不整脈疾患モデル心筋細胞による機能解析と薬剤スクリーニングの検討

• 研究課題/領域番号: 24790745
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 木下 耕史 富山大学, 医学薬学研究部(医学), 助教 (10585920)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2013年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2012年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円)
• キーワード: 不整脈 / iPS細胞 / QT延長 / 心筋誘導 / 薬剤応答性 / 疾患モデル / 遺伝性心疾患 / LQT / イオンチャネル / パッチクランプ

研究概要

CHIR99021とIWP-4の2種の化合物を用いて、iPS細胞から心筋細胞への誘導に成功した。従来のActivin AやBMP4等のタンパク質を用いる方法と同様に約10日で拍動が観察された。誘導した心筋細胞についてRT-PCRと免疫染色を行い、心筋細胞特異的な遺伝子やタンパク質が発現している事を確認した。KCNQ1遺伝子に変異を持つ患者より誘導した心筋細胞について、交感神経作動薬を加えた時の拍動数と活動電位変化の比較を行ったが、健常人との差は見られなかった。今後、iPS細胞由来の心筋細胞を用いて、様々な薬物負荷試験が可能になると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] A590T mutation in KCNQ1 C-terminal helix D decreases IKs channel trafficking and function but not Yotiao interaction. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K, Komatsu T, Nishide K, Hata Y, Hisajima N, Takahashi H, Kimoto K, Aonuma K, Tushima E, Tabata T, Yoshida T, Mori H, Nishida K, Yamaguchi Y, Ichida F, Fukurotani K, Inoue H, Nishida N.
  • 雑誌名: J Mol Cell Cardiol 巻: 72 ページ: 273-280
  • DOI: 10.1016/j.yjmcc.2014.03.019
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification and characterization of a novel genetic mutation with prolonged QT syndrome in an unexplained postoperative death (2014)
  • 著者名/発表者名: Yukiko Hata, Hisashi Mori, Ayumi Tanaka, Yosuke Fujita, Takeshi Shimomura, Toshihide Tabata, Koshi Kinoshita, Yoshiaki Yamaguchi, Fukiko Ichida, Yoshihiko Kominato, Noriaki Ikeda, Naoki Nishida
  • 雑誌名: International Journal of Legal Medicine 巻: 128 号: 1 ページ: 105-115
  • DOI: 10.1007/s00414-013-0853-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Glycine/Serine Polymorphism at Position 38 Influences KCNE1 Subunit’s Modulatory Actions on Rapid and Slow Delayed Rectifier K⁺ Currents (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshiaki Yamaguchi, Kohki Nishide, Mario Kato, Yukiko Hata, Koichi Mizumaki, Koshi Kinoshita, Yuki Nonobe, Toshihide Tabata, Tamotsu Sakamoto, Naoya Kataoka, Yosuke Nakatani, Fukiko Ichida, Hisashi Mori, Kenkichi Fukurotani, Hiroshi Inoue, MD, Naoki Nishida
  • 雑誌名: Circulation Journal 巻: 78 号: 3 ページ: 610-618
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-13-1126
  • NAID: 130003391006
  • ISSN: 1346-9843, 1347-4820
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of a novel mutant KCNQ1 channel subunit lacking a large part of the C-terminal domain (2013)
  • 著者名/発表者名: Katsuya Kimoto, Koshi Kinoshita, Tomoki Yokoyama, Yukiko Hata, Takuto Komatsu, Eikichi Tsushima, Kohki Nishide, Yoshiaki Yamaguchi, Koichi Mizumaki, Toshihide Tabata, Hiroshi Inoue, Naoki Nishida, Kenkichi Fukurotani
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 440 号: 2 ページ: 283-288
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.09.075
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel missense mutation causing a G487R substitution in the S2-S3 loop of human ether-a-go-go-related gene channel (2012)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K, Yamaguchi Y, Nishide K, Kimoto K, Nonobe Y, Fujita A, Asano K, Tabata T, Mori H, Inoue H, Hata Y, Fukurotani K, Nishida N
  • 雑誌名: J Cardiovasc Electrophysiol 巻: 23 号: 11 ページ: 1246-1253
  • DOI: 10.1111/j.1540-8167.2012.02383.x
