異環境に棲息する寄生蠕虫ミトコンドリア呼吸鎖のプロテオーム解析

• 研究課題/領域番号: 25460519
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 寄生虫学(含衛生動物学)
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 高宮 信三郎 順天堂大学, 医学部, 非常勤講師 (90138206)
• 研究分担者: 藤村 務 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員准教授 (70245778)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 寄生蠕虫 / 低酸素適応 / 呼吸鎖 / シトクロムｂ５ / ミトコンドリア / プロテオーム / 肺吸虫 / マンソン裂頭条虫 / 回虫 / シトクロムb5 / シトクロムb５

研究成果の概要

本研究は異なった組織環境に生息する寄生蠕虫を用いて, 酸素分圧に応答するミトコンドリア蛋白群, とくに呼吸鎖蛋白の発現制御を網羅的に解析することにより, その感染成立, 維持機構の一端を解明することを目的とした。インゲル消化を伴う二次元電気泳動およびショットガン法により, 嫌気的な宿主腸管に棲息する回虫と好気的自活性線虫Caenorhabditis elegansのミトコンドリア蛋白を質量分析計により比較解析したところ, それぞれの線虫に特徴的な蛋白プロファイルが得られた。皮下組織に寄生するマンソン裂頭条虫幼虫は肺吸虫と同様, 好気と嫌気の両ミトコンドリアを有することが明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] Large-scale purification of active liquid-cultured Caenorhabditis elegans using a modified Baermann apparatus. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shinzaburo Takamiya, Toshihiro Mita
  • 雑誌名: Parasitol. Int. Current Manual for Parasitological Research 巻: 65, Part B 号: 5 ページ: 580-583
  • DOI: 10.1016/j.parint.2016.03.013
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Bioinformatic identification of cytochrome b5 homologues from the parasitic nematode Ascaris suum and the free-living nematode Caenorhabditis elegans highlights the crucial role of A. suum adult-specific secretory cytochrome b5 in parasitic adaptation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takamiya S, Hashimoto M, Mita T, Yokota T, Nakajima Y, Yamakura F, Sugio S,
  • 雑誌名: Parasitol Int. 巻: 65 号: 2 ページ: 113-20
  • DOI: 10.1016/j.parint.2015.11.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Large-scale purification of active liquid-cultured Caenorhabditis elegans using a modified Baermann apparatus. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shinzaburo Takamiya, Toshihiro Mita
  • 雑誌名: Parasitol. Int. 巻: special issue 号: 5 ページ: 584-587
  • DOI: 10.1016/j.parint.2016.01.006
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Reflection: How Parasitic Helminths Adapt to Environmental Hypoxia (2014)
  • 著者名/発表者名: Takamiya S
  • 雑誌名: 順天堂醫事雑誌 巻: 60 号: 5 ページ: 432-448
  • DOI: 10.14789/jmj.60.432
  • NAID: 130005064598
  • ISSN: 2187-9737, 2188-2126
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] 自活性線虫Caenorhabditis elegans ミトコンドリアのプロテオーム解析：二次元電気泳動法とショットガン質量分析法 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高宮 信三郎、数野 彩子、三浦 芳樹、美田 敏宏
  • 学会等名: 第10回蠕虫研究会
  • 発表場所: 熱海市、ハートピア熱海
  • 年月日: 2016-11-18
• [学会発表] 分泌型シトクロムｂ５の寄生適応における生理的意義：寄生線虫における分布 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高宮 信三郎、橋本 宗明、山﨑 浩、美田 敏宏
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会
  • 発表場所: 仙台市、仙台国際センター/東北大学川内北キャンパス
  • 年月日: 2016-09-25
• [学会発表] 分泌型シトクロムb５の寄生線虫類における分布 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎、橋本宗明、山﨑浩、美田敏宏
  • 学会等名: 第85回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 宮崎県 宮崎市民プラザ
