| 研究課題/領域番号 |
24890129
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| 研究種目 |
研究活動スタート支援
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
内分泌学
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| 研究機関 | 島根大学 |
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研究代表者 |
金沢 一平 島根大学, 医学部, 助教 (50452553)
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| 研究期間 (年度) |
2012-08-31 – 2014-03-31
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| 研究課題ステータス |
採択後辞退 (2013年度)
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| 配分額 *注記 |
2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | AMPK / 骨芽細胞 |
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| 研究概要 |
骨芽細胞特異的AMPKノックアウトマウスを作製するプロトコールを作成し、島根大学の動物実験専門委員会と組み換えDNA実験についての申請を行い、許可を得た。その後、 AMPK flox/floxマウスとOsx-CreTG/+マウスを米国ジャクソン研究所より購入し、系統維持のためにマウスを繁殖させた。骨芽細胞特異的AMPKノックアウトマウスを作成するために、AMPK flox/floxマウスとOsx-CreTG/+を交配させ、AMPK flox/+;Osx-CreTG/+マウスを得た後に、再度AMPK flox/floxマウスと交配させ、AMPK flox/flox;Osx-CreTG/+マウスを得た。次に、AMPK flox/flox;Osx-CreTG/+マウスのgenotypingのprotocolを確立し、現在は系統維持のためにAMPK flox/flox;Osx-CreTG/+マウスを繁殖させているところである。2013年中には実験可能なようにAMPK flox/flox;Osx-CreTG/+マウスとAMPK flox/floxマウスを各6-10匹獲得し、観察を開始する予定である。その後は3カ月の飼育ののちに血液と骨組織の採取を行い、マイクロCT、骨組織標本、骨代謝マーカーの測定などの解析を行っていく予定としている。骨の表現型が確認できたところで、次に糖代謝についての検討をブドウ糖負荷試験、インスリン負荷試験などにて行っていく予定である。In vivoにおける表現型が確認できた後に、AMPK flox/flox;Osx-CreTG/+マウスより骨芽細胞と間葉系幹細胞の初代培養を行い、AMPK欠損による骨芽細胞の増殖能、分化・石灰化能などについて、分子レベルの検討を行う予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
理由
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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