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ジンクフィンガーヌクレアーゼの遺伝子ノックアウト動物作製への実用化に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 25252056
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 統合動物科学
研究機関東京大学

研究代表者

内藤 邦彦  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (20188858)

連携研究者 吉崎 悟朗  東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 教授 (70281003)
菊地 和弘  独立行政法人農業生物資源研究所, 動物科学研究領域, 上級研究員 (20360456)
杉浦 幸二  東京大学, 農学生命科学研究科, 准教授 (20595623)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
46,280千円 (直接経費: 35,600千円、間接経費: 10,680千円)
2016年度: 9,360千円 (直接経費: 7,200千円、間接経費: 2,160千円)
2015年度: 9,360千円 (直接経費: 7,200千円、間接経費: 2,160千円)
2014年度: 12,610千円 (直接経費: 9,700千円、間接経費: 2,910千円)
2013年度: 14,950千円 (直接経費: 11,500千円、間接経費: 3,450千円)
キーワード人工ヌクレアーゼ / CRISPR / ZFN / マウス卵 / ブタ卵 / 魚類卵 / Cas9 / CRISPR/Cas / 魚卵 / 哺乳類卵
研究成果の概要

遺伝子ターゲティング生物作製の新しい手法として注目されている人工ヌクレアーゼの実用化を推進することを目指し、種々の技術開発および家畜卵と、魚類卵への応用を検討した。
本研究では、CRISPR/Cas系を用い一度にトリプルKOが高率にできること、大規模変異を入れられることを示した。技術開発として非特異切断の抑制が期待されるオフセットニッキング系の構築、PAM配列が異なる別種のCRISPR/Cas系の利用性向上、また応用としてブタ卵やヤマメ、ニジマス卵での利用の可能性を示した。

報告書

(5件)
  • 2017 研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 2013 実績報告書
  • 研究成果

    (32件)

すべて 2018 2017 2016 2015 2014 2013

すべて 雑誌論文 (15件) (うち国際共著 1件、 査読あり 14件、 オープンアクセス 10件、 謝辞記載あり 5件) 学会発表 (16件) (うち国際学会 1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Contributions of UBE2C and UBE2S to meiotic progression of porcine oocytes2018

    • 著者名/発表者名
      Fujioka YA, Onuma A, Fujii W, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 64 号: 3 ページ: 253-259

    • DOI

      10.1262/jrd.2018-006

    • NAID

      130007409956

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [雑誌論文] Chd9 mediates highly loosened chromatin structure in growing mouse oocytes2018

    • 著者名/発表者名
      Ooga Masatoshi、Funaya Satoshi、Hashioka Yuki、Fujii Wataru、Naito Kunihiko、Suzuki Masataka G.、Aoki Fugaku
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 500 号: 3 ページ: 583-588

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2018.04.105

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Efficient mutagenesis by CRISPR/Cas system during meiotic maturation of porcine oocytes2017

    • 著者名/発表者名
      Onuma A, Fujii W, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 63 号: 1 ページ: 45-50

    • DOI

      10.1262/jrd.2016-094

    • NAID

      130005332294

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Application of dead end-knockout zebrafish to recipients of germ cell transplantation.2017

    • 著者名/発表者名
      Li Q, Fujii W, Naito K, Yoshizaki G.
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development

      巻: 84 号: 10 ページ: 1100-1111

    • DOI

      10.1002/mrd.22870

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Efficient generation of genome-modified mice using Campylobacter jejuni-derived CRISPR/Cas.2017

    • 著者名/発表者名
      Fujii W, Ikeda A, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      International Jornal of Molecular Sciences

      巻: 18 号: 11 ページ: 2286-2286

    • DOI

      10.3390/ijms18112286

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Zygote-mediated generation of genome-modified mice using Streptococcus thermophiles 1-derived CRISPR/Cas system.2016

    • 著者名/発表者名
      Fujii W, Kakuta S, Yoshioka S, Kyuwa S,Sugiura K,Naito K.
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 477 号: 3 ページ: 473-476

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2016.06.070

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Analyses of EMI functions on meiotic maturation of porcine oocytes.2016

    • 著者名/発表者名
      Fujioka YA, Onuma A, Fujii W, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development