  • 査読あり
• [学会発表] C-terminal helix D of KCNQ1 contributes to normal IKs channelfunction. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takuto Komatsu, Koshi Kinoshita, Katsuya Kimoto, Yukiko Hata, Kei Aonuma, Eikichi Tsushima, Kohki Nishide, Nozomi Hisajima, Hiroyuki Takahashi, Kenkichi Fukurotani, Naoki Nishida, Toshihide Tabata
  • 学会等名: 第91回日本生理学会大会
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 2014-03-17
• [学会発表] KCNQ1C末端のhelix Dは正常なIKsチャネル機能に寄与する (2014)
  • 著者名/発表者名: 小松 卓人、木下 耕史、木本 克哉、畑 由紀子、青沼 慶、津島 永吉、西出 康貴、 久嶋 希望、高橋 宏幸、袋谷 賢吉、西田 尚樹、田端 俊英
  • 学会等名: 第91回日本生理学会大会
  • 発表場所: 鹿児島大学郡元キャンパス
• [学会発表] Functional Characterization of KCNQ1 Channel Subunit with an A590T mutation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Koshi Kinoshita, Takuto Komatsu, Katsuya Kimoto, Kohki Nishide, Toshihide Tabata, Fukiko Ichida, Yoshiaki Yamaguchi, Kunihiro Nishida, Hiroshi Inoue, Yukiko Hata, Naoki Nishida
  • 学会等名: Basic Cardiovascular Sciences (BCVS)
  • 発表場所: Las Vegas
  • 年月日: 2013-07-22
• [学会発表] Abnormal modulation of hERG and KCNQ1 channels. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kohki Nishide, Mario Kato, Yoshiaki Yamaguchi, Koshi Kinoshita, Akira Fujita, Yuki Nonobe, Yukiko Hata, Koichi Mizumaki, Hiroshi Inoue, Naoki Nishida, Toshihide Tabata
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-03-27
• [学会発表] Characterization of a New Mutant KCNQ1 Channel Subunit with aC-TerminalTruncation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Katsuya Kimoto, Kohki Nishide, Koshi Kinoshita, Yuki Nonobe, Akira Fujita, Yoshiaki Yamaguchi, Yukiko Hata, Koichi Mizumaki, Hiroshi Inoue, Naoki Nishida, Toshihide Tabata
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-03-27
• [学会発表] Characterization of KCNQ1 (Kv7.1, IKs) channel subunit with an A590Tmutation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Koshi Kinoshita, Toshihide Tabata, Fukiko Ichida, Yoshiaki Yamaguchi, Kunihiro Nishida, Hiroshi Inoue, Yukiko Hata, Naoki Nishida
  • 学会等名: 第77回日本循環器学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-15
• [学会発表] Functional Characterization of KCNQ1 Channel Subunit with an A590T Mutation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Koshi Kinoshita, Takuto Komatsu, Katsuya Kimoto, Kohki Nishide, Toshihide Tabata, Fukiko Ichida, Yoshiaki Yamaguchi, Kunihiro Nishida, Hiroshi Inoue, Yukiko Hata, Naoki Nishida
  • 学会等名: Basic Cardiovascular Sciences 2013
  • 発表場所: Paris Las Vegas, Las Vegas, Nevada
• [学会発表] Characterization of KCNQ1 (KV7.1, IKs) Channel Subunit with an A590T Mutation (2013)
  • 著者名/発表者名: Koshi Kinoshita, Toshihide Tabata, Fukiko Ichida, Yoshiaki Yamaguchi, Kunihiro Nishida, Hiroshi Inoue, Yukiko Hata, Naoki Nishida
  • 学会等名: 第77回日本循環器学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
• [学会発表] KCNE1サブユニットのG38S変異がもたらすhERGおよびKCNQ1チャネルに対する変調作用の変化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 西出 康貴, 加藤 真理夫, 山口 由明, 木下 耕史, 藤田 陽, 野々部 雄樹, 畑 由紀子, 水牧 功一, 井上 博, 西田 尚樹, 田端 俊英
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: タワーホール船堀
• [学会発表] 遅延整流性カリウム・チャネル・サブユニット新規変異体KCNQ1(Y461X)の機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木本 克哉, 西出 康貴, 木下 耕史, 野々部 雄樹, 藤田 陽, 山口 由明, 畑 由紀子, 水牧 功一, 井上 博, 西田 尚樹, 田端 俊英
  • 学会等名: 第90回日本生理学会大会
  • 発表場所: タワーホール船堀
• [備考] 研究室ホームページ
  • URL: http://www.med.u-toyama.ac.jp/legal/