| 研究課題/領域番号 |
24K11756
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分55010:外科学一般および小児外科学関連
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| 研究機関 | 千葉県がんセンター(研究所) |
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研究代表者 |
盛永 敬郎 千葉県がんセンター(研究所), がん治療開発グループ 細胞治療開発研究部, 研究員 (30757000)
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| 研究分担者 |
河津 正人 千葉県がんセンター(研究所), がん治療開発グループ 細胞治療開発研究部, 部長 (20401078)
羽山 晶子 千葉県がんセンター(研究所), 乳腺外科, 医長 (80758251)
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| 研究期間 (年度) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2026年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2025年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2024年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | 新規がん遺伝子 / 転写バリアント / 細胞接着 / 生存シグナル / 乳がん / 転移 / 転写因子 / シグナル伝達 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
トリプルネガティブ乳がん(TNBC)は、転移などの進行例では予後不良であり、新規治療標的の探索が必要です。私たちはTNBCで特異的に発現するTNS3遺伝子の新規転写バリアント(TNS3-S)を見いだしています。そこで、①主にマウスモデルを用いてTNBCが転移する過程におけるTNS3-Sの役割を明らかにし、②この転写バリアントがTNBC特異的に発現する分子機序を解明し、③さらに実際の検体でTNS3-Sの空間的な分布や発現状況と予後との関連を明らかにすることを目指します。TNBCにおけるTNS3-Sの意義や機能を明らかに出来れば、新たなバイオマーカーや治療法開発につながるものと考えています。
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| 研究実績の概要 |
トリプルネガティブ乳がん(TNBC)は再発や転移の頻度が高い難治性疾患のひとつである。最近では周術期のPARP阻害薬や免疫チェックポイント阻害薬の効果も期待されているが、進行症例の治療では依然として効果に乏しく、TNBCに対する新たな治療標的の探索が強く求められる。我々は転写産物全長の配列情報が得られるロングリードシークエンス解析を用い、アノテーション情報非依存的に未知の転写バリアントを高精度で網羅的に検出する解析手法を独自に開発した。そして、本手法を応用して乳がん検体の中でもTNBCで高発現するTNS3遺伝子の新規転写バリアント(TNS3-S)を同定した。このTNS3-Sをノックアウト(KO)あるいは再導入(RSC)した細胞株を作成して機能を比較したところKOは足場非依存的培養条件でアポトーシスしてRSCではこの表現型が消失した。マウスを用いた肺転移モデルにおいては、KOで肺転移が抑制され、RSCで増加していた。これらの結果から、TNS3-Sの肺転移を促進する機能が示唆された。また、TNS3-SにFLAGタグを結合した分子を用いて、カウンターパート分子を同定した。この分子との結合には、TNS3-Sの特定のチロシン残基が必要であり、これをフェニルアラニンに置換したTNS3-S(YF)とは結合しなかった。さらにこのカウンターパート分子はKOで発現量が減少し、RSCで発現量が高くなっていた。そこで、シクロヘキシミドを用いたたんぱく質の安定性試験を行うと、TNS3-Sがカウンターパート分子を安定化していることが示唆された。以上のことから、TNS3-Sの機能とその分子機序を明らかにすることができた。
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| 現在までの達成度 |
現在までの達成度
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究の目的は以下の①―③である：①TNS3-SがTNBC高度悪性化に及ぼす機能的影響とその分子機序を示し、TNS3-Sが治療標的となり得るか否かを明らかにする。さらにTNS3-S発現の特異性やTGβシグナル伝達系との関係を明らかにするために、②TNBCでTNS3-Sが高発現する分子機序を解析する。そのうえで、③臨床検体を用いてTNS3-S発現の転移巣と原発巣間比較や腫瘍内分布及び予後との関係を調べることで、臨床病理学的意義を明らかにする。①に関連して、分子の機能とその作用機序の解明につながる重要なデータが得られたことから、おおむね順調に進捗していると判断できる。
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| 今後の研究の推進方策 |
TNS3-Sの機能と分子機序については順調に進捗しているので、次に発現の制御機構と臨床的な意義を明らかにしていく。発現制御については、ヒストンマークなどからプロモーター領域を予測し、当該領域に結合する転写因子をノックダウンして絞り込んでいく。また、臨床検体はすでに確保してありRNAscope法でTNS3-Sの空間的な分布や予後などを調べていく。
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