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分子進化工学的手法によるカルシウムチャネルサブファミリーを識別するペプチドの創製

研究課題

研究課題/領域番号 25350984
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 ケミカルバイオロジー
研究機関国立研究開発法人産業技術総合研究所

研究代表者

木村 忠史  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 創薬基盤研究部門, 主任研究員 (60344214)

研究分担者 久保 泰  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 創薬分子プロファイリング研究センター, 副センター長 (10178030)
亀山 仁彦  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 企画本部, 総括企画主幹 (50224697)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2015年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2013年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
キーワードペプチド / カルシウムチャネル / PERISS法 / 電気生理 / 大腸菌 / ICK / イオンチャネル / 電位センサー / 進化分子工学 / パッチクランプ / パドルキメラ
研究成果の概要

ヒトKv2.1を内膜に強制発現させた大腸菌を抗生物質処理することによりスネーク状にした後、外膜を酵素処理で剥がすことによって直径約5-10ミクロンの大腸菌巨大スフェロプラストを得、この大腸菌巨大スフェロプラストを自動パッチクランプ装置に適用することにより安定にパッチクランプによる電流測定が可能とする技術を開発した。更にICKペプチドが各種タンパク質分解酵素の耐性を持つことを明かにした。これらの知見は、本研究の基礎となるものである。低閾値電位依存性カルシウムチャネルのパドルキメラを作製し、PERISS法を適用することにより新規ペプチドの創製を継続している。

報告書

(4件)
  • 2015 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2014 実施状況報告書
  • 2013 実施状況報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] High proteolytic resistance of spider-derived inhibitor cystine knots2015

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Kikuchi, Mika Sugiura and Tadashi Kimura
    • 雑誌名

      International Journal of Peptides

      巻: 2015 ページ: 537508-537508

    • DOI

      10.1155/2015/537508

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] The application of the Escherichia coli giant spheroplast for drug screening with automated planar patch clamp system2015

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Kikuchi, Mika Sugiura, Chizuko Nishizawa-Harada and Tadashi Kimura
    • 雑誌名

      Biotechnology Reports

      巻: 7 ページ: 17-23

    • DOI

      10.1016/j.btre.2015.04.007

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] 標的分子とタンパク質ライブラリーの今日発現系によるペプチド創製2014

    • 著者名/発表者名
      木村忠史
    • 雑誌名

      化学工業

      巻: Vol.65, No1265 ページ: 19-25

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 謝辞記載あり
  • [学会発表] ICKペプチドのプロテアーゼ耐性の検討2016

    • 著者名/発表者名
      木村忠史
    • 学会等名
      日本薬学会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2016-03-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ICK peptides, their proteolysis-resistance2016

    • 著者名/発表者名
      Tadashi Kimura
    • 学会等名
      AsiaTIDES2016
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2016-02-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会

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公開日: 2014-07-25   更新日: 2019-07-29  

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