インフルエンザRNAポリメラーゼのウイルス増殖における分子制御

• 研究課題/領域番号: 25291016
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 一部基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 朴 三用 横浜市立大学, 生命医科学研究科, 教授 (20291932)
• 研究分担者: 杉山 佳奈子 公益財団法人神奈川科学技術アカデミー, 革新的インフルエンザウイルス創薬プロジェクト, 研究員 (20623226) ; 浦野 健 島根大学, 医学部, 教授 (70293701)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 18,330千円 (直接経費: 14,100千円、間接経費: 4,230千円); 2015年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円); 2014年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円); 2013年度: 8,710千円 (直接経費: 6,700千円、間接経費: 2,010千円)
• キーワード: インフルエンザ / RNAポリメラーゼ / 抗体 / 構造解析 / 創薬

研究成果の概要

インフルエンザRNAポリメラーゼはウイルス増殖の中心的な役割を担っており、他のタンパク質と比べ変異が起こることが少ないため新規薬剤ターゲットとして注目されている。本研究ではRNAポリメラーゼの断片に結合するモノクローナル抗体を作製し、ウイルス増殖の阻害抗体の開発をする目的で、抗原としてウイルスの増殖を阻害PA11.9抗体作製に成功した。
また、PB2のRNA結合部位からの抗体の中から二つ結合確認が認められた。抗体PB2 3-1.6については、抗原タンパク質と強く結合する事が確認された。抗体は分子生物学的研究ツールでの診断試薬として使用可能として特許出願行った（特願2014-068824）。

