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蛍光タンパク質プローブを用いた尿酸輸送評価法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 24790051
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 物理系薬学
研究機関東京薬科大学

研究代表者

中村 真希子  東京薬科大学, 薬学部, 助教 (80447557)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
2014年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2013年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
キーワード尿酸 / 尿酸トランスポーター / 蛍光タンパク質 / 腎臓 / 高尿酸血症 / トランスポーター / ウリカーゼ / 蛍光 / 蛍光プローブ
研究成果の概要

腎臓に存在する尿酸トランスポーターは、血漿尿酸値を規定し、高尿酸血症の治療標的となる。本研究では、簡便な尿酸トランスポーター評価法開発を目的として、尿酸代謝酵素uricaseと、尿酸代謝の際の副産物である過酸化水素に応じて蛍光を変化させるHyPerとの融合タンパク質を開発した。腎由来細胞に尿酸トランスポーターおよび融合タンパク質を発現させ、尿酸を添加すると、添加量に応じて蛍光強度比が上昇した。さらに尿酸と共に尿酸トランスポーター阻害薬ベンズブロマロンを添加すると、蛍光強度比は有意に低下した。よって、本手法によって尿酸トランスポーターを介した尿酸輸送の蛍光検出が可能であることが示された。

報告書

(4件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (49件)

すべて 2015 2014 2013 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (9件) (うち査読あり 9件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (40件)

  • [雑誌論文] Effects of irbesartan on serum uric acid levels in patients with hypertension and diabetes.2014

    • 著者名/発表者名
      Makiko Nakamura, Nobuo Sasai, Ichiro Hisatome, Kimiyoshi Ichida
    • 雑誌名

      Clinical Pharmacology: Advances and Applications

      巻: 6 ページ: 79-86

    • DOI

      10.2147/cpaa.s61462

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Hydrophilic-interaction liquid chromatography–tandem mass spectrometric determination of erythrocyte 5-phosphoribosyl 1-pyrophosphate in patients with hypoxanthine–guanine phosphoribosyltransferase deficiency2014

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Hasegawa, Yoshihiko Shinohara, Sayako Nozaki, Makiko Nakamura, Koei Oh, Osamu Namiki, Kiyotaka Suzuki, Akihiko Nakahara, Mari Miyazawa, Ken Ishikawa, Takahiro Himeno, Sayaka Yoshida, Takanori Ueda, Yasukazu Yamada, Kimiyoshi Ichida
    • 雑誌名

      Journal of chromatography. B, Analytical technologies in the biomedical and life sciences

      巻: 976-977 ページ: 55-60

    • DOI

      10.1016/j.jchromb.2014.11.010

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Ependymal cells of the mouse brain express urate transporter 1 (URAT1)2013

    • 著者名/発表者名
      Tomioka NH, Nakamura M, Doshi M, et al
    • 雑誌名

      Fluids Barriers CNS

      巻: 10 号: 1 ページ: 31-31

    • DOI

      10.1186/2045-8118-10-31

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Novel allelic variants and evidence for a prevalent mutation in URAT1 causing renal hypouricemia: biochemical, genetics and functional analysis.2013

    • 著者名/発表者名
      Stiburkova B, Sebesta I, Ichida K, et al
    • 雑誌名

      Eur J Hum Genet

      巻: 21 号: 10 ページ: 1067-1073

    • DOI

      10.1038/ejhg.2013.3

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Development of a uricase fusion protein for fluorometric analysis of urate uptake2013

    • 著者名/発表者名
      Nakamura M, Hosoyamada M, Ichida K
    • 雑誌名

      Gout and Nucleic Acids Metabolism

      巻: 37(2) ページ: 93-101

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Decreased extra-renal urate excretion is a common cause of hyperuricemia2012

    • 著者名/発表者名
      Kimiyoshi Ichida, Hirotaka Matsuo, Tappei Takada, et al (Hiroshi Suzuki)
    • 雑誌名

