マウスES細胞の未分化状態維持に関与する新規遺伝子の機能解析

• 研究課題/領域番号: 25460364
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 宮崎 純一 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10200156)
• 研究協力者: 宮崎 早月 ; 田代 文
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2015年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: ES細胞 / 未分化状態 / エピジェネティック制御 / 転写制御 / クロマチン免疫沈降 / テラトーマ / 転写因子 / ヒストン修飾 / DNAメチル化 / キメラマウス / 遺伝子

研究成果の概要

Ces1ノックアウトES細胞を用いてCes1遺伝子の未分化性維持に係わる機構を解析した。ノックアウト細胞はキメラ形成能を維持していたが、テラトーマ形成能を喪失していた。ノックアウト細胞から胚様体を形成しin vitro分化能を検討したところ、野生型ES細胞と違いは見られなかった。Zinc finger蛋白であるCES1は転写因子として機能していると考えられ、ChIP sequence法により解析した結果、特に遺伝子の転写開始点近傍に多くの結合が確認された。Ces1蛋白により発現抑制される遺伝子の転写開始点近傍に結合が多く見出され、CES1はrepressorとして機能していると推定された。

研究成果

• [雑誌論文] Gtsf1l and Gtsf2 are specifically expressed in gonocytes and spermatids but are not essential for spermatogenesis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takemoto N, Yoshimura T, Miyazaki S, TashiroF, Miyazaki J
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11 号: 3 ページ: e0150390-e0150390
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0150390
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Auto-regulation of the Sohlh1 gene by the SOHLH2/SOHLH1/SP1 complex: implications for early spermatogenesis and oogenesis (2014)
  • 著者名/発表者名: Toyoda S, Yoshimura T, Mizuta J, Miyazaki J
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 号: 7 ページ: e101681-e101681
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0101681
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Functional analysis of Tcl1 using Tcl1-deficient mouse embryonic stem cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki T, Miyazaki S, Ashida M, Tanaka T, Tashiro F, Miyazaki J
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 号: 8 ページ: e71645-e71645
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0071645
  • 査読あり
• [学会発表] Znフィンガータンパク質Ces1は、Suv39hに結合してヒストンH3K9メチル化を抑制し、胎仔成長や生殖細胞の分化を制御する (2015)
  • 著者名/発表者名: 松浦 巧、宮崎竜志、宮崎早月、田代 文、宮崎純一
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] Mouse GTSF1 is essential for MILI-directed secondary piRNA processing in prospermatogonia (2015)
  • 著者名/発表者名: Takuji Yoshimura, Noriaki Takemoto, Satomi Kuramochi-Miyagawa, Toshiaki Watanabe, Yusuke Shiromoto, Akihiko Kudo, Masami Kanai-Azuma, Fumi Tashiro, Satsuki Miyazaki, Ami Katanaya, Shinichiro Chuma, Toru Nakano, and Jun-ichi Miyazaki
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] Ces1遺伝子欠損マウス胎仔におけるヒストンH3K9及びDNAメチル化レベルの亢進と胎性致死・成長遅延および始原生殖細胞の分化異常 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松浦 巧、宮崎竜志、宮崎早月、田代 文、宮崎純一
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Ces1遺伝子欠損マウスにみられる始原生殖細胞の生存・増殖・分化の異常 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松浦 巧、宮崎竜志、宮崎早月、田代 文、宮崎純一
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
• [図書] 「医学のための生命科学」 第10章 再生 (2014)
  • 著者名/発表者名: 宮崎早月、宮崎純一
  • 総ページ数: 300
  • 出版者: 南山堂