| 研究課題/領域番号 |
24780105
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 研究分野 |
応用生物化学
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
米田 一成 東海大学, 農学部, 講師 (00469397)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2013年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2012年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
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| キーワード | 酵素化学 / L-スレオニン酸脱水素酵素 / NAD / トリパノソーマ / クローニング / 結晶化 / 脱水素酵素 / L-スレオニン |
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| 研究概要 |
病原性寄生原虫であるトリパノソーマのゲノム情報からL-スレオニン脱水素酵素(ThrDH)遺伝子を見出し、オーバーラップオリゴヌクレオチド用いて遺伝子合成を行った。合成したThrDH遺伝子をpCold TFベクターに挿入し、大腸菌を用いてIPTGによる遺伝子の発現を行い、発現産物の精製、及び機能解析を行った。その結果、SDS-PAGEで予測される分子量である81 KDaにバンドの検出に成功した。さらに、酵素活性の確認を行った結果、わずかではあるが、NAD依存性ThrDH活性の検出に成功した。
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