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病原性真菌におけるスフィンゴ脂質様マイコトキシン産生機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 25440036
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 構造生物化学
研究機関大阪医科大学

研究代表者

生城 浩子  大阪医科大学, 医学部, 講師 (10280702)

連携研究者 宮原 郁子  大阪市立大学, 大学院理学研究科, 准教授 (40271176)
生城 真一  富山県立大学, 工学部, 教授 (50244679)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円)
2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
キーワード可溶性タンパク質 / マイコトキシン産生 / 大腸菌内発現 / 酵母内発現系 / 結晶構造解析 / スフィンゴ脂質 / 難発現性タンパク質 / 活性測定系 / 酵素 / フモニシン / セリンパルミトイル転移酵素
研究成果の概要

フサリウム属真菌が産生するマイコトキシンの一種であるフモニシンB1の生合成関与の酵素群のうち、key unitであるFum8pとFum13pの異種発現系を構築した。Fum13pを電気泳動上単一バンドにまで精製することに成功し、酵素学的な特徴付けを行うとともに、タンパク質の結晶化を試みた。Fum8p発現ミクロソームと精製Fum13p、細菌由来セリンパルミトイル転移酵素(SPT)で合成した基質を組み合わせ、放射性同位体標識基質を用いない安価な活性測定系を構築した。フモニシン合成阻害剤の候補化合物のスクリーニング系として有用である。

報告書

(5件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 2013 実施状況報告書
  • 研究成果

    (26件)

すべて 2016 2015 2014 2013 その他

すべて 国際共同研究 (2件) 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (19件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] University of California, San Francisco(米国)

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [国際共同研究] University of California, Riverside(米国)

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [雑誌論文] ER stress stimulates production of the key antimicrobial peptide, cathelicidin, by forming a previously unidentified intracellular S1P signaling complex.2016

    • 著者名/発表者名
      Park K, Ikushiro H, Seo HS, Shin KO, Kim YI, Kim JY, Lee YM, Yano T, Holleran WM, Elias P, Uchida Y.
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci U S A.

      巻: 113 号: 10

    • DOI

      10.1073/pnas.1504555113

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] セリンパルミトイル転移酵素の反応制御機構2015

    • 著者名/発表者名
      生城浩子
    • 雑誌名

      生化学

      巻: 87 号: 3 ページ: 298-307

    • DOI

      10.14952/SEIKAGAKU.2015.870298

    • ISSN
      0037-1017
    • 年月日
      2015-06-25
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] 高度好熱菌由来ホモセリン脱水素酵素の結晶学的研究2014

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太,生城浩子,澤井大樹,林秀行,神谷信夫,宮原郁子
    • 雑誌名

      ビタミン

      巻: 88 ページ: 358-365

    • NAID

      110009833078

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] 高度好熱菌由来ホモセリン脱水素酵素の結晶構造解析2014

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太,生城浩子,澤井大樹,林秀行,神谷信夫,宮原郁子
    • 雑誌名

      ビタミン

      巻: 88

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] ホモセリン脱水素酵素・アスパラギン酸-4-セミアルデヒド複合体構造から推定される酵素反応機構2016

    • 著者名/発表者名
      水田啓文、生城浩子、赤井翔太、矢野貴人、神谷信夫、宮原郁子
    • 学会等名
      第89回日本生化学会大会
    • 発表場所
      宮城県仙台国際センター
    • 年月日
      2016-09-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Caulobacter crescentus由来5-アミノレブリン酸合成酵素の生化学的性情解析2016

    • 著者名/発表者名
      生城浩子、主馬野祐希、宮原郁子、神谷信夫、矢野貴人
    • 学会等名
      第89回日本生化学会大会
    • 発表場所
      宮城県仙台国際センター
    • 年月日
      2016-09-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Elucidation of catalytic mechanism in homoserine dehydrogenase based on crystal structures2016

    • 著者名/発表者名
      Shota Akai, Hiroko Ikushiro, Daiki Sawai, Hideyuki Hayashi, Takato Yano, Nobuo Kamiya, Ikuko Miyahara
    • 学会等名
      The 5th International Conference on Cofactors & Active Enzyme Molecule 2016
    • 発表場所
      富山県黒部市宇奈月国際会館「セレネ」
    • 年月日
      2016-09-04
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Reaction control mechanism of 5-aminolevulinate synthase2016

    • 著者名/発表者名
      Yuki Shimeno, Hiroko Ikushiro, Takato Yano, Nobuo Kamiya, and Ikuko Miyahara
    • 学会等名
      The 5th International Conference on Cofactors & Active Enzyme Molecule 2016
    • 発表場所
      富山県黒部市宇奈月国際会館「セレネ」
    • 年月日
      2016-09-04
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] グリシン複合体の結晶構造が明らかにしたアミノレブリン酸合成酵素における中間体形成の制御2016