      Nature Communication

      巻: 3 号: 1 ページ: 1-7

    • DOI

      10.1038/ncomms1756

    • URL

      https://localhost/en/publications/719645f5-4ec4-4f6b-a2a8-f58d7f666857

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification of a Xanthinuria Type I Case with Mutations of Xanthine Dehydrogenase in an Afghan Child.2012

    • 著者名/発表者名
      Nakamura M
    • 雑誌名

      Clin Chim Acta

      巻: 414 ページ: 158-160

    • DOI

      10.1016/j.cca.2012.08.011

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Investigation of fluorometric analysis for characterization of urate transporters2012

    • 著者名/発表者名
      Makiko Nakamura, Naohiko Anzai, Makoto Hosoyamada, Kimiyoshi Ichida
    • 雑誌名

      Gout and Nucleic Acid Metabolism

      巻: 36 ページ: 87-94

    • NAID

      130003378906

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Construction of multi-functional extracellular matrix proteins that inhibits migration and tube formation of endothelial cells2011

    • 著者名/発表者名
      Nakamura M, Mie M, Nakamura M, Kobatake E
    • 雑誌名

      Biotechnol Lett,

      巻: 34(8) 号: 8 ページ: 1571-7

    • DOI

      10.1007/s10529-011-0788-0

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 尿酸トランスポーターURAT1遺伝子の重複変異を持つ低尿酸血症例におけるURAT1機能評価2015

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, Blanka Stiburkova, 木村 徹, 櫻井 裕之, 市田 公美
    • 学会等名
      第88回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      2015-03-18 – 2015-03-20
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 尿酸トランスポーターURAT1遺伝子重複変異モデルにおける尿酸輸送活性及びURAT1発現局在の検討2015

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, Blanka Stiburkova, 木村 徹, 櫻井 裕之, 市田 公美
    • 学会等名
      第48回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-02-19 – 2015-02-20
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 脳内ZMP増加のもたらすAMPK活性化と神経症状発現の関連性に関する検討2014

    • 著者名/発表者名
      伊藤 祥子,清水 考大,中島 健裕,中村 真希子,市田 公美
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2014-11-25 – 2014-11-27
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質による尿酸トランスポーター阻害薬スクリーニング法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      小林 知加,光石 昌平,中村 真希子,市田 公美
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2014-11-25 – 2014-11-27
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Lesch-Nyhan病に伴う脳内ZMPの増加と神経症状の関連性に対する検討2014

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子,清水 考大,杉本 大輔,篠原 佳彦,市田 公美
    • 学会等名
      第131回成医会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2014-10-09 – 2014-10-10
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 新規融合タンパク質プロ―ブによる尿酸トランスポーター評価法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子,山根 千佳,光石 昌平,市田 公美
    • 学会等名
      第9回トランスポーター研究会年会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      2014-06-14 – 2014-06-15
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Hereditary renal hypouricemia causing by defect in URAT1: a new insight into molecular pathology2014

    • 著者名/発表者名
      B. Stiburkova, J. Stekrova, M. Nakamura, K. Ichida
    • 学会等名
      The European Society of Human Genetics Conference 2014
    • 発表場所
      Milano, Italy
    • 年月日
      2014-05-31 – 2014-06-03
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Construction of fluorescent uricase fusion protein for characterization of urate transporters2014

    • 著者名/発表者名
      M. Nakamura, S. Mitsuishi, C. Yamane, K. Ichida
    • 学会等名
      5th FIP Pharmaceutical Sciences World Congress
    • 発表場所
      Melbourne, Australia
    • 年月日
      2014-04-13 – 2014-04-16
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 高血圧を伴う糖尿病患者におけるイルベサルタンの血清尿酸値降下作用2014

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, 笹井 信夫,久留 一郎, 市田 公美
    • 学会等名
      第47回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] ヒポキサンチン-グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ活性欠損症フェノタイピングにおける赤血球中5-ホスホリボシル-1-ピロリン酸濃度測定の有用性2014

