高解像度質量分析イメージングによる線虫C.エレガンスの細胞構造解析

• 研究課題/領域番号: 25440082
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 細胞生物学
• 研究機関: 神奈川県立保健福祉大学 (2015); 浜松医科大学 (2013-2014)
• 研究代表者: 木村 芳滋 神奈川県立保健福祉大学, 保健福祉学部, 准教授 (90274703)
• 連携研究者: 後藤 光利 浜松医科大学, 医学部, 教授 (20302664)
• 研究協力者: ハミード サイラ ; 後藤 健介 ; 石崎 逸子 ; 眞田 則明 ; 鈴木 真由美
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
• キーワード: 質量分析イメージング法 / TOF-SIMS / 線虫 / メタボローム / イメージングマススペクトロメトリー / メタボローム解析

研究成果の概要

本研究は高解像度な質量分析イメージング法(IMS)であるTOF-SIMS法を線虫C.エレガンスに応用して生体分子の細胞内分布を解析することを目的とし，アルバックファイ社TRIFT Vシステムでイメージング解析を行った．再現性高く，かつ簡便に高解像度のイメージを得るためにはパラホルムアルデヒド固定した線虫の凍結切片が最適であった．また，Arガスクラスターイオンビーム(Ar-GCIB)で切片表面のクリーニング(スパッタリング)をしてやることにより、ステアリン酸(SA)，オレイン酸(OA)，エイコサペンタエン酸(EPA)などの多数の脂肪酸の検出感度が大幅に上昇し，高解像度のイメージが得られた．

研究成果

• [雑誌論文] Direct profiling of the phospholipid composition of adult Caenorhabditis elegans using whole-body imaging mass spectrometry. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hameed S, Ikegami K, Sugiyama E, Matsushita S, Kimura Y, Hayasaka T, Sugiura Y, Masaki N, Waki M, Ohta I, Hossen MA, Setou M
  • 雑誌名: Anal Bioanal Chem 巻: 407 号: 25 ページ: 7589-7602
  • DOI: 10.1007/s00216-015-8932-7
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] Intraflagellar transport in sensory cilia is tuned by environmental stimuli by tubulin polyglutamylation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y. Konno, A., Tsutsumi, K., Hameed, S., Ikegami, K., Setou, M.
  • 学会等名: 北米細胞生物学会
  • 発表場所: ニューオーリンズ(米国)
• [学会発表] Environmental stimulus-responsive behavioral plasticity is regulated by intraflagellar transport of sensory cilia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y., Tsutsumi, K., Konno, A., Ikegami, K., Hameed, S, Kaplan, O.I., Teramoto,T., Fujiwara, M., Kunitomo, H., Ishihara, K., Iino, Y., Blacque, O.E., Setou, M.
  • 学会等名: FASEB Meeting ----Biology of Cilia and Flagella
  • 発表場所: ナイアガラフォールズ(米国)
• [学会発表] Starvation-responsive behavioral plasticity is tuned by tubulin polyglutamylation in sensory cilia (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y., Tsutsumi, K., Konno, A., Ikegami, K., Hameed, S, Kaplan, O.I., Teramoto,T., Fujiwara, M., Kunitomo, H., Ishihara, K., Iino, Y., Blacque, O.E., Setou, M
  • 学会等名: 国際線虫ミーティング
  • 発表場所: ロサンゼルス(米国)
• [学会発表] Environmental responsiveness in intraflagellar transport is regulated by tubulin polyglutamylation. (2013)
  • 著者名/発表者名: 木村芳滋, 紺野在, Saira Hameed, 瀬藤光利
  • 学会等名: 日本細胞生物学会
  • 発表場所: 名古屋