    • 著者名/発表者名
      主馬野祐希,生城 浩子,矢野 貴人,神谷 信夫,宮原 郁子
    • 学会等名
      日本ビタミン学会
    • 発表場所
      富山国際会議場
    • 年月日
      2016-06-17
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Caulobacter crescentus 由来アミノレブリン酸合成酵素の グリシン複合体の結晶構造2016

    • 著者名/発表者名
      主馬野祐希,生城浩子,矢野貴人,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      2015年量子ビームサイエンスフェスタ(第7回MLFシンポジウム,第33回PFシンポジウム)
    • 発表場所
      つくば国際会議場(エポカルつくば)
    • 年月日
      2016-03-15
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Caulobacter crescentus由来アミノレブリン酸合成酵素の結晶構造解析2015

    • 著者名/発表者名
      主馬野祐希,生城浩子,矢野貴人,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      BMB2015(第38回日本分子生物学会年会,第88回日本生化学会大会 合同大会))
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] アスパラギン酸セミアルデヒド結合型ホモセリン脱水素酵素のX線結晶構造解析2015

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太,水田啓文,生城浩子,澤井大樹,林秀行,矢野貴人,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      BMB2015(第38回日本分子生物学会年会,第88回日本生化学会大会 合同大会))
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] セリンヒドロキシメチル基転移酵素の活性部位の pH 依存的な挙動.2015

    • 著者名/発表者名
      主馬野祐希,湯川直樹,生城浩子,林秀行,矢野貴人,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      日本結晶学会平成27年度年会
    • 発表場所
      大阪府立大学(中百舌鳥キャンパス)
    • 年月日
      2015-10-17
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] セリンヒドロキシメチル基転移酵素のキノノイド中間体の構造2015

    • 著者名/発表者名
      主馬野祐希,湯川直樹,生城浩子,林秀行,矢野貴人,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      日本ビタミン学会第67回大会
    • 発表場所
      奈良県新公会堂
    • 年月日
      2015-06-05
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] 高度好熱菌由来ホモセリン脱水素酵素の基質認識2014

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太, 生城浩子, 澤井大樹, 林秀行, 矢野貴人, 神谷信夫, 宮原郁子
    • 学会等名
      日本結晶学会
    • 発表場所
      東京都文京区東京大学農学部
    • 年月日
      2014-11-01 – 2014-11-03
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] X-ray Analysis of homoserine dehydrogenase from Thermus thermophiles HB82014

    • 著者名/発表者名
      S. Akai, H. Ikushiro, D. Sawai, H. Hayashi, T. Yano, N. Kamiya, I. Miyahara
    • 学会等名
      The Fourth International Conference on Cofactors (ICC-04)
    • 発表場所
      Casa della Musica, Parma, Italy
    • 年月日
      2014-08-26 – 2014-08-28
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] セリンパルミトイル転移酵素:近年の構造学的研究から得られた知見2014

    • 著者名/発表者名
      生城浩子
    • 学会等名
      スフィンゴテラピー研究会
    • 発表場所
      石川県加賀市河鹿荘
    • 年月日
      2014-07-18 – 2014-07-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 高度好熱菌由来ホモセリン脱水素酵素の三元複合体結晶構造解析2014

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太, 生城浩子, 澤井大樹, 林秀行, 矢野貴人, 神谷信夫, 宮原郁子
    • 学会等名
      日本ビタミン学会
    • 発表場所
      兵庫県姫路市姫路商工会議所
    • 年月日
      2014-06-13 – 2014-06-14
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 基質アナログ型結晶構造から解明されたセリンヒドロキシメチル基転移酵素の反応機構2014

    • 著者名/発表者名
      湯川直樹,生城浩子,林秀行,後藤勝,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      第2回物構研サイエンスフェスタ
    • 発表場所
      つくば国際会議場エポカル
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 高度好熱菌由来ホモセリン脱水素酵素の結晶構造解析2013

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太,生城浩子,澤井大樹,林秀行,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      日本ビタミン学会第65回大会
    • 発表場所
      立命館大学
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] セリンパルミトイルトランスフェラーゼ三者複合体のX線結晶構造解析2013

    • 著者名/発表者名
      堅山あすか,生城浩子,林 秀行,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      第86回日本生化学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 高度好熱菌HB8由来ホモセリン脱水素酵素の基質認識機構2013

    • 著者名/発表者名
      赤井翔太,生城浩子,澤井大樹,林秀行,神谷信夫,宮原郁子
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Reaction mechanism of Serine Hydroxymetyhltransferase based on crystal structures at ultra-high resolution2013

    • 著者名/発表者名
      N. Yukawa, H. Ikushiro, H. Hayashi, M. Goto, N. Kamiya, and I. Miyahara
    • 学会等名
      4th International Symosium on Diffracton Structural Biology (ISDSB2013)
    • 発表場所
      名古屋市中小企業振興会館
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.osaka-med.ac.jp/deps/med/staff/ikushiro/

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書

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公開日: 2014-07-25   更新日: 2022-02-16  

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