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部位特異的組換えにおけるドナー選択制御機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 25440005
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 分子生物学
研究機関東京工業大学

研究代表者

筒井 康博  東京工業大学, 生命理工学研究科, 助教 (00390625)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2014年度)
配分額 *注記
5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円)
2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2013年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワード相同組換え / 分裂酵母 / 接合型変換 / DNA組換え
研究実績の概要

相同組換えは、生物種多様性に寄与する一方で、DNA損傷に対する修復に働きゲノム安定性維持に深く関わる。分裂酵母のホモタリックな野生型株(h90)において、相同組換え機構は接合型変換にも働く。分裂酵母の接合型には、Plus(P)とMinus(M)があり、mat1遺伝子座に入る遺伝情報によって決定されている。接合型変換は、mat1遺伝子座とサイレントなドナー遺伝子座(mat2Pもしくはmat3M)との間で起こり、前者がレシピエント、後者の片方がドナーとなる一方向性の遺伝子変換である。この際、上記2つの遺伝子座がドナー候補となるが、その選択は細胞の接合型(つまり、mat1座に入っている遺伝情報)により厳密に制御されており、この制御によって、P→M、M→Pへの効率的な変換が保障されている。これまでに、Class Ibグループに分類されるSwi2、Swi5、Swi6の少なくとも3種がドナー選択制御に働くことが示唆されているが、ドナー制御機構の全体像は未だ不明な点が多く残されている。これまでの知見から、未だ同定されていないClass Ib因子が存在することが予想されたため、本研究では、分裂酵母破壊株ライブラリーを用いてClass Ib因子のスクリーニング、及び、得られた候補因子の機能解析を計画した。
破壊株ライブラリーがh+株(h90派生型で、接合型変換は起こらないが、カセット間の組換えは起こる)バックグラウンドで作製されたものであるため、当初の計画では、これを利用してスクリーニングを行なう予定であった。しかしながら、前年度の計画実施の初期段階でh90株でスクリーニングを行なった方が厳密性が高いことが判明したため、掛け合わせによって全ての破壊株のh90株を作製し、スクリーニングすることとした。今年度は、約1000株の構築とスクリーニングを実施し、約20種類の候補因子を同定した。

報告書

(2件)
  • 2014 実績報告書
  • 2013 実施状況報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (11件)

  • [雑誌論文] Multiple regulation of rad51-mediated homologous recombination by fission yeast fbh12014

    • 著者名/発表者名
      Tsutsui Y, Kurokawa Y, Ito K, Siddique MS, Kawano Y, Yamao F and Iwasaki H.
    • 雑誌名

      PLoS Genetics

      巻: 28 号: 8 ページ: e1004542-e1004542

    • DOI

      10.1371/journal.pgen.1004542

    • NAID

      120007115992

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Swi5-Sfr1 protein stimulates Rad51-mediated DNA strand exchange reaction through organization of DNA bases in the presynaptic filament.2014

    • 著者名/発表者名
      Fornander LH, Renodon-Corniere A, Kuwabara N, Ito K, Tsutsui Y, Shimizu T, Iwasaki H, Norden B, Takahashi M.
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Res.

      巻: 42 号: 4 ページ: 2358-2365

    • DOI

      10.1093/nar/gkt1257

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Dual regulation of Dmc1-driven DNA strand exchange by Swi5-Sfr1 activation and Rad22 inhibition.2013

    • 著者名/発表者名
      Murayama Y, Kurokawa Y, Tsutsui Y, Iwasaki H.
    • 雑誌名

      Genes & Development

      巻: 27 号: 21 ページ: 2299-2304

    • DOI

      10.1101/gad.218693.113

    • NAID

      120007115993

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Fbh1 versatilely regulates Rad51-mediated homologous recombination in fission yeast2014