    • 著者名/発表者名
      長谷川 弘, 篠原 佳彦, 中村 真希子, 山田 裕一, 市田 公美
    • 学会等名
      第47回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] マウス脳内URAT1は脳室上衣細胞脳室側膜に局在する。2014

    • 著者名/発表者名
      富岡 直子, 中村 真希子,市田 公美, 森崎 隆幸, 内田 俊也, 細山田 真
    • 学会等名
      第47回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光化合物を用いた尿酸トランスポーターURAT1機能評価法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, 足立 匠, 細山田 真, 市田 公美
    • 学会等名
      第87回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      仙台
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能評価法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, 山根 千佳, 光石 昌平, 市田 公美
    • 学会等名
      日本化学会第94春季年会
    • 発表場所
      名古屋
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 腸管尿酸排泄低下に起因する新たな「腎負荷型」高尿酸血症の解明2013

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, 松尾 洋孝,髙田 龍平, 中山 昌喜, 清水 徹, 細山田 真, 四ノ宮 成祥, 鈴木 洋史, 細谷 龍男, 市田 公美
    • 学会等名
      第56回日本腎臓学会学術総会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光化合物輸送を指標とした尿酸トランスポーターURAT1機能解析法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子, 足立 匠, 松尾 広大, 市田 公美
    • 学会等名
      第8回トランスポーター研究会年会
    • 発表場所
      熊本
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光化合物を用いた尿酸トランスポーターUrate Transporter1(URAT1)機能解析法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      足立 匠, 中村 真希子, 松尾 広大, 細山田 真, 市田 公美
    • 学会等名
      第128回日本薬理学会関東部会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 運動後急性腎不全の発症機序におけるangiotensin II亢進の寄与の検討2013

    • 著者名/発表者名
      大澤 朱子, 大塚 恵子, 五十嵐 則紀, 山浦 千恵, 中村 真希子, 市田 公美
    • 学会等名
      第128回日本薬理学会関東部会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Lesch‐Nyhan病における神経症状の病因解明に関する検討2013

    • 著者名/発表者名
      杉本 大輔, 柴崎 透, 清水 考大, 篠原 佳彦, 中村 真希子, 市田 公美
    • 学会等名
      第128回日本薬理学会関東部会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 新規蛍光タンパク質プローブを用いた尿酸トランスポーター機能解析法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      山根 千佳, 光石 昌平, 細野 彩奈, 中村 真希子, 市田 公美
    • 学会等名
      第128回日本薬理学会関東部会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] HPRT欠損症:新たな日本人家系のHPRT1変異とPRPP濃度2013

    • 著者名/発表者名
      山田 裕一, 野村 紀子, 山農 亜里佐, 山田 憲一郎, 木村 礼子, 福士 大輔, 長谷川 弘, 中村 真希子, 市田 公美, 若松 延昭
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      横浜
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 高尿酸血症治療における尿酸排泄トランスポーターABCG2の役割2013

    • 著者名/発表者名
      小池 晋太郎, 豊田 優, 髙田 龍平, 中村 真希子, 長谷川 弘, 市田 公美
    • 学会等名
      第57回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 尿酸排泄トランスポーターABCG2による高尿酸血症治療薬輸送の検討2013

    • 著者名/発表者名
      浅見 友一, 小池 晋太郎, 豊田 優, 髙田 龍平, 中村 真希子, 長谷川 弘, 市田 公美
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 血中尿酸低下による活性酸素過剰の運動後急性腎不全への関与の検討2013

    • 著者名/発表者名
      大塚 恵子, 大澤 朱子, 五十嵐 則紀, 中村 真希子, 市田 公美
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Lesch-Nyhan病に伴う脳内ZMPの増加と神経症状の関連性に対する検討2013

