副腎皮質病態解析のためのtargeted steroidomics研究

• 研究課題/領域番号: 25460042
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 横浜薬科大学 (2015); 東北薬科大学 (2013-2014)
• 研究代表者: 山下 幸和 横浜薬科大学, 薬学部, 教授 (80382670)
• 研究分担者: 大野 賢一 東北薬科大学, 薬学部, 准教授 (20347272) ; 加藤 創 東北薬科大学, 薬学部, 助教 (80584458) ; 小松 祥子 東北薬科大学, 薬学部, 助手 (00438566)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: LC-ESI-MS/MS法 / targeted steroidomics / 副腎皮質ホルモン / 微量定量法 / プロトン親和性誘導体 / LC-ESI-MS/MS / 鑑別診断法 / LC-ESI-MS法 / 臨床診断法

研究成果の概要

染色体異常等による副腎の過形成/低形成に基づく原発性の副腎皮質ホルモン産生異常は難治性のものが多く、早期の診断と治療が必要となる。本研究では、このような疾患の早期診断を目的として、コルチゾールおよびその生合成前駆体/代謝関連化合物の微量定量を、少量の生体試料で行えるよう、プロトン親和性誘導体とLC-ESI-MS/MS法を用いて構築した。本研究では、定量用の重水素標識内標準物質の調整、18－オキソコルチゾールの合成をはじめ、各種プロトン親和性誘導体の有用性を精査し、ピコリン酸エステル誘導体が最も優れていることを見出し、誘導体の副腎皮質ホルモン産生異常疾患の診断への応用を展開した。

