多能性幹細胞移植・遺伝子治療による複合的内耳治療戦略

• 研究課題/領域番号: 25293351
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 一部基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 耳鼻咽喉科学
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 池田 勝久 順天堂大学, 医学部, 教授 (70159614)
• 研究分担者: 美野輪 治 理化学研究所, 疾患モデル評価研究開発チーム, 開発研究員 (00181967) ; 神谷 和作 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10374159) ; 飯塚 崇 順天堂大学, 医学部, 助教 (40372932)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 17,810千円 (直接経費: 13,700千円、間接経費: 4,110千円); 2015年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2014年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円); 2013年度: 6,630千円 (直接経費: 5,100千円、間接経費: 1,530千円)
• キーワード: 遺伝性難聴 / 遺伝子治療 / アデノ随伴ウイルス / iPS細胞 / 多能性幹細胞 / 再生医療 / アデノ随伴ウィルス / 内耳前駆細胞 / 内耳有毛細胞 / 蝸牛線維細胞

研究成果の概要

Connexin (Cx) 26をコードするGjb2遺伝子は原因遺伝子の50％以上と最も高頻度に変異が検出されるが、未だ有効な根本的治療法は存在しない。我々は二種のCx26遺伝子改変難聴モデルを用いて、Cx26がギャップ結合プラーク（GJP）複合体を安定化させていることを証明した（Kamiya, 2014, J Clin Invest）。このGJPを遺伝子治療にて修復し、Cx26欠損難聴モデルマウスの聴力を有意に改善させることに成功した（Iizuka, 2015, Hum Mol Genet）。