研究成果

• [雑誌論文] Structure-based analysis of domain function of chitin oligosaccharide deacetylase from Vibrio parahaemolyticus. (2015)
  • 著者名/発表者名: 105.Hirano T, Sugiyama K, Sakaki Y, Hakamata W, Park SY, Nishio T.
  • 雑誌名: FEBS Lett. 巻: 589(1) 号: 1 ページ: 145-51
  • DOI: 10.1016/j.febslet.2014.11.039
  • 査読あり
• [雑誌論文] The structure and conformational switching of Rap1B (2015)
  • 著者名/発表者名: H. Noguchi, T. Ikegami, A. Nagadoi, Y. O. Kamatari, S. Y. Park, J. R. H. Tame, S. Unzai
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 印刷中 号: 1 ページ: 46-51
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.04.103
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A novel 3' splice site recognition by the two zinc fingers in the U2AF small subunit. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshida H, Park S-Y, Oda T, Akiyoshi T, Sato M, Shirouzu M, Tsuda K, Kuwasako K, Unzai S, Muto Y, Urano T, Obayashi E.
  • 雑誌名: Genes Dev. 巻: 29 号: 15 ページ: 1649-1660
  • DOI: 10.1101/gad.267104.115
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A Novel Tricyclic Polyketide, Vanitaracin A, Specifically Inhibits the Entry of Hepatitis B and D Viruses by Targeting Sodium Taurocholate Cotransporting Polypeptide (2015)
  • 著者名/発表者名: Kaneko M, Watashi K, Kamisuki S, Matsunaga H, Iwamoto M, Kawai F, Ohashi H, Tsukuda S, Shimura S, Suzuki R, Aizaki H, Sugiyama M, Park SY, Ito T, Ohtani N, Sugawara F, Tanaka Y, Mizokami M, Sureau C, Wakita T
  • 雑誌名: J Virol 巻: 89 号: 23 ページ: 11945-11953
  • DOI: 10.1128/jvi.01855-15
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Capturing the Hemoglobin Allosteric Transition in a Single Crystal Form (2014)
  • 著者名/発表者名: Naoya Shibayama, Kanako Sugiyama, Jeremy R. H. Tame, and Sam-Yong Park.
  • 雑誌名: J. Am. Chem. Soc. 巻: 136 (13) 号: 13 ページ: 5097-5105
  • DOI: 10.1021/ja500380e
  • 査読あり
• [雑誌論文] The crystal structure of the active domain of Anopheles anti-platelet protein, a powerful anti-coagulant, in complex with an antibody. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K., Iyori, M., Sawaguchi, A., Akashi, S., Tame, J.R.H., Park, S.-Y., Yoshida, S.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 289 号: 23 ページ: 16303-16312
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.564526
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Computational design of a self-assembling symmetrical β-propeller protein. (2014)
  • 著者名/発表者名: Voet AR, Noguchi H, Addy C, Simoncini D, Terada D, Unzai S, Park SY, Zhang KY, Tame JR.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A. 巻: 111 号: 42 ページ: 145-151
  • DOI: 10.1073/pnas.1412768111
  • 査読あり
• [雑誌論文] Homopiperazine Derivatives as a Novel Class of Proteasome Inhibitors with a Unique Mode of Proteasome Binding. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi J.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 号: 4 ページ: e60649-e60649
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0060649
  • 査読あり
• [雑誌論文] Insight into structural diversity of influenza virus hemagglutinin. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ki Joon Cho, et al.
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 94 号: 8 ページ: 1712-1722
  • DOI: 10.1099/vir.0.051136-0
  • 査読あり
• [学会発表] Structural and functional insights into a photoactivated adenylyl cyclase (2015)
  • 著者名/発表者名: 73.Mio Ohki, Kanako Sugiyama, Fumihiro Kawai, Shigeru Matsunaga, Naoya Shibayama, Mineo Iseki, Sam-Yong Park.
  • 学会等名: 第53回日本生物物理学会
  • 発表場所: 金沢大学
  • 年月日: 2015-09-13
• [学会発表] シアノバクテリア由来の新規光活性化アデニル酸シクラーゼ (2015)
  • 著者名/発表者名: 71.伊関峰生、二瓶悠樹、田中瞳、大木規央、杉山佳奈子、河合文啓、松永茂、高橋哲郎、朴三用
  • 学会等名: 第79回日本植物学会
  • 発表場所: 新潟コンベンションセンター
  • 年月日: 2015-09-06
• [学会発表] The structural basis for an essential subunit interaction in influenza virus RNA polymerase. (2015)
  • 著者名/発表者名: 72.Hisashi Yoshida, Kanako Sugiyama, Mio Ohki, Sam-Yong Park.
  • 学会等名: European crystallographic meeting.
  • 発表場所: Rovinj, Croatia.
  • 年月日: 2015-08-23
  • 国際学会
• [学会発表] チシリン耐性黄色ブドウ球菌由来ペニシリン結合タンパク質３のX線結晶構造解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 吉田尚史、朴三用
  • 学会等名: 第14回日本蛋白質学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2015-06-25 – 2015-06-27
• [学会発表] The structural basis for an essential subunit interaction in influenza virus RNA polymerase (2014)
  • 著者名/発表者名: 1.Sam-Yong Park
  • 学会等名: International School of Crystallography
  • 発表場所: Erice, Italty.
  • 年月日: 2014-05-30 – 2014-06-08
• [学会発表] Structural Studies of the Influenza RNA-polymerase for Novel Drug Design (2013)
  • 著者名/発表者名: Sam-Yong Park
  • 学会等名: Meeting of the Italian, Spanish and Swiss crystallographic associations, MISSCA2013
  • 発表場所: Italty
  • 招待講演
• [学会発表] 新規抗ウイルス薬の開発基盤となるRNAポリメラーゼの構造解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 朴三用
  • 学会等名: CBI学会2013年大会 -生命医薬情報学連合大会-
  • 発表場所: タワーホール船堀
  • 招待講演
• [図書] 医学のあゆみ (2015)
  • 著者名/発表者名: 朴三用
  • 出版者: 医歯薬出版株式会社
• [産業財産権] インフルエンザウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼのPB2サブユニットに対するモノクローナル抗体 (2014)
  • 発明者名: 朴三用、浦野健、杉山佳奈子
  • 権利者名: 朴三用、浦野健、杉山佳奈子
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2014-068824
  • 出願年月日: 2014-03-28
  • 取得年月日: 2015-10-13
• [産業財産権] インフルエンザウイルスのＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼのＰＢ２サブユニットに対するモノクローナル抗体 (2014)
  • 発明者名: 朴三用、杉山佳奈子、成相裕子、浦野健
  • 権利者名: 朴三用、杉山佳奈子、成相裕子、浦野健
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2014-068824
  • 出願年月日: 2014-04-10