慢性炎症性疾患治療薬の開発を目指した抗ロイコトリエン単鎖抗体に関する基礎研究

• 研究課題/領域番号: 25460657
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用薬理学
• 研究機関: 岡山県立大学
• 研究代表者: 高橋 吉孝 岡山県立大学, 保健福祉学部, 教授 (10236333)
• 研究分担者: 川上 祐生 岡山県立大学, 保健福祉学部, 助教 (30453202)
• 連携研究者: 宮野 雅司 青山学院大学, 理工学部, 教授 (80332287) ; 藤 博幸 独立行政法人産業技術総合研究所, 生命情報工学センター, 副研究センター長 (70192656)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2013年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: ロイコトリエン / 単鎖抗体

研究成果の概要

慢性炎症に伴う組織の線維化において重要な役割を果たす脂質メディエーターであるロイコトリエンC4(LTC4)に対するモノクローナル抗体の一次構造に基づき、組換え体の自在な作成が可能な抗LTC4単鎖抗体の酵母での発現に成功した。本単鎖抗体は、大腸菌で発現したものと比較して発現量とLTへの親和性が大幅に上昇し、元のモノクローナル抗体とともに、マウス肺から調製した線維芽細胞をLTC4あるいはLTD4で刺激した際に起こるコラーゲン遺伝子COL1A1とCOL1A2の発現上昇を抑制した。さらに、X線結晶解析結果に基づいて本単鎖抗体の変異体を網羅的に作成し、LTの結合特異性に関わるアミノ酸の同定に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Insulin secretory defect and insulin resistance in isolated impaired fasting glucose and isolated impaired glucose tolerance (2016)
  • 著者名/発表者名: Sasabe S.A., Fukushima, M, Xin X, Taniguchi A, Nakai Y, Mitsui R, Takahashi Y, Tsuji H, Yabe D, Yasuda K, Kurose, T, Inagaki N, Seino Y
  • 雑誌名: J Diabetes Res 巻: 2016 ページ: 1298601-1298601
  • DOI: 10.1155/2016/1298601
  • NAID: 120005745643
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Inhibition of leukocyte-type 12-lipoxygenase by guava tea leaves prevents development of atherosclerosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Otsuki A, Mori Y, Kawakami Y, Ito H.
  • 雑誌名: Food Chem. 巻: in press ページ: 2-5
  • DOI: 10.1016/j.foodchem.2015.03.105
  • 査読あり
• [雑誌論文] <i>Dioscorea japonica</i> extract down-regulates prostaglandin E₂ synthetic pathway and induces apoptosis in lung cancer cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki-Yamamoto T, Tanaka S, Tsukayama I, Takafuji M, Hanada T, Arakawa T, Kawakami Y, Kimoto M, Takahashi Y.
  • 雑誌名: Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ 巻: 55 号: 3 ページ: 162-167
  • DOI: 10.3164/jcbn.14-25
  • NAID: 130004687668
  • ISSN: 0912-0009, 1880-5086
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Neutralization of leukotriene C4 and D4 activity by monoclonal and single-chain antibodies. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawakami Y, Hirano S, Kinoshita M, Otsuki A, Suzuki-Yamamoto T; Suzuki M, Kimoto M, Sasabe S, Fukushima M, Kishimoto K, Izumi T, Oga T, Narumiya S, Sugahara M, Miyano M, Yamamoto S, Takahashi Y.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 巻: 1840 号: 6 ページ: 1625-1633
  • DOI: 10.1016/j.bbagen.2013.12.016
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two New Monoterpene Glycosides with Inhibitory Effects on Leukocyte-type 12-Lipoxygenase Activity from Qing Shan Lu Shui Tea (2013)
  • 著者名/発表者名: Hideyuki Ito, Akemi Otsuki, Hitomi Mori, Peng Li, Mai Kinoshita, Yuki Kawakami, Hideaki Tsuji, Ding Zhi Fang, Yoshitaka Takahashi
  • 雑誌名: Molecules 巻: 18 号: 4 ページ: 4257-4266
  • DOI: 10.3390/molecules18044257
  • 査読あり
• [学会発表] 慢性炎症性疾患の新規治療法の開発を目指す基礎研究 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高橋吉孝, 川上祐生, 森 香子, 大河内脩史
  • 学会等名: OPUフォーラム2016
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2016-05-27
• [学会発表] 抗ロイコトリエン抗体の肺線維症治療薬としての応用を目指した研究 (2015)
  • 著者名/発表者名: 高橋吉孝
  • 学会等名: 川崎医科大学学術集会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2015-08-01
  • 招待講演
• [学会発表] 肺線維症に対する抗体治療薬の開発を目指した基礎研究 (2015)
  • 著者名/発表者名: 高橋吉孝, 川上祐生, 山本登志子, 大河内脩史
  • 学会等名: OPUフォーラム2015
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2015-05-29
• [学会発表] 炎症性疾患に対する抗体治療薬の開発をめざした基礎研究 (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋吉孝
  • 学会等名: OPUフォーラム2014
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2014-05-29
• [学会発表] 抗ロイコトリエン単鎖抗体を利用した抗体創薬に向けての基礎研究 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋 吉孝、川上 祐生、山本 登志子、福島 光夫
  • 学会等名: 岡山県立大学OPUフォーラム
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] ロイコトリエン単鎖抗体を利用した炎症性疾患治療薬の開発を目指した研究 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木下麻衣、大槻朱美、森香子、勝原加奈子、川上祐生、山本登志子、高橋吉孝
  • 学会等名: おかやまバイオアクティブ研究会第42回シンポジウム
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 部位特異的変異体を用いた抗ロイコトリエンC4単鎖抗体の抗原結合に関与するアミノ酸の同定 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木下麻衣、勝原加奈子、川上祐生、菅原光明、堀哲哉、 齊野廣道、宮野雅司、山本尚三、高橋吉孝
  • 学会等名: 第86回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Single-chain Antibody That Neutralizes Effects of Cysteinyl Leukotrienes (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshitaka Takahashi
  • 学会等名: Symposium on Advancesof Biomaterials and Regenerative Medicine
  • 発表場所: Taipei
  • 招待講演