研究成果

• [雑誌論文] Measurement of Peripheral Plasma 18-Oxo-cortisol Can Discriminate Uni-lateral Adenoma From Bilateral Diseases in Patients With Primary Aldosteronism (2015)
  • 著者名/発表者名: F. Satoh, R. Morimoto, Y. Ono, Y. Iwakura, K Omata, M. Kudo, K. Takase, K. Seiji, H. Sasamoto, S. Honma, M. Okuyama, K. Yamashita, CE.Gomez-Sanchez, WE. Rainey, Y. Arai, H. Sasano, Y. Nakamura, S. Ito
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 65 号: 5 ページ: 1096-1102
  • DOI: 10.1161/hypertensionaha.114.04453
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Simultaneous quantification of salivary hydroxybutyrates as possible markers of amino acid and fatty acid catabolic pathways by LC-ESI-MS/MS (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki T, Honda A, Ikegami T, Iwamoto J, Monma T, Hirayama T, Saito Y, Yamashita K, Matsuzaki Y. . . .
  • 雑誌名: Springerplus 巻: 4 号: 1 ページ: 494-494
  • DOI: 10.1186/s40064-015-1304-0
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Recernt developement of chemical derivatization in LC-MS for biomedical approaches (2015)
  • 著者名/発表者名: Ohno K, Yamashita K
  • 雑誌名: Bioanalysis 巻: 7 号: 19 ページ: 2489-2499
  • DOI: 10.4155/bio.15.180
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] An innovative LC-MS/MS-based method for determining CYP17 and CYP19 activity in the adipose tissue of pre- and postmenoposal and ovariectomized women using 13C-labeled steroid substrates (2014)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Kinoshita, Seijiro Honma, Yasuhiro Shibata, kouwa Yamashita, Yoko Watanabe, Hitoe Maekubo, Mitsunobu Okuyama, Akiko Takashima, Naoki Takeshita
  • 雑誌名: J. Clin. Endocrinol. Metab. 巻: 99 ページ: 1339-1347
  • 査読あり
• [学会発表] LC-ESI-MS/MSによるコルチゾール生合成関連ステロイドの一斉定量 (2016)
  • 著者名/発表者名: 小松祥子、榊 教克、今 華恵、藤村 務、山下幸和
  • 学会等名: 日本薬学会第136年会
  • 発表場所: 横浜（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-03-28
• [学会発表] LC-ESI-MS/MSによる血清グルココルチコイドおよびその前駆体の一斉分析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小松祥子、齋藤彩夏、榊教克、今 華慧恵、齋藤 滋、藤村 務、山下幸和
  • 学会等名: 第54回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 盛岡(岩手医科大学）
  • 年月日: 2015-09-26
• [学会発表] 改良Marfey法を用いた微生物細胞内アミノ酸の検出法に関する研究 (2015)
  • 著者名/発表者名: 加藤 創、高橋和弘、原田健一、山下幸和、藤村 務
  • 学会等名: 第54回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 盛岡(岩手医科大学）
  • 年月日: 2015-09-26
• [学会発表] 胆汁酸のピコリルエステル化による高感度LC-MS分 (2015)
  • 著者名/発表者名: 加藤 創, 三塚 進, 加藤 杏奈, 阿邊 満夕子, 池田 麻希, 山下 幸和
  • 学会等名: 日本薬学会第135年会
  • 発表場所: 神戸（兵庫医療大学ほか）
  • 年月日: 2015-03-26 – 2015-03-28
• [学会発表] コレステロールの前駆体および水酸化代謝物のLC-ESI-MS/MS分析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小松 祥子, 千葉 淳, 都澤 優, 宮本 和明, 山下 幸和
  • 学会等名: 日本薬学会第135年会
  • 発表場所: 神戸（兵庫医療大学ほか）
  • 年月日: 2015-03-26 – 2015-03-28
• [学会発表] Aldosteroneのdimethylethylsilylおよびdimethylisopropylsilyl誘導体化とGC-MS分析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小松 祥子, 大池 裕貴, 山下 幸和
  • 学会等名: 第53回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: いわき（いわき明星大学）
  • 年月日: 2014-10-05
• [学会発表] 質量分析による生体試料中アンドロゲンの高感度分析法の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大野賢一、山下幸和
  • 学会等名: 第25回日本臨床化学会東北支部総会
  • 発表場所: 盛岡（岩手医科大学）
  • 年月日: 2014-08-09
• [学会発表] LC-ESI-MS/MS法による3b-HSD活性評価を目的とした基礎検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小松祥子、榊 教克、山下幸和
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] Microdetermination of labile estrogen-o-quinones and their cysteine conjugates by high performance liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry (2013)
  • 著者名/発表者名: Kouwa Yamashita, Miki Shiratori, Emi Kondo, Sachiko Komatsu, Hajime Katoh, Ken-ichi Ohno
  • 学会等名: The 39th International Symposium on High-Performance-Liquid-Phase Separation and Related Technique
  • 発表場所: Amsterdam, The Netherlands
• [学会発表] LC-ESI-MS/MS法による水酸化ステロイドのメタボローム解析(VII) ステロール類のピコリン酸およびN-メチルピペリジンカルボン酸誘導体の調製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 小松祥子、都澤 優、千葉 淳、山崎敬子、山下幸和、沼澤光輝
  • 学会等名: 第52回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] アンドロゲンの高感度分析法開発と唾液試料への応用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 田村智美、長谷川智美、大野賢一、山下幸和
  • 学会等名: 第52回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 仙台
• [備考] 東北医科薬科大学 臨床分析化学研究室 論文
  • URL: http://www.tohoku-mpu.ac.jp/laboratory/rinsyob/ronbun.htnml
• [備考] 教員紹介（山下幸和 横浜薬科大学薬学部）
• [備考] 東北薬科大学臨床分析化学教室ホームページ（研究内容、発表論文）
  • URL: http://web.tohoku-pharm.ac.jp/laboratory/rinsyob/ronbun.html
• [備考] 東北薬科大学臨床分析化学教室ホームページ (発表論文）
  • URL: http://www.tohoku-pharm.ac.jp/laboratory/rinsyob/ronbun.html