    • 著者名/発表者名
      Yasuhiro Tsutsui, Kentaro Ito, Yumiko Kurokawa and Hiroshi Iwasaki
    • 学会等名
      9th 3R Sumposium
    • 発表場所
      静岡県御殿場市
    • 年月日
      2014-11-17 – 2014-11-21
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 分裂酵母Fボックスヘリカーゼによる相同組換えの多面的制御機構2014

    • 著者名/発表者名
      筒井康博、黒川裕美子、伊藤健太郎、川野由美子、 山尾文明、岩﨑博史
    • 学会等名
      第87回日本生化学会大会
    • 発表場所
      京都府京都市
    • 年月日
      2014-10-15 – 2014-10-18
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Fission yeast Fbh1 regulates Rad51-mediated homologous recombination2014

    • 著者名/発表者名
      Yasuhiro Tsutsui, Kentaro Ito, Yumiko Kurokawa and Hiroshi Iwasaki
    • 学会等名
      4th RecA meeting
    • 発表場所
      Gyeongsan, Republic of Korea
    • 年月日
      2014-10-05 – 2014-10-08
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 分裂酵母Fbh1ヘリカーゼによるRad51リコンビナーゼ制御機構の解析2014

    • 著者名/発表者名
      筒井康博、伊藤健太郎、黒川裕美子、岩﨑博史
    • 学会等名
      第86回遺伝学会
    • 発表場所
      滋賀県長浜市
    • 年月日
      2014-09-17 – 2014-09-19
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Dual roles of fission yeast F-box DNA helicase Fbh1 during homologous recombination2013

    • 著者名/発表者名
      Yasuhiro Tsutsui, Yumiko Kurokawa, Yumiko Kawano, Fumiaki Yamao, Hiroshi Iwasaki
    • 学会等名
      EMBO Conference Pombe 2013: 7th International Fission Yeast Meeting
    • 発表場所
      University of London (London, UK)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Multiple regulation of Rad51-mediated homologous recombination by fission yeast F-box DNA helicase Fbh12013

    • 著者名/発表者名
      Yasuhiro Tsutsui, Yumiko Kurokawa, Yumiko Kawano, Fumiaki Yamao, Hiroshi Iwasaki
    • 学会等名
      Message from yeast to Epigenetics ~Yeast clarifies the frontiers of life science~
    • 発表場所
      グランディア芳泉(福井県あわら市)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 相同組換えにおける分裂酵母Fbh1の2つの役割2013

    • 著者名/発表者名
      筒井康博、黒川裕美子、川野由美子、山尾文明、岩﨑博史
    • 学会等名
      日本遺伝学会第85回大会(横浜)
    • 発表場所
      慶応義塾大学日吉キャンパス(神奈川県横浜市)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 分裂酵母の接合型変換におけるドナー選択機構の解析2013

    • 著者名/発表者名
      筒井康博
    • 学会等名
      国立遺伝学研究所研究会「染色体DNAの安定維持の分子メカニズム」
    • 発表場所
      国立遺伝学研究所(静岡県三島市)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Multiple regulation of Rad51-mediated homologous recombination by fission yeast Fbh12013

    • 著者名/発表者名
      Yasuhiro Tsutsui
    • 学会等名
      JSPS二国間交流事業セミナー The 3rd International conference onNew Frontier of the Research on RecA-family recombinases and their accessory proteins
    • 発表場所
      hotel Mercure Nantes Central (Nantes, France)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 分裂酵母Fbh1ヘリカーゼによる相同組換えの多様な制御機構2013

    • 著者名/発表者名
      筒井康博、黒川裕美子、川野由美子、山尾文明 、岩崎博史
    • 学会等名
      第22回 DNA複製・組換え・修復ワークショップ
    • 発表場所
      ホテルニュー水戸屋(宮城県仙台市)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 分裂酵母の接合型変換におけるドナー選択機構の解析2013

    • 著者名/発表者名
      筒井康博、黒田歩、岩﨑博史
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル(兵庫県神戸市)
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書

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公開日: 2014-07-25   更新日: 2019-07-29  

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