      巻: 83 号: 11 ページ: 983-992

    • DOI

      10.1002/mrd.22738

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Development of a mono-promoter-driven CRISPR/Cas9 system in mammalian cells2015

    • 著者名/発表者名
      Shin Yoshioka, Wataru Fujii, Tetsuhiro Ogawa, Koji Sugiura, and Kunihiko Naito
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 5 号: 1 ページ: 18341-18341

    • DOI

      10.1038/srep18341

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Finding of a highly efficient ZFN pair for <i>Aqpep</i> gene functioning in murine zygotes2015

    • 著者名/発表者名
      Fujii W, Onuma A, Yoshioka S, Nagashima K, Sugiura K, Naito K
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 61 号: 6 ページ: 589-593

    • DOI

      10.1262/jrd.2015-087

    • NAID

      130005113567

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Efficient generation of genome-modified mice via offset-nicking by CRISPR/Cas system.2014

    • 著者名/発表者名
      Fujii W, Onuma A, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Comm

      巻: 445 号: 4 ページ: 791-794

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2014.01.141

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書 2013 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Nakamura K, Fujii W, Tsuboi M, Tanihata J, Teramoto N, Takeuchi S, Naito K, Yamanouchi K, Nishihara M2014

    • 著者名/発表者名
      Nakamura K, Fujii W, Tsuboi M, Tanihata J, Teramoto N, Takeuchi S, Naito K, Yamanouchi K, Nishihara M
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 4 号: 1 ページ: 5635-5635

    • DOI

      10.1038/srep05635

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Cytoplasmic Anchoring of cAMP-Dependent Protein Kinase (PKA) by A-Kinase Anchor Proteins (AKAPs) Is Required for Meiotic Arrest of Porcine Full-Grown and Growing Oocytes2014

    • 著者名/発表者名
      Nishimura T, Fujii W, Sugiura K, Naito K
    • 雑誌名

      Biol Reprod

      巻: 90 号: 3

    • DOI

      10.1095/biolreprod.113.114736

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] One-step Generation of Phenotype-expressing Triple-knockout Mice with Heritable Mutated Alleles by the CRISPR/Cas9 System2014

    • 著者名/発表者名
      Fujii W, Onuma A, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 60 号: 4 ページ: 324-327

    • DOI

      10.1262/jrd.2013-139

    • NAID

      130004137824

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Repeatable Construction Method for Engineered Zinc Finger Nuclease Based on2013

    • 著者名/発表者名
      Wataru Fujii
    • 雑誌名

      PloS ONE

      巻: 8 号: 3 ページ: e59801-e59801

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0059801

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient generation of large-scale genome-modified-mice using gRNA and CAS9 endonuclease.2013

    • 著者名/発表者名
      Fujii W, Kawasaki K, Sugiura K, Naito K.
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Res.

      巻: 41 号: 20 ページ: e187-e187

    • DOI

      10.1093/nar/gkt772

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 生殖細胞欠損ニジマスの作出とその代理親魚への応用2018

    • 著者名/発表者名
      藤原亮・片山直人・藤井渉・内藤邦彦・吉崎悟朗
    • 学会等名
      平成30年度公益社団法人日本水産学会春季大会
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 生殖細胞欠損ヤマメの作出とその代理親魚への応用2017

    • 著者名/発表者名
      藤原 亮・片山直人・藤井 渉・内藤邦彦・吉崎悟朗
    • 学会等名
      平成29年度公益社団法人日本水産学会春季大会
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] C. jejuni由来CRISPR/Casによるゲノム改変マウスの作製2017

    • 著者名/発表者名
      藤井渉・池田有沙・杉浦幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第123回日本畜産学会
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ブタ卵母細胞成熟過程における核外移行因子exportin-1の機能解析2016

    • 著者名/発表者名
      小沼あすか・藤井 渉・杉浦幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第121回日本畜産学会
    • 発表場所
      日本獣医生命科学大学(東京都武蔵野市)
    • 年月日
      2016-03-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Involvement of Chd9 in highly loosened chromatin structure in growing oocytes.2016

