生物発光共鳴エネルギー移動機構を利用した低分子化合物の光イメージング法の開発

• 研究課題/領域番号: 25350983
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ケミカルバイオロジー
• 研究機関: 国立研究開発法人産業技術総合研究所
• 研究代表者: 呉 純 国立研究開発法人産業技術総合研究所, バイオメディカル研究部門, 主任研究員 (90415646)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2015年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 発光プローブ / ペプチド / ファージ / 生物発光共エネルギー移動 / ルシフェラーゼ / 蛍光タンパク質 / 生物発光共鳴エネルギー移動 / アデノシン三リン酸 / スクリーニング / アプタマー / スクリーニングこ

研究成果の概要

本研究では、生物発光共鳴エネルギー移動機構とファージディスプレイ技術を利用した低分子代謝産物の光プローブの創製ならびにその測定法の開発を行った。まず、低分子化合物S-アデノシル-L-ホモシステインに結合する二つのペプチドの探索を行った。次に、２つのペプチドをつなぐリンカー配列が選定され、ルシフェラーゼと蛍光タンパク質の間に挿入したDNAコンストラクトを調製した。さらに、融合タンパク質の生物発光共鳴エネルギー移動を利用したSAHの観察を試みた。

研究成果

• [雑誌論文] Selection of a mimotope peptide of S-adenosyl-L-homocysteine and its application in immunoassays. (2013)
  • 著者名/発表者名: Wu C. Tzertzinis G.
  • 雑誌名: Molecules 巻: 18 号: 10 ページ: 13020-13026
  • DOI: 10.3390/molecules181013020
  • 査読あり
• [学会発表] 変異導入によるCypridina noctiluca由来分泌型ルシフェラーゼの発光特性変化 (2015)
  • 著者名/発表者名: 西宮佳志、森田陽介、呉純、近江谷克裕、扇谷悟、森田 直樹
  • 学会等名: 日本蛋白質科学会
  • 発表場所: あわぎんホール(徳島市)
  • 年月日: 2015-06-26