輸血製剤への応用を目指したネコ多能性幹細胞の培養および血液分化技術の開発

• 研究課題/領域番号: 24780311
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 臨床獣医学
• 研究機関: 大阪府立大学
• 研究代表者: 鳩谷 晋吾 大阪府立大学, 生命環境科学研究科(系), 准教授 (40453138)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2012年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: iPS細胞 / ES細胞 / ネコ / 多能性幹細胞 / 再生医療 / 獣医学 / 血液分化 / 顕微授精

研究成果の概要

ES細胞とiPS細胞をネコで作製し、それを血液細胞へ分化させることを目的として、以下の成果を得た。
①ピエゾマイクロマニピュレーターを用いた顕微授精でネコ胚盤胞期胚を作製し、ネコES細胞コロニーの作製に成功した。②ネコLIFを大腸菌で作製し、その機能を確認した。③ネコ胎子線維芽細胞にレトロウイルスを用いてOct3/4、Sox2、Klf4およびc-Mycの4 遺伝子を導入し、ネコiPS様細胞株の樹立に成功した。④ネコ体細胞にセンダイウイルスを用いて初期化遺伝子を導入し、ネコiPS様細胞株コロニーの作製に成功した。⑤ネコiPS様細胞からマクロファージと赤芽球系の血液細胞へ分化させることができた。

研究成果

• [雑誌論文] Effect of ovarian hormones on maturation of dendritic cells from peripheral blood monocytes in dogs. (2015)
  • 著者名/発表者名: Wijewardana V, Sugiura K, Wijesekera DP, Hatoya S, Nishimura T, Kanegi R, Ushigusa T, Inaba T.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 巻: -
  • NAID: 130005089954
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effective enhancement of anti-tumor immune responses by transfection of IFNγ gene into tumor using a new type synthetic vector. (2014)
  • 著者名/発表者名: Wijesekera, D.P.H., Sugiura, K., Yuba, E., Ueda, K., Wijewardana, V., Kanegi, R., Nishimura, T., Ushigusa, T., Hatoya, S., Kono, K., Inaba, T.
  • 雑誌名: Vet. Immunol. Immunopathol. 巻: 162 号: 1-2 ページ: 59-64
  • DOI: 10.1016/j.vetimm.2014.08.016
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Profiling of serum metabolites in canine lymphoma using gas chromatography mass spectrometry. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tamai R, Furuya M, Hatoya S, Akiyoshi H, Yamamoto R, Komori Y, Yokoi S, Tani K, Hirano Y, Komori M, Takenaka S.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 巻: 76 ページ: 1513-1518
  • NAID: 130004677727
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of functional platelets from canine induced pluripotent stem cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, T., Hatoya, S., Kanegi, R., Sugiura, K., Wijewardana, V., Kuwamura, M., Tanaka, M., Yamate, J., Izawa, T., Takahashi, M., Kawate, N., Tamada, H., Imai, H., Inaba, T.
  • 雑誌名: Stem Cells Dev. 巻: 22 号: 14 ページ: 2026-2035
  • DOI: 10.1089/scd.2012.0701
  • 査読あり
• [学会発表] 成犬体細胞からのiPS細胞樹立の試み (2014)
  • 著者名/発表者名: 三埜晃佑、西村俊哉、鳩谷晋吾、杉浦喜久弥、今井 裕、高橋正弘、川手憲俊、玉田尋通、稲葉俊夫
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道・札幌市）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] センダイウイルスベクター（SeVdp）を用いたネコおよびイヌiPS細胞の作製 (2014)
  • 著者名/発表者名: 淀江京平、鳩谷晋吾、金城凌二、杉浦喜久弥、大高真奈美、西村健、中西真人、高橋正弘、川手憲俊、玉田尋通、稲葉俊夫
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道・札幌市）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] イヌ・ネコiPS細胞の樹立と将来の展望 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鳩谷晋吾
  • 学会等名: 平成25年度日本獣医師会獣医学術学会年次大会
  • 発表場所: 千葉
  • 招待講演
• [学会発表] イヌ・ネコiPS細胞の作製の試みと今後の展望 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鳩谷晋吾
  • 学会等名: 第9回 日本獣医再生医療学会
  • 発表場所: 大阪
  • 招待講演
• [学会発表] Generation of induced pluripotent stem cells and production of leukemia inhibitory factor (LIF) in domestic cats (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanegi R, Hatoya S, Takenaka S, Nishimura T, Wijewardana V, Sugiura K, Takahashi M, Kawate N, Tamada H, Inaba T
  • 学会等名: The International Society for Stem Cell Research (ISSCR) 11th Annual Meeting
  • 発表場所: Boston, USA.
• [学会発表] Generation of functional platelets from canine induced pluripotent stem cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishimura T, Hatoya S, Kanegi R, Sugiura K, Wijewardana V, Kuwamura M, Tanaka M, Takahashi M, Kawate N, Tamada H, Imai H, Inaba T
  • 学会等名: The International Society for Stem Cell Research (ISSCR) 11th Annual Meeting
  • 発表場所: Boston, USA.
• [学会発表] ネコの体外受精法の改善に向けた酸素濃度および顕微授精についての検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤木花奈、鳩谷晋吾、杉浦喜久弥、高橋正弘、川手憲俊、玉田尋通、稲葉俊夫
  • 学会等名: 第159回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] 獣医療における再生医療～iPS細胞の樹立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鳩谷晋吾
  • 学会等名: 内科学アカデミー
  • 発表場所: 横浜
  • 招待講演
• [学会発表] Generation of induced pluripotent stem cells and production of leukemia inhibitory factor (LIF) in domestic cats. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanegi, R., Hatoya, S., Takenaka, S., Nishimura, T., Wijewardana, V., Sugiura, K., Takahashi, M., Kawate, N., Tamada, H., Inaba, T
  • 学会等名: The International Society for Stem Cell Research (ISSCR) 11th Annual Meeting
  • 発表場所: ボストン
• [学会発表] Generation of functional platelets from canine induced pluripotent stem cells , International Society for Stem Cell Research (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, T., Hatoya, S., Kanegi, R., Sugiura, K., Wijewardana, V., Kuwamura, M., Tanaka, M., Takahashi, M., Kawate, N., Tamada, H., Imai, H., Inaba, T
  • 学会等名: The International Society for Stem Cell Research (ISSCR) 11th Annual Meeting
  • 発表場所: ボストン
• [学会発表] ネコiPS細胞株樹立と多能性維持タンパク質ネコLIFの作製 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金城綾二、鳩谷晋吾、杉浦喜久弥、竹中重雄、玉田尋通、川手憲俊、高橋正弘、稲葉俊夫
  • 学会等名: 日本獣医学会
  • 発表場所: 岩手
• [学会発表] イヌiPS細胞の作製と血小板への分化誘導 (2012)
  • 著者名/発表者名: 西村俊哉、鳩谷晋吾、杉浦 喜久弥、今井 裕、玉田尋通、川手憲俊、高橋正弘、稲葉 俊夫
  • 学会等名: 日本獣医学会
  • 発表場所: 岩手
• [備考] http://www.vet.osakafu-u.ac.jp/cell/cell.htm
• [備考] 研究室ホームページ
  • URL: http://www.vet.osakafu-u.ac.jp/cell/cell.html
• [備考] 細胞病態学教室ホームページ
  • URL: http://www.vet.osakafu-u.ac.jp/cell/cell.htm