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アミン反応性同位体タグによる血清タンパク質ストレス損傷の定量

研究課題

研究課題/領域番号 25460684
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 病態検査学
研究機関琉球大学 (2014-2015)
滋賀医科大学 (2013)

研究代表者

石田 哲夫  琉球大学, 理学部, 教授 (10176191)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円)
2015年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2013年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
キーワード翻訳後修飾 / ダブシルクロリド / アミノ酸 / 質量分析 / 安定同位体ラベル / キャピラリークロマトグラフィー / 微量分析 / メタボロミクス / 血清タンパク質 / 液体クロマトグラフィー / 血清アルブミン / 比較定量
研究成果の概要

合成されたばかりのタンパク質には20種類以外のアミノ酸はほとんど含まれない。しかし、生体内では生理的や病理的な化学修飾(リン酸化や活性酸素種との反応など)が常に起こるので、化学的な傷がタンパク質に蓄積していく。このタンパク質の傷は生体内のストレスを反映するので、異常を知らせるバイオマーカーになる。そこで、本研究では、タンパク質を消化してアミノ酸にまで分解し、傷のついたアミノ酸の化学構造を同定し定量することを目指した。その結果、重さだけが異なるタグ(ダブシル基)をアミノ酸につけることで基準試料と未知試料を精確に比較分析・定量する基礎技術が確立できた。

報告書

(4件)
  • 2015 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2014 実施状況報告書
  • 2013 実施状況報告書
  • 研究成果

    (21件)

すべて 2016 2015 2014 2013

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 謝辞記載あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (16件) (うち招待講演 1件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] フラビン酵素の低酸素下で増強する基質活性化と阻害2015

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫
    • 雑誌名

      生化学

      巻: 87 号: 3 ページ: 315-320

    • DOI

      10.14952/SEIKAGAKU.2015.870315

    • ISSN
      0037-1017
    • 年月日
      2015-06-25
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Planarian D-amino acid oxidase is involved in ovarian development during sexual induction.2014

    • 著者名/発表者名
      Maezawa T, Tanaka H, Nakagawa H, Ono M, Aoki M, Matsumoto M, Ishida T, Horiike K, Kobayashi K.
    • 雑誌名

      Mech of Development

      巻: 132 ページ: 69-78

    • DOI

      10.1016/j.mod.2013.12.003

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Immunohistochemical localization of d-serine dehydratase in chicken tissues.2014

    • 著者名/発表者名
      Nishimura Y, Tanaka H, Ishida T, Imai S, Matsusue Y, Agata Y, Horiike K.
    • 雑誌名

      Acta Histochem.

      巻: in press 号: 5 ページ: 244-4

    • DOI

      10.1016/j.acthis.2013.12.011

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] ダブシル同位体ラベルによる生体試料中アミノ酸の定量2016

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫、前澤孝信
    • 学会等名
      第64回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      ホテル阪急エキスポパーク
    • 年月日
      2016-05-18
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] アフリカマイマイAchatina fulica粘液中のL-アミノ酸酸化酵素の精製とその酵素学的性質の解析2015

    • 著者名/発表者名
      安田翔、天願竣冶、石田哲夫
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 巨大陸生カタツムリAchatina fulicaのD-セリン分解酵素の探索2015

    • 著者名/発表者名
      下地康介、石田哲夫
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] トリプル安定同位体ダブシルラベルによる微量スケールアミノ酸分析法の開発2015

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫、天願竣冶、安田翔
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ダブシルヒドラジンを用いた2-オキソ酸の定量法の開発とその応用2015

    • 著者名/発表者名
      天願竣冶、安田翔、石田哲夫
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] アフリカマイマイAchatina fulica粘液中のL-アミノ酸酸化酵素の精製2015

    • 著者名/発表者名
      安田翔、天願竣治、石田哲夫
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      徳島市あわぎんホール
    • 年月日
      2015-06-24 – 2015-06-26
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] フラビンオキシダーゼの酸素濃度依存性基質阻害・活性化の理論的解析2015

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫、天願竣治、安田翔
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      徳島市あわぎんホール
    • 年月日
      2015-06-24 – 2015-06-26
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] アフリカマイマイAchatina fulica粘液中のL-アミノ酸酸化酵素の精製2015

    • 著者名/発表者名
      安田翔、天願竣冶、石田哲夫
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] フラビンオキシダーゼの酸素濃度依存性基質阻害・活性化の理論的解析2015

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫、天願竣冶、安田翔、
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 大腸菌ジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼの嫌気下での精製と機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      吉岡博史、石田哲夫、谷泰史、三原久明
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年会
    • 発表場所
      明治大学生田キャンパス
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 質量差6のトリプルタグによるアミノ基含有化合物の精確な定量2013

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫
    • 学会等名
      BIO tech 2013 アカデミックフォーラム
    • 発表場所
      東京ビッグサイト
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] ヒト血清アルブミンへのダンシルアミノ酸の結合機構2013

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫、田中裕之、西村嘉洋、坂本健補、堀池喜八郎
    • 学会等名
      第13回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      とりぎん文化会館
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 安定同位体標識ダブシルクロリドを利用したアミン類代謝動態解析2013

    • 著者名/発表者名
      石田哲夫、田中裕之、西村嘉洋、坂本健補、堀池喜八郎
    • 学会等名
      2013年度酵素・補酵素研究会
    • 発表場所
      立命館大学びわこ・くさつキャンパス
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] Escherichia coli由来ジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼのnFeS2鉄硫黄クラスターに配位するアミノ酸残基の役割2013

    • 著者名/発表者名
      谷泰史、吉田吉孝、秀瀬涼太、斎藤茂樹、中島洋、渡辺芳人、石田哲夫、田中裕之、堀池喜八郎、栗原達夫、江崎信芳、三原久明
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 補酵素FADの構造変化がフェレドキシン還元酵素BphA4の全体構造変化に与える影響2013

    • 著者名/発表者名
      千田美紀、西澤明人、木村成伸、石田哲夫、福田雅夫、千田俊哉
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] 脊椎動物の進化とD-セリン代謝2013

    • 著者名/発表者名
      田中裕之、石田哲夫、西村嘉洋、坂本健補、堀池喜八郎
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [図書] Chapter 14: Frontal gel filtration in Advanced Methods in Structural Biology (Toshiya Senda, Katsumi Maenaka eds)2016

    • 著者名/発表者名
      Tetsuo Ishida
    • 総ページ数
      27
    • 出版者
      Springer
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [図書] Advanced methods in structural biology Chapter 14: Frontal gel filtration2014

    • 著者名/発表者名
      Ishida, T.
    • 総ページ数
      12
    • 出版者
      Springer Japan
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書

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公開日: 2014-07-25   更新日: 2019-07-29  

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