ダウン症病因キナーゼＤＹＲＫ１Ａ－ＷＤＲ６８複合体の生理的機能の解明

• 研究課題/領域番号: 25440046
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 宮田 愛彦 京都大学, 生命科学研究科, 助教 (70209914)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: DYRK1A / WDR68 / TRiC/CCT / WD40ドメイン / 分子シャペロン / タンパク質キナーゼ / シグナル伝達 / タンパク質間相互作用 / キナーゼ / TCP1α

研究成果の概要

種間でよく保存されたWD40リピートタンパク質であるWDR68と結合する細胞内タンパク質を単離した。質量分析による網羅的解析から、主要な分子シャペロンであるTRiC/CCTがWDR68と結合することを明らかにした。同時に、リン酸化プロテオーム解析によりWDR68およびTRiC/CCT上のリン酸化部位を新たに決定した。更にコンピューターモデリングによってWDR68が7つのβプロペラから成るリング構造を取ることを明らかにした。また、分子シャペロンTRiC/CCTがWDR68のフォルディングと機能及び局在を支配する重要な因子であることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Protein kinase CK2 inhibition is associated with the destabilization of HIF-1α in human cancer cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Guerra, B., Rasmussen, T., Schnitzler, A., Jensen, H., Boldyreff, B., Miyata, Y., Marcussen, N., Niefind, K., and Issinger, O.G.
  • 雑誌名: Cancer Letters 巻: 356 号: 2 ページ: 751-761
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2014.10.026
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Phosphorylation, signaling, and cancer: Targets and targeting. (2015)
  • 著者名/発表者名: Marmiroli, S., Fabbro, D., Miyata, Y., Pierobon, M., and Ruzzene, M.
  • 雑誌名: Biomed. Res. Int. 巻: 2015 ページ: 601543-601543
  • DOI: 10.1155/2015/601543
  • NAID: 120005745645
  • オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] CK2 Inhibitors and the DYRK Family Protein Kinases. In “Protein Kinase CK2 Cellular Function in Normal and Disease States”, Eds. K. Ahmed, O.-G. Issinger, and R. Szyska (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 雑誌名: Advances in Biochemistry in Health and Disease (Springer International Publishing Switzerland) 巻: 12 ページ: 341-359
  • DOI: 10.1007/978-3-319-14544-0_19
  • ISBN: 9783319145433, 9783319145440
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Molecular Chaperone TRiC/CCT Binds to the Trp-Asp (WD) 40-repeat Protein WDR68 and Promotes Its Folding, Protein Kinase DYRK1A-binding, and Nuclear Accumulation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y., Shibata, T., Aoshima, M., Tsubata, T., and Nishida, E.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: 289 号: 48 ページ: 33320-33332
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.586115
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The therapeutic target Hsp90 and cancer hallmarks (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y., Nakamoto, H., and Neckers, L.
  • 雑誌名: Current Pharmaceutical Design 巻: 19 号: 3 ページ: 347-365
  • DOI: 10.2174/1381612811306030347
  • 査読あり
• [学会発表] TRiC/CCTはWD40リピートタンパク質WDR68の高次構造形成・DYRK1A結合・核局在に必須の分子シャペロンである (Essential role of TRiC/CCT chaperone in folding and function of a DYRK1A-binding WD40-repeat protein WDR68) (2015)
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、柴田猛、青島理人、津幡卓一、西田栄介
  • 学会等名: BMB2015 (第38回 日本分子生物学会年会、第88回 日本生化学会大会)
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2015-12-03
• [学会発表] Interaction of Hsp90 and Cdc37 with specific members of the DYRK/Minibrain family protein kinases (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 学会等名: Seminar in Semmelweis University, Department of Medical Chemistry
  • 発表場所: Budapest, Hungary
  • 年月日: 2015-10-07
  • 招待講演
• [学会発表] The Pivotal Role of A Molecular Chaperone Hsp90 for Cellular Signaling Protein Kinases (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 学会等名: Seminar in Hungarian Academy of Sciences, Biological Research Center, Institute of Biochemistry
  • 発表場所: Szeged, Hungary
  • 年月日: 2015-10-05
  • 招待講演
• [学会発表] Essential role of TRiC/CCT in folding and function of a DYRK1A-binding WD40-repeat protein WDR68 (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y., Shibata, T., Aoshima, M., Tsubata, T., and Nishida, E.
  • 学会等名: Gordon Research Conference on “Stress Proteins in Growth, Development and Disease”
  • 発表場所: Lucca-Barga, Italy
  • 年月日: 2015-07-05
• [学会発表] The Pivotal Role of A Molecular Chaperone Hsp90 for Cellular Signaling Protein Kinases (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 学会等名: The 17th symposium, Graduate School of Biostudies, Kyoto University (第17回 京都大学・大学院生命科学研究科 シンポジウム)
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2015-07-02
• [学会発表] Functional regulation of DYRK family protein kinases by cellular binding partners
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y., and Nishida, E.
  • 学会等名: 7th International Conference on Protein Kinase CK2
  • 発表場所: Lublin, Poland
  • 招待講演
• [学会発表] DYRKファミリーキナーゼの細胞内結合タンパク質による機能制御
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦、西田栄介
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会 ワークショップ 「キナーゼ・シグナルから生理機能へ」
  • 発表場所: 神戸
  • 招待講演
• [学会発表] DYRKファミリーキナーゼとキナーゼシグナルを媒介するWDR68
  • 著者名/発表者名: 宮田愛彦
  • 学会等名: 蛋白研セミナー 「キナーゼ・シグナリング研究の進展」
  • 発表場所: 大阪
  • 招待講演
• [図書] CK2 Inhibitors and the DYRK Family Protein Kinases. In Advances in Biochemistry in Health and Disease Vol.12: “Protein Kinase CK2 Cellular Function in Normal and Disease States”, Eds. K. Ahmed, O.-G. Issinger, and R. Szyska, pp.341-359. (DOI 10.1007/978-3-319-14544-0_19) (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 総ページ数: 378
  • 出版者: Springer International Publishing Switzerland
• [図書] The pivotal role of CK2 in the kinome-targeting Hsp90 chaperone machinery. “The Wiley-IUBMB Series on Biochemistry and Molecular Biology: Protein Kinase CK2”, ed. L.A.Pinna, pp.205-238. (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyata, Y.
  • 総ページ数: 460
  • 出版者: Wiley-Blackwell Publishing (John Wiley & Sons, Inc., Publication)
• [備考] 京都大学 大学院生命科学研究科 多細胞体構築学講座 シグナル伝達学分野 宮田 愛彦 Web Site
  • URL: http://www.y-miyata.lif.kyoto-u.ac.jp/index.htm
• [備考] 京都大学 大学院生命科学研究科 多細胞体構築学講座 シグナル伝達学分野 助教 宮田 愛彦
  • URL: http://www.y-miyata.lif.kyoto-u.ac.jp/index.htm