    • 著者名/発表者名
      Ooga M, Fujii W , Naito K, Aoki F.
    • 学会等名
      International Symposium on “Epigenome Dynamics and Regulation in Germ Cells”
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] CRISPR/Casシステムを利用したゲノム改変マウス作製法の開発2015

    • 著者名/発表者名
      藤井渉・杉浦幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第16回日本動物遺伝育種学会
    • 発表場所
      神戸大学(兵庫県神戸市)
    • 年月日
      2015-11-06
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ドナーDNA条件がCRISPR/Casによるマウス前核期卵のノックインに与える影響2015

    • 著者名/発表者名
      永島圭介・藤井 渉・杉浦幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第15回東京大学生命科学シンポジウム
    • 発表場所
      東京大学(東京都文京区)
    • 年月日
      2015-06-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 生殖細胞欠損サケ科魚類の大量生産を目指したdead end遺伝子のゲノム編集2015

    • 著者名/発表者名
      片山直人・定家咲子・矢澤良輔・藤井渉・内藤邦彦・吉崎悟朗
    • 学会等名
      第17回マリンバイオテクノロジー学会
    • 発表場所
      東京海洋大学(東京都港区)
    • 年月日
      2015-05-30
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ドナーDNA の状態がCRISPR/Casを用いたマウス前核期卵へのノックインに及ぼす影響2015

    • 著者名/発表者名
      永島圭介・藤井 渉・杉浦幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第119回日本畜産学会
    • 発表場所
      宇都宮大学
    • 年月日
      2015-03-28 – 2015-03-30
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Knockout of dead end gene using zinc finger nuclease in zebrafish2014

    • 著者名/発表者名
      Li Q • Fujii W • Naito K • Yoshizaki G
    • 学会等名
      平成26年度日本水産学会秋季大会
    • 発表場所
      九州大学箱崎キャンパス
    • 年月日
      2014-09-19 – 2014-09-22
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Cas法を用いた筋ジストロフィーモデルラットの作出2014

    • 著者名/発表者名
      中村克行・藤井渉・坪井誠也・谷端淳・寺本奈保美・竹内志帆・内藤邦彦・山内啓太郎・西原真杉
    • 学会等名
      第157回日本獣医学会
    • 発表場所
      北海道大学
    • 年月日
      2014-09-09 – 2014-09-12
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Casシステムを用いたブタ卵成熟過程におけるゲノム改変効率の検討2014

    • 著者名/発表者名
      小沼あすか・藤井 渉・杉浦幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第107回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      帯広畜産大学
    • 年月日
      2014-08-20 – 2014-08-24
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] ブタ卵母細胞の減数分裂過程におけるFBXO5(EMI1)およびFBXO43(EMI2)の関与2014

    • 著者名/発表者名
      藤岡良江・藤井 渉・杉浦 幸二・内藤邦彦
    • 学会等名
      第107回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      帯広畜産大学
    • 年月日
      2014-08-20 – 2014-08-24
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Generation of Dystrophinmutated rats with a CRISPR/Cas system as a new animal model of muscular dystrophy.2014

    • 著者名/発表者名
      Nakamura K, Fujii W, Tsuboi M, Tanihata J, Teramoto N, Takeuchi S, Naito K, Yamanouchi K, Nishihara M.
    • 学会等名
      2014 FASEB Science Research Conferences
    • 発表場所
      Steamboat Springs, Colorado, USA
    • 年月日
      2014-07-20 – 2014-07-25
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] オフセットニッキング法によるゲノム改変マウスの作製2014

    • 著者名/発表者名
      藤井 渉・小沼 あすか・杉浦 幸二・内藤 邦彦
    • 学会等名
      第118回日本畜産学会
    • 発表場所
      つくば国際会議場(エポカルつくば)(茨城県つくば市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 最適化されたCAS9/gRNAシステムによるゲノム改変マウスの作製2013

    • 著者名/発表者名
      藤井 渉・川崎 紅・杉浦 幸二・内藤 邦彦
    • 学会等名
      第106回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      東京農工大学(東京都府中市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [図書] 哺乳動物の発生工学2014

    • 著者名/発表者名
      内藤 邦彦
    • 総ページ数
      195
    • 出版者
      朝倉書店
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書

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公開日: 2013-05-15   更新日: 2019-07-29  

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