| 研究課題/領域番号 |
24K13123
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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| 研究機関 | 久留米大学 |
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研究代表者 |
轟 圭太 久留米大学, 医学部, 講師 (60624434)
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| 研究分担者 |
秋葉 純 久留米大学, 大学病院, 教授 (00341305)
河原 明彦 久留米大学, 大学病院, 医療技術員 (00469347)
安陪 由思 久留米大学, 医学部, 助教 (50748712)
植田 浩介 久留米大学, 医学部, 講師 (60569440)
中山 正道 久留米大学, 医学部, 講師 (80795229)
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| 研究期間 (年度) |
2024-04-01 – 2028-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2027年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2026年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2025年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2024年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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| キーワード | がん幹細胞 / クロストーク / 口腔扁平上皮癌 / レーザーマイクロダイセクション / RNA sequence / クロストーク解析 / 免疫チェックポイント分子 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
計画している具体的な研究項目は、口腔癌の臨床検体(生検ないし切除組織)および培 養細胞株を用いた、癌局所における、1. CSCsとのcross talkに関わるリンパ球やマクロファー ジなどの腫瘍間質細胞、免疫マーカーや各種サイトカインの網羅的プロファイル解析、2. 培養細胞株より分取したCSCsとリンパ球との共培養により誘導されるT cell, B cell, 樹状細胞 (Dendric cell; 以下DC)のsubgroupならびに機能解析(細胞増殖能、T細胞誘導能、免疫抑制機能 等)，3. 薬剤耐性株を用いた薬剤耐性獲得メカニズムの解析の3点である。
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| 研究実績の概要 |
我々のこれまでの研究成果から、口腔扁平上皮癌(Oral Squamous Cell Carcinoma, 以下OSCC)の腫瘍先進部にはがん幹細胞(Cancer Stem Cells, 以下CSCs)のpopularityが多く含まれていると考えられる。特に、YK-3, 4Cなどのびまん性の浸潤様式を示す症例では、その先進部にCSCsを多く含んでいることが示唆される。本研究の目的は、CSCsと周囲間質とのcross talkに関わる新規免疫バイオマーカーの探索と免疫抑制的微小環境の解析を行うことである。そこで、本研究の第一段階として、浸潤様式について形態学的評価が可能なホルマリン固定Formalin-fixed paraffin-embedded(以下FFPE)切片に着目し、腫瘍先進部より関心領域を抽出、そこからCSCsと周囲間質とのcross talkに関わるkey moleculeの同定と機能解析を行う予定である。
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| 現在までの達成度 |
現在までの達成度
3: やや遅れている
理由
2024年度は、当院歯科口腔医療センターで切除されたOSCC症例のFFPE切片より、特にYK-3, 4C型の浸潤様式を示す症例に着目し、浸潤先進部よりLaser Microdissection (LMD 7, Leica Microsystems社)を用いて、関心領域を抽出、採取された検体よりRNA-sequenceによる網羅的解析へと進めていく予定である。FFPEは形態学的評価に基づいて関心領域を抽出するには有利であるが、ホルマリン固定による経時的なRNAの劣化は避けられず、なるだけ固定期間の短いものを使用する必要がある。そのため、RNA-sequenceに先立ち、固定期間の短いサンプルの選択と、各サンプルのRNA quality checkを行っている。このRNA checkをクリアする症例の抽出とRNAのダメージの少ないLMDのレーザー出力設定に時間を要しており、当初の予定よりも研究の進捗がやや遅れている状況である。
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| 今後の研究の推進方策 |
対象症例症例の抽出と、RNAへのダメージの少ないLMDのレーザー出力設定が概ね終了したため、2025年度はRNA-sequenceに基づく、CSCsと周囲間質とのcross talkに関わる新規免疫バイオマーカーの抽出とその機能解析に進む予定である。
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