| 研究課題/領域番号 |
24K11830
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分55020:消化器外科学関連
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
小原 有一朗 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (60973188)
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| 研究分担者 |
安田 里司 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (30721576)
中村 広太 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (30790802)
庄 雅之 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (50364063)
長井 美奈子 奈良県立医科大学, 医学部, 学内講師 (80646092)
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| 研究期間 (年度) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2026年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2025年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | 膵癌 / 化学療法 / 治療抵抗性 / 血糖 / ヘキソサミン生合成経路 / GFAT / TIL |
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| 研究開始時の研究の概要 |
近年，高血糖が化学療法抵抗性に関連することが明らかになってきており，これらを結びつけるカスケードとしてヘキソサミン生合成経路が注目されている．本研究ではヘキソサミン生合成経路を介した化学療法抵抗性を克服するために，以下の3点の解明を目的とする：①GFATを介した化学療法抵抗性の詳細な機序，②低侵襲検体による化学療法抵抗性高リスク群の予測可能性，③マウスモデルを用いたGFAT阻害及び血糖レベルが化学療法抵抗性に及ぼす影響．
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| 研究実績の概要 |
当施設で収集した膵癌FFPE検体を用い、腫瘍浸潤リンパ球の構成を評価するため、CD4陽性T細胞、CD8陽性T細胞、および制御性T細胞のマーカーであるFoxp3について免疫染色を実施した。これらの免疫染色の結果と、腫瘍組織におけるGFATの発現レベル、および患者の血糖ステータス（高血糖・正常血糖）を組み合わせ、これらの因子が腫瘍免疫に与える影響について関連解析を行った。
これらの包括的な解析の結果、特にGFAT高発現かつ高血糖を呈する患者群において、他の群と比較して腫瘍浸潤リンパ球の浸潤密度が統計学的に有意に低いことが明らかとなった。この重要な発見は、GFATの高発現と高血糖状態の組み合わせが、膵癌の腫瘍微小環境における細胞性免疫応答を抑制する方向に作用している可能性を強く示唆するものである。
次に、GFAT高発現と高血糖が重複する状況下で、ヘキソサミン生合成経路（HBP）の亢進が予後不良と関連する可能性という仮説を検証するため、HBPの最終産物に関与する重要な酵素であるB3GNT3およびB3GNT8の遺伝子発現解析を試みた。FFPE標本から厳密なプロトコルに従ってmRNAを抽出し、これらの遺伝子発現量をリアルタイムPCR法を用いて定量的に評価する計画であった。しかしながら、予期せぬことに、B3GNT3およびB3GNT8のいずれの遺伝子についても検出限界以下の極めて低い発現レベルであり、再現性のある定量値を得ることが困難であった。
この検出失敗の理由について詳細に考察した結果、B3GNT3やB3GNT8の発現産物である糖転移酵素が、細胞内で糖鎖合成に利用される過程で消費されやすく、組織中に安定して高濃度で蓄積する性質を持たないため、ホルマリン固定・パラフィン包埋というプロセスを経たFFPE検体からの限られたRNA量では検出が困難であった可能性が考えられる。
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| 現在までの達成度 |
現在までの達成度
2: おおむね順調に進展している
理由
概ね研究計画通りに遂行できている．
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| 今後の研究の推進方策 |
一部PCR結果がでなかったため，より豊富に高品質なmRNAが得られる可能性のある新鮮凍結組織を用いた検討や、遺伝子発現解析以外の手法（例：対応するタンパク質レベルでの評価、または代謝産物解析など）を組み合わせることを検討している．
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