  • 年月日: 2016-03-19
• [学会発表] Spirometra erinaceieuropaeiミトコンドリアの過酸化水素生成について (2015)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎、中村 健、福田孝一、美田敏宏
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学大会 合同大会
  • 発表場所: 兵庫県 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] 岐阜県中津川市蛭川および千葉県市原市養老川支流におけるサワガニの肺吸虫メタセルカリア感染状況：教育･研究材料供給の観点から (2015)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎、杉山広、柴田勝優、飯泉恭一、川崎広明、山﨑浩、吉村堅太郎、美田敏宏
  • 学会等名: 第9回蠕虫研究会
  • 発表場所: 岩手県 つなぎ温泉、清温荘
  • 年月日: 2015-07-17
• [学会発表] Ascaris suum シトクロムb5のホモログ：特に膜蛋白型について (2015)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎, 橋本宗明, 山﨑 浩, 美田敏宏
  • 学会等名: 第84回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 三鷹 東京
  • 年月日: 2015-03-20 – 2015-03-22
• [学会発表] ブタ回虫シトクロムb５のホモログについて (2014)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎, 橋本宗明, 美田敏宏, 山崎 浩
  • 学会等名: 第8回蠕虫研究会
  • 発表場所: 札幌 北海道
  • 年月日: 2014-09-06 – 2014-09-07
• [学会発表] Bioinformatic identification of cytochrome b5 homologues from the parasitic nematode Ascaris suum and the free-living nematode Caenorhabditis elegans highlights the crucial role of A. suum adult-specific cytochrome b5 in parasitic adaptation (2014)
  • 著者名/発表者名: Takamiya S, Hashimoto M, Mita T, Yokota T, Nakajima Y, Yamakura F, Sugio S, Fujimura T, Ueno T, Yamasaki H
  • 学会等名: 13th International Congress of Parasitology
  • 発表場所: Mexico City, Mexico
  • 年月日: 2014-08-10 – 2014-08-15
• [学会発表] 異なった環境に棲息する寄生蠕虫呼吸鎖の生化学的解析：Spirometra erinaceieuropaeiミトコンドリア呼吸鎖
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎、中村 健、藤村 務、上野 隆、福田 孝一、美田敏宏
  • 学会等名: 第7回蠕虫研究会
  • 発表場所: 神奈川県 藤沢市 KKR江の島ニュー向洋
• [学会発表] Spirometra erinaceieuropaeiミトコンドリアのコハク酸酸化系
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎、中村 健、福田 孝一、美田敏宏
  • 学会等名: 第83回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 愛媛県松山市 愛媛大学 城北キャンパス
• [図書] 寄生虫学研究：材料と方法 2014年版 (分担執筆) 実験動物を用いた吸虫卵採取の試み (2014)
  • 著者名/発表者名: 坪川大悟, 杉山 広, 三上房子, 柴田勝優, 柴原壽行, 福田孝一, 高宮信三郎, 山﨑 浩, 辻 尚利, 中村 健
  • 総ページ数: 179
  • 出版者: 三恵社, 名古屋
• [図書] 寄生虫学研究：材料と方法 2014年版 (分担執筆) マンソン裂頭条虫プレロセルコイドのゲル内長期生存保存法 (2014)
  • 著者名/発表者名: 坪川大悟, 三上房子, 高宮信三郎, 辻 尚利, 中村 健
  • 総ページ数: 179
  • 出版者: 三恵社, 名古屋
• [図書] 寄生虫学研究：材料と方法 2014年版 (分担執筆) ブタ回虫分泌型シトクロムｂ５前駆体の大腸菌における発現とその成熟蛋白の精製 (2014)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎, 橋本宗明, 山崎 浩, 余 涌, 美田敏宏
  • 総ページ数: 179
  • 出版者: 三恵社, 名古屋
• [図書] 寄生虫学研究：材料と方法 2014年版 (分担執筆) ワンステップオルガネラ分画法を用いた線虫ミトコンドリアの調製：ミトコンドリアプロテオーム解析にむけて (2014)
  • 著者名/発表者名: 高宮信三郎, 藤村 務, 峯木礼子, 高 ひかり, 進藤典子, 美田敏宏
  • 総ページ数: 179
  • 出版者: 三恵社, 名古屋
• [図書] 寄生虫学研究：材料と方法 2014年版 (分担執筆) 凍結融解による自己密度勾配作製法 (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤村 務, 村山季美枝
  • 総ページ数: 179
  • 出版者: 三恵社, 名古屋
• [図書] 寄生虫学研究：材料と方法 2014年版 (分担執筆) Ascaris suum由来シトクロムb５の結晶化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中嶋義隆, 山倉文幸
  • 総ページ数: 179
  • 出版者: 三恵社, 名古屋
• [備考] 順天堂大学 医学部 熱帯医学寄生虫病学講座 ホームページ
  • URL: http://www.juntendo.ac.jp/graduate/laboratory/labo/kiseityu/#