生胚内分子動態解析に基づくクローン胚発生条件の検索

• 研究課題/領域番号: 24780277
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 水谷 英二 山梨大学, 総合研究部, 助教 (80443034)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: クローン / ライブセルイメージング / 初期胚発生 / 核移植 / 成体脳神経細胞 / イメージング / 胚発生

研究成果の概要

個体発生率が低いクローン胚および凍結乾燥精子顕微授精胚をライブセルイメージングに解析したところ、大部分で染色体分配異常がみられ、クローン胚ではドナー核注入後の時間経過により微小前核を形成し、これが染色体分配異常の原因であることが示唆された。さらにクローンになりやすい細胞を探したところ、海馬ＣＡ１領域に抑制的ヒストン修飾が低い細胞が存在することを見出した。この細胞を用いてクローンマウス作製を試みたところ、１０％と高い効率でクローン作製が可能なことが明らかとなり、世界で初めて成体マウス脳神経細胞からクローンマウスを作製することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of cloned mice from adult neurons by direct nuclear transfer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizutani E, Oikawa M, Kassai H, Inoue K, Shiura H, Hirasawa R, Kamimura S, Matoba S, Ogonuki N, Nagatomo H, Abe K, Wakayama T, Aiba A, Ogura A.
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 92(3) 81 ページ: 1-11
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] RNA sequencing-based identification of aberrant imprinting in cloned mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Okae H, Matoba S, Nagashima T, Mizutani E, Inoue K, Ogonuki N, Chiba H, Funayama R, Tanaka S, Yaegashi N, Nakayama K, Sasaki H, Ogura A, Arima T.
  • 雑誌名: Hum Mol Genet. 巻: 23 号: 4 ページ: 992-1001
  • DOI: 10.1093/hmg/ddt495
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful Serial Recloning in the Mouse over Multiple Generations. (2013)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S, Kohda T, Obokata H, Tokoro M, Li C, Terashita Y, Mizutani E, Nguyen VT, Kishigami S, Ishino F, Wakayama T.
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 巻: 12 号: 3 ページ: 293-297
  • DOI: 10.1016/j.stem.2013.01.005
  • 査読あり
• [学会発表] マウスクローン胚のライブセルイメージングと単一胚移植による解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 水谷英二、山縣一夫、若山照彦
  • 学会等名: 第54回日本卵子学会
  • 発表場所: 学術総合センター (東京都千代田区）
• [学会発表] Live-cell imaging analysis of mouse oocytes injected with freeze-dried spermatozoa. (2013)
  • 著者名/発表者名: 水谷英二、若山清香、岸田佳奈、若山照彦
  • 学会等名: 第10回Annual Conference of Asian Reproductive Biotechnology Society
  • 発表場所: ベトナム ムイネ シーリンクビーチリゾート
• [学会発表] 凍結乾燥精子で受精したマウス初期胚のライブセルイメージング解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 水谷英二、若山清香、岸田佳奈、若山照彦
  • 学会等名: 第106回日本繁殖生物学会大会
  • 発表場所: 東京農工大学農学部府中キャンパス
• [学会発表] マウスクローン胚のライブセルイメージングと単一胚移植による解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 水谷英二、山縣一夫、若山照彦
  • 学会等名: 題54回 日本卵子学会
  • 発表場所: 東京都 学術総合センター
• [学会発表] GENERATION OF CLONED MICE BY DIRECT NUCLEAR TRANSFER FROM ADULT DIFFERENTIATED NEURAL CELLS (2012)
  • 著者名/発表者名: Mizutani E., Kassai H., Wakayama T., Aiba A., Ogura A.
  • 学会等名: 9th Asian Reproductive Biotechnology Society
  • 発表場所: フィリピン マニラ
• [学会発表] 成体マウス脳神経細胞からのクローンマウス作出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 水谷英二、葛西秀俊、若山照彦、饗場篤、小倉淳郎
  • 学会等名: 第105回 日本繁殖生物学会
  • 発表場所: つくば市 筑波大学
• [備考] 山梨大学発生工学研究センターHP
  • URL: http://www.ccn.yamanashi.ac.jp/~twakayama/LSHP/index.html
• [備考] 山梨大学ライフサイエンス実験施設ＨＰ
  • URL: http://www.ccn.yamanashi.ac.jp/~twakayama/LSHP/index.html
• [備考] クローンのクローンからまたクローン
  • URL: http://www.cdb.riken.jp/jp/04_news/articles/13/130310_recloning.html