分子量１０億にも及ぶクロレラウイルスのＸ線結晶構造解析

• 研究課題/領域番号: 24770097
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 東浦 彰史 大阪大学, たんぱく質研究所, 助教 (90598129)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2014年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2013年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2012年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 構造生物学 / X線結晶構造解析 / Ｘ線結晶解析

研究成果の概要

クロレラウイルスは分子量が10億にも及ぶ直径約2000Åの巨大な正二十面体対称を有した球状ウイルスである。カプシド表面に特徴的な突起構造やその内側に脂質二重膜を保持し、その内部に約400種類のもの蛋白質がコードされたゲノムを有している。このクロレラウイルスの立体構造をＸ線結晶構造解析の手法を用い原子分解能で明らかにすることを目指した。結晶構造解析のための大量調製系を確立し、結晶化スクリーニングにより微結晶を得るに至った。位相差クライオ電子顕微鏡により外殻表面のファイバー状構造体を明瞭に観察することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] High-resolution X-ray crystal structure of bovine H-protein using the high-pressure cryocooling method (2013)
  • 著者名/発表者名: Akifumi Higashiura, Kazunori Ohta, Mika Masaki, Masaru Sato, Koji Inaka, Hiroaki Tanaka and Atsushi Nakagawa
  • 雑誌名: Journal of Synchrotron Radiation 巻: 20 号: 6 ページ: 989-993
  • DOI: 10.1107/s090904951302373x
  • 査読あり
• [学会発表] SPring-8 BL44XU, Beamline Designed for a Structure Analysis of Large Biological Macromolecular Assemblies (2015)
  • 著者名/発表者名: Akifumi Higashiura, Eiki Yamashita, Masato Yoshimura, Kazuya Hasegawa, Yukito Furukawa, Takashi Kumasaka, Go Ueno, Masaki Yamamoto, Tomitake Tsukihara, Atsushi Nakagawa
  • 学会等名: The 12th International Conference on Synchrotron Radiation Instrumentation
  • 発表場所: Marriott Marquis in Times Square, New York City
  • 年月日: 2015-07-06 – 2015-07-10
• [学会発表] SPring-8生体超分子複合体構造解析ビームライン（大阪大学蛋白質研究所）BL44XUの現状 (2015)
  • 著者名/発表者名: 山下栄樹、東浦彰史、吉村政人、長谷川和也、熊坂崇、古川行人、大端通、上野剛、山本雅貴、吉川信也、月原冨武、中川敦史
  • 学会等名: 第２８回日本放射光学会年かい放射光科学合同シンポジウム
  • 発表場所: 立命館大学びわこ くさつキャンパス
  • 年月日: 2015-01-10 – 2015-01-12
• [学会発表] 位相差クライオ電子顕微鏡によるクロレラウイルスの観察 (2014)
  • 著者名/発表者名: 東浦彰史、宮崎直幸、村田和義、山本旭麻、原由美子、村上満理奈、中川敦史、山田隆
  • 学会等名: 生理研研究会「電子顕微鏡機能イメージングの医学・生物学への応用」テーマ：「次世代の生物電顕を考える」
  • 発表場所: 生理学研究所
  • 年月日: 2014-11-12 – 2014-11-13