    • 著者名/発表者名
      清水 考大, 杉本 大輔, 篠原 佳彦, 中村 真希子, 市田 公美
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Uricase融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能解析法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      光石 昌平, 山根 千佳, 細野 彩奈, 中村 真希子, 市田 公美
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] ABCG2の機能低下による腎外の尿酸排泄低下:高尿酸血症の症例解析と動物モデル解析2013

    • 著者名/発表者名
      松尾 洋孝、高田 龍平、中山 昌喜、清水 徹、高田 雄三、井上 寛規、岡田 千沙、中村 真希子、細山田 真、四ノ宮 成祥、細谷 龍男、市田 公美
    • 学会等名
      第46回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 若年性発症の高尿酸血症・痛風により判明したLesch-Nyhan-variantの一家系症例2013

    • 著者名/発表者名
      松田 安史、岸 慎治、山内 高弘、吉田 明、上田 孝典、山田 裕一、三澤 美和、江川 克哉、中村 真希子、市田 公美
    • 学会等名
      第46回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] マウス血清尿酸値のインビトロ上昇2013

    • 著者名/発表者名
      渡部 多真紀、富岡 直子、中村 真希子、道志 勝、金子 希代子、内田 俊也、藤森 新、市田 公美、土屋 雅勇、細山田 真
    • 学会等名
      第46回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能評価法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子、細山田 真、市田 公美
    • 学会等名
      第46回日本痛風・核酸代謝学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能評価法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子、細野 彩奈、細山田 真、市田 公美
    • 学会等名
      第86回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 尿酸の腸管排泄低下は高尿酸血症の主要な新規機序である2013

    • 著者名/発表者名
      市田 公美、松尾 洋孝、高田 龍平、中山 昌喜、清水 徹、春日 裕志、中島 宏、中村 好宏、高田 雄三、河村 優輔、内海 由貴、中村 真希子、櫻井 裕、細谷 龍男、四ノ宮 成祥、鈴木 洋史
    • 学会等名
      第99回日本消化器病学会総会
    • 発表場所
      鹿児島
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質による尿酸蛍光検出法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      細野 彩奈、山根 千佳、中村 真希子、市田 公美
    • 学会等名
      第7回日本分子イメージング学会総会
    • 発表場所
      浜松
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光化合物を用いた尿酸トランスポーター機能解析法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      松尾 広大、中村 真希子、足立 匠、細山田 真、市田 公美
    • 学会等名
      第7回日本分子イメージング学会総会
    • 発表場所
      浜松
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能解析法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子、細野 彩奈、市田 公美
    • 学会等名
      第129回成医会総会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能解析法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      中村 真希子、細野 彩奈、市田 公美
    • 学会等名
      第34回日本バイオマテリアル学会大会
    • 発表場所
      仙台
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光化合物を用いた尿酸トランスポーターurate transporter 1機能解析法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      足立 匠、松尾 広大、中村 真希子、細山田 真、市田 公美
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] 運動後急性腎不全の発症機序におけるangiotensin II亢進の関与の検討2012

    • 著者名/発表者名
      大澤 朱子、山浦 千恵、中村 真希子、市田 公美
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] Lesch-Nyhan病における神経症状の発症機序解明2012

    • 著者名/発表者名
      杉本 大輔、柴崎 透、篠原 佳彦、中村 真希子、市田 公美
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ウリカーゼ融合タンパク質を用いた尿酸トランスポーター機能解析法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      山根 千佳、細野 彩奈、中村 真希子、市田 公美
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ABCG2機能低下による「腎外排泄低下型」高尿酸血症

    • 著者名/発表者名
      中山 昌喜、松尾 洋孝、高田 龍平、清水 徹、春日 裕志、中島 宏、中村 好宏、高田 雄三、河村 優輔、内海 由貴、中村 真希子、櫻井 裕、細谷 龍男、四ノ宮 成祥、鈴木 洋史、市田 公美
    • 学会等名
      第127回日本薬理学会関東部会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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