| 研究課題/領域番号 |
24K02192
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分47060:医療薬学関連
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| 研究機関 | 金沢大学 |
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研究代表者 |
中島 美紀 金沢大学, ナノ生命科学研究所, 教授 (70266162)
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| 研究期間 (年度) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
18,590千円 (直接経費: 14,300千円、間接経費: 4,290千円)
2026年度: 5,590千円 (直接経費: 4,300千円、間接経費: 1,290千円)
2025年度: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2024年度: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
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| キーワード | RNA編集 / 転写後調節 / 薬物代謝 / 薬物動態 / RNA修飾 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
A-to-I RNA編集は、ADARという酵素によってRNA上のアデノシンがイノシンに変換される、ヒトで最も高頻度に認められるRNA修飾であり、これによって遺伝子の発現変動や機能変化が生じ得る。本研究では、医薬品有効成分の血中濃度を規定し、薬効や副作用発症を左右する薬物代謝酵素の発現制御に対するADARの関わりを包括的に明らかにし、RNA編集の変動要因の解明とともに創薬および医薬品適正使用に資することを目指す。
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| 研究実績の概要 |
薬物代謝酵素の発現量における個人内変動や個人差は、医薬品による薬効や毒性発現を左右する大きな要因となる。これまでの研究で、A-to-I RNA編集を担う酵素であるADARによって、主な薬物代謝酵素であるシトクロムP450が転写後調節を受けていることを明らかにしてきた。また、ヒト肝臓中のADAR発現量に200倍以上の大きな個人差が認められることも明らかにしている。そのため、ADARの発現量の個人差やADAR活性に影響を及ぼす要因の解明が、薬物動態および薬物応答性の理解につながる可能性が考えられる。
ADARの発現量を変化させ得る内因性および外因性化合物を見出すことを目的として、ADAR遺伝子の5'-上流領域を組み込んだルシフェラーゼプラスミドを構築し、その転写活性を評価する評価系を構築した。薬物代謝酵素の発現を誘導することで知られるPXR, CARおよびAhRなどの核内受容体や転写因子を活性化する代表的な化合物を処置し、ADARの転写活性への影響を評価した。また、FDA承認薬ライブラリーも用いた評価も行った。
さらに、最近の報告で、表面プラスモン共鳴等により、ADARに結合することが示された2つの化合物を対象に、それらがADAR酵素活性を阻害する可能性をin cellulo実験により検証した。MCF-7細胞にそれらの化合物を処置し、我々の検討でA-to-I RNA編集を受けることを明らかにしているジヒドロ葉酸還元酵素 mRNAの3'-非翻訳領域をダイレクトシークエンス解析してA-to-I RNA編集活性を評価したところ、どちらも編集活性に影響を与えなかった。また、分子ドッキング解析ならびに高速原子間力顕微鏡解析により、ADARのダイマー化ならびに基質RNA認識の分子動態を明らかにし、セルライゼート中のADARを検出するための安価で高感度な新規バイオセンサーも開発した。
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| 現在までの達成度 |
現在までの達成度
2: おおむね順調に進展している
理由
RNA編集を担う酵素であるADARの発現量や酵素活性に影響を及ぼす要因の解明を進めている。また、近年、医薬品代謝に対する寄与が増加してきているnon-P450酵素の発現量に及ぼすADARの影響についても解析を進めている。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでの研究で、主な薬物代謝酵素であるシトクロムP450が転写後調節を受けていることを明らかにしてきた。近年では、医薬品代謝に対して、シトクロムP450以外の酵素（non-P450酵素）の寄与が増加してきていることから、それらの酵素に関する解明が求められている。
代表的なnon-P450酵素であるグルクロン酸転移酵素や還元酵素等について、ADARによる発現制御を受けることを明らかにしつつあるものの、その分子メカニズムの詳細について解明に至っていないことから、今後、そのメカニズムの解明を進める。
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