sakane, F. MD Hasan, K. Sawada, K. Okumura, M. Kishimoto
  • 雑誌名: Journal of Biotechnology 巻: (in press)
• [図書] 新生物化学工学 (2013)
  • 著者名/発表者名: 岸本通雅、堀内淳一、藤原伸介、熊田陽一
  • 総ページ数: 198
  • 出版者: 三共出版
• [産業財産権] 抗体のリフォールディング方法、リフォールディングされた抗体の製造方法、リフォールディングされた抗体、及びこれらの利用 (2013)
  • 発明者名: 熊田陽一、岸本通雅、石川泰行、藤原勇佐
  • 権利者名: 京都工芸繊維大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2013-027862
  • 出願年月日: 2013-02-15