研究成果

• [雑誌論文] Deformation of the Outer Hair Cells and the Accumulation of Caveolin-2 in Connexin 26 Deficient Mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Anzai, T., Fukunaga, I., Hatakeyama, K., Fujimoto, A., Kobayashi, K., Nishikawa, A., Aoki, T., Noda, T., Minowa, O., Ikeda, K., and Kamiya, K
  • 雑誌名: PloS one 巻: 10 号: 10 ページ: e0141258-e0141258
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0141258
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Postnatal Development and Maturation of the Vestibular Organ in Dominant-Negative Connexin 26 Transgenic Mouse. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hiroko Okada, Kazusaku Kamiya., Takashi Iizuka and Katsuhisa Ikeda.
  • 雑誌名: J Otol Rhinol 巻: S1 ページ: 37-40
  • DOI: 10.4172/2324-8785.s1-009
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Differentiation of iPS Cells to Cochlear Cells are Regulated Depending on the Part of Co-cultured Organs. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Keiko Karasawa, Kazuma Kobayashi, Asuka Miwa and Katsuhisa Ikeda.
  • 雑誌名: J Otol Rhinol 巻: S1 ページ: 34-36
  • DOI: 10.4172/2324-8785.s1-008
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Perinatal Gjb2 gene transfer rescues hearing in a mouse model of hereditary deafness. (2015)
  • 著者名/発表者名: Izuka T., Kamiya K., Gotoh S., Sugitani Y., Suzuki M., Noda T., Minowa O., Ikeda K.
  • 雑誌名: Hum. Mol.Genet. 巻: 24)13) 号: 13 ページ: 3651-3661
  • DOI: 10.1093/hmg/ddv109
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Connexin26 regulates assembly and maintenance of cochlear gap junction macromolecular complex for normal hearing (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama and Katsuhisa Ikeda
  • 雑誌名: AIP Conference Proceedings 巻: 1703 ページ: 030018-030018
  • DOI: 10.1063/1.4939333
  • 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Perinatal Gjb2 gene transfer rescues hearing in a mouse model of hereditary deafness. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iizuka T, Kamiya K, Gotoh S, Sugitani Y, Suzuki M, Noda T, Minowa O, Ikeda K.
  • 雑誌名: Hum Mol Genet. 巻: epub
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Assembly of the cochlear gap junction macromolecular complex requires connexin 26. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kamiya K, Yum SW, Kurebayashi N, Muraki M, Ogawa K, Karasawa K, Miwa A, Guo X, Gotoh S, Sugitani Y, Yamanaka H, Ito-Kawashima S, Iizuka T, Sakurai T, Noda T, Minowa O, Ikeda K.
  • 雑誌名: J Clin Invest, 巻: 124 号: 4 ページ: 1598-1607
  • DOI: 10.1172/jci67621
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Deficiency of Transcription Factor Brn4 Disrupts Cochlear Gap Junction Plaques in a Model of DFN3 Non-Syndromic Deafness. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kidokoro Y, Karasawa K, Minowa O, Sugitani Y., Noda T, Ikeda K, Kamiya K.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 9(9) 号: 9 ページ: e108216-e108216
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0108216
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dominant negative connexin26 mutation R75W causing severe hearing loss influences normal programmed cell death in postnatal organ of Corti (2014)
  • 著者名/発表者名: Ayako Inoshita, Keiko Karasawa, Megumi Funakubo, Asuka Miwa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 雑誌名: BMC genetics 巻: 15(1) 号: 1 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1186/1471-2156-15-1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Treatment with 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin ameliorated symptoms of Bartter syndrome type caused by mutated Bsnd in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nomura N, Kamiya K, Ikeda K, Yui N, Chiga M, Sohara E, Rai T, Sasaki S, Uchida S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 441 号: 3 ページ: 544-49
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.10.129
  • 査読あり
• [雑誌論文] 遺伝性難聴への内耳細胞治療法開発 Cell therapy for hereditary hearing loss with stem cell homing factors. (2013)
  • 著者名/発表者名: 神谷和作
  • 雑誌名: 日本薬理学雑誌 巻: 3 ページ: 191-4
  • 査読あり
• [学会発表] iPS細胞からのConnexin26発現細胞への分化誘導と細胞間ギャップ結合プラークの構築 (2016)
  • 著者名/発表者名: 福永一朗、畠山佳欧里、 青木徹、藤本あゆみ、 西川貴菜、美野輪治、 池田勝久、神谷和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] コネキシン26欠損マウスからのiPS細胞の樹立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 青木徹、福永一朗、 畠山佳欧里、藤本あゆみ、西川貴菜、美野輪治、 池田勝久、神谷和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] 内耳フィーダー細胞を用いたiPS細胞の分化誘導によるCx26ギャップ結合形成細胞の樹立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤本あゆみ、福永一朗、 畠山佳欧里、青木徹、 西川貴菜、池田勝久、 神谷和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] Generation of induced pluripotent stem cells form connexin26 conditional knock out mouse (2016)
  • 著者名/発表者名: Toru Aoki, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, SanDiego,CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Differentiation of mouse iPS cell into Cx26-positive cell and formation of inter cellular Cx26-gap junction plaque (2016)
  • 著者名/発表者名: Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama,Toru Aoki, Ayumi Fujimoto, Atena Nishikawa,Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, SanDiego,CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Deformation of the Outer Hair Cells and the Accumulation of Caveolin-2 in Connexin 26-Deficient Mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Takashi Anzai, Kazusaku Kamiya, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, SanDiego,CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Induction of iPS cell differetiation into Connexin26 positive cells with gap junction plaques using cochlear feeder cell (2016)
  • 著者名/発表者名: Ayumi Fujimoto, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama, Toru Aoki, Atena Nishikawa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, SanDiego,CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Various cochlear gap junction plaque reproduced in human cell line (2016)
  • 著者名/発表者名: Kaori Hatakeyama, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, SanDiego,CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Cochlear gap junction plaque, stabilized macromolecular complex composed of specific connexins (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama, Toru Aoki, Ayumi Fujimoto, Atena Nishikawa ,Takashi Anzai, Osamu Minowa, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Caveolins accumulates at the organ of Corti in GJB2 associated deafness (2015)
  • 著者名/発表者名: Takashi Anzai, Kazusaku Kamiya, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Reproduction of various types of cochlear gap junction plaques in human cell line (2015)
  • 著者名/発表者名: Kaori Hatakeyama, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Differentiation of mouse iPS cell into Cx26-positive cell and formation of inter cellular Cx26-gap junction plaque (2015)
  • 著者名/発表者名: Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama,Toru Aoki, Atena Nishikawa, Ayumi Fujimoto, Osamu Minowa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Assembly and Disruption of Cochlear Gap Junction Macromolecular Complex are Regulated by Connexin 26 (2015)
  • 著者名/発表者名: Kamiya, K1, Fukunaga I, Hatakeyama K, Anzai T, Minowa, O, Ikeda, K
  • 学会等名: ARO midwinter meeting
  • 発表場所: 米国 メリーランド州 ボルチモア
  • 年月日: 2015-02-20 – 2015-02-24
• [学会発表] The activation of stem cell homing factors highly induce the cochlear invasion of bone marrow mesenchymal stem cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Keiko Karasawa, Asuka Miwa, Osamu Minowa, Megumi Funakubo1, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 37th MidWinter Meeting
  • 発表場所: 米国 サンディエゴ